Gezielte Leberablation: Hepatozytentod mit Metronidazol bei transgenen Zebrafischlarven induzieren
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Choi T.Y., et al. Hepatozyten-spezifische Ablation in Zebrafischen zur Erforschung der Biliary-getriebenen Leberregeneration. J. Vis. (2015)
Der Artikel beschreibt die gezielte Leberablation, eine Methode zur Induktion des Hepatozytentodes mit Metronidazol bei transgenen Zebrafischlarven. Das Probenprotokoll beschreibt den Prozess zur Erzeugung, Manipulation und Bewertung der gezielten Leberablation bei Zebrafischen.
Protocol
1. Herstellung von Embryonen/Larven 100 Embryonen in eine 100 mm Petrischale mit 25 ml Eiwasser geben. Halten Sie nicht mehr als 100 Embryonen pro Petrischale und heben Sie sie bei 28 °C an. Um die Pigmentierung zu hemmen, phenylthiourea (PTU) vor 10 Stunden nach der Befruchtung (hpf) in die Petrischalen geben und Embryonen/Larven bis 80 hpf erhöhen. Die endletzte Konzentration von PTU beträgt 0,2 mM.VORSICHT: PTU ist giftig. Verwendung in Übereinstimmung mit den entsprechende…
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
Citer Cet Article
Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).