Interrupción de la cutícula: un método para recoger hemolymph de larvas de Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Reimels, T. A. y Pfleger, C.M. Métodos para examinar la glándula linfática y los hemocitos en larvas de Drosophila. J. Vis. (2016).
La hemolífago drosophila sirve como sangre y líquido intersticial, circulando por todo el cuerpo durante las etapas larvarias y adultas. Este video describe un protocolo para recolectar hemolífanos larvarios con el fin de cuantificar las células circulantes.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Reimels y Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Concentración de hemocitos circulantes Para obtener larvas de aproximadamente la misma etapa de desarrollo para este ensayo, restringir la recolección de huevos permitiendo a las hembras poner huevos durante un período de tiempo fijo de 2 a 6 horas. Recoger larvas en la disección de pozos de platos llenos de…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
Citer Cet Article
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).