Freeze-Cracking van nematoden: een methode om inwendige wormweefsels bloot te leggen voor vlekken
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Zhang, N., et al. The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging. Drs. J. Vis. Exp. (2017).
Deze video beschrijft freeze-cracking, een methode om C. elegans weefsels toegankelijk te maken voor antilichaamkleuring door de nagelriem te verstoren.
Protocol
Dit protocol is een fragment uit Zhang et al, The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging, J. Vis. Exp. (2017). Antilichaamkleuring van de C. elegans darm Fixatie Neem een schone glazen glijbaan en gebruik poly-L-lysine om een…
Materials
| Antibody staining | |||
| poly-L-lysine | Sigma | P5899 | |
| Methanol | Fisher Scientific | A452-4 | |
| Acetone | Fisher Scientific | A949SK-4 | |
| Permount | Fisher Scientific | SP15-100 | |
| Microscope slides | Fisher Scientific | 4448 | |
| Microscope coverslips (22×22-1) | Fisher Scientific | 12-542-B | |
| M9 Medium | lab made | ||
| OP50 bacteria | CGC |
Citer Cet Article
Freeze-Cracking of Nematodes: A Method to Expose Interior Worm Tissues for Staining. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20130, doi: (2023).