FITC-Dextran التغذية: طريقة لقياس نفاذية الأمعاء في C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: لو، ت. أ. ن. وآخرون. قياس آثار البكتيريا والمواد الكيميائية على نفاذية المعوية من elegans Caenorhabditis. ج. فيس إكسب. (2019).
يقدم هذا الفيديو طريقة لتصور وقياس سلامة تجويف الأمعاء C. elegans عن طريق تغذية الديدان FITC المسمى dextran. يظهر بروتوكول المثال المقايسة التي أجريت مع 3,3’diindolylmethane (DIM) المعالجة والديدان التي تغذيها مسببات الأمراض.
Protocol
هذا البروتوكول هو مقتطف من Le et al, قياس آثار البكتيريا والمواد الكيميائية على نفاذية المعوية من elegans Caenorhabditis, J. Vis. Exp. (2019). إعداد لوحات NGM لاختبار آث?…
Representative Results
الشكل 1: تأثير DIM على نفاذية المعوية من C. elegans تغذية P. aeruginosa. صور المجهر من الديدان من (أ) E. coli OP50 دون تغذية FITC-dextran, (B) E. القولونية مع تغذية FITC-dextran, (…
Materials
| 3,3’-diindolylmethane | Sigma | D9568 | |
| 90×15 mm Petri dishes | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
| Bactor Agar | Beckton Dickinson | REF. 214010 | |
| Formaldehyde solution | Sigma | F1635 | |
| Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
| Cholesterol | Sigma | C3045 | |
| Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene | Corning Incorporated | REF. 3631 | |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2650 | |
| Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
| Fluorescein isothiocyanate – dextran | Sigma | FD10S | |
| Harmony software | PerkinElmer | verson 3.5 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Bioreagents | BP2213-1 | |
| Fluoromount aqueous mounting medium | Sigma | F4680 | |
| Operetta CLS High-Content Analysis System | PerkinElmer | HH16000000 | |
| Peptone | Merck | EMD 1.07213.1000 | |
| Pseudomonas aeruginosa PA01 | Korean Collection for Type Culture | KCTC NO. 1637 | |
| Sodium Chloride | Fisher Bioreagents | BP358-1 | |
| Stereo Microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |
Citer Cet Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).