CApillary FEeder (CAFE) Tahlil: Drosophila'da Gıda Tüketimini ve Tercihini İzleme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Diegelmann, S., vd. CApillary FEeder Assay Drosophila melanogaster’daGıda Alımını Ölçer. J. Vis. Exp. (2017).
Bu videoda, gıda alımını ve sınırsız meyve sineklerinin tercihini ölçen davranışsal bir yöntem olan CApillary FEeder veya CAFE tahlilleri açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, yiyecekleri teslim etmek ve alımını izlemek için kullanılan sıvı dolu kılcal damarlardan minimum buharlaşma ile tahlilin nasıl gerçekleştirildiğini göstermektedir.
Protocol
Bu protokol Diegelmann ve ark., CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017)’den bir alıntıdır. 1. CApillary FEeder Tahlilinin Montajı ve Gerçekleştirilmesi Oruç tutmak gerekmemesi halinde deneysel sinekleri dokunarak veya üfleme borusu ile tahlilden tahlile aktarın. Buharlaşmayı ölçmek için sineksiz üç kontrol şişesi eklenin. Dış açıklıklardan birini kapatan bir pipet ucunu (2…
Representative Results
Şekil 1: Drosophila melanogaster CApillary FEeder Tahlil. A) Sineklerle beslenme tahlilleri. Nemlendirilmiş filtre kağıdı şişenin dibinde su sağlar. Deney sırasında dört kılcal damar sağlanır (zıt kılcal damarlarda kırmızı ve mavi renkli yiyecekler). Kılcal damarların ikinci bir pipet ucuyla sabitlendiğini ve kullanılmayan pozisyonların pipet uçları kullanılarak kapatı…
Materials
| Vials (breeding) | Greiner Bio-One | 960177 | www.greinerbioone.com |
| Vials (CAFE assay) | Greiner Bio-One | 217101 | www.greinerbioone.com |
| Lid-CAFE assay | Workshop | – | – |
| Plastic box, low wall | Plastime | 353 | www.plastime.it |
| Cover for the plastic box | Workshop | – | – |
| Capillaries | BLAUBRAND | REF 7087 07 | www.brand.de |
| Pipette tips | Greiner Bio-One | 771290 | www.greinerbioone.com |
| Filter paper circles | Whatman | 10 311 804 | www.sigmaaldrich.com |
| D(+)-Sucrose | AppliChem | 57-50-1 | www.applichem.com |
| Ethanol absolute | VWR Chemicals | 20,821,330 | www.vwr.com |
| Food color (red, E124) | Backfun | 10027 | www.backfun.de |
| Food color (blue, E133) | Backfun | 10030 | www.backfun.de |
| Soap solution (CVK 8) | CVH | 103220 | www.cvh.de |
| Digital caliper | GARANT | 412,616 | www.hoffmann-group.com |
| Vials (breeding) | Height 9.8 cm, diameter 4.8 cm | ||
| Vials (CAFE assay) | Height 8 cm, diameter 3.3 cm | ||
| Lid-CAFE assay | Produced in university workshop, technical drawing supplied Please click here to download this file. |
||
| Plastic box, low wall | A plastic grid inlay was custom-made for 8 x 10 vial positions | ||
| Cover for the plastic box | Dimensions (37 x 29 x 18 cm) | ||
| Capillaries | DIN ISO 7550 norm, IVD-guideline 98/79 EG, ends polished | ||
| Pipette tips | Pipettes for the outer circle are cut according to the lid | ||
| Filter paper circles | 45 mm diameter works nicely if folded for the vials used | ||
| D(+)-Sucrose | Not harmful | ||
| Ethanol absolute | Highly flammable liquid and vapor | ||
| Food color (red, E124) | Not stated | ||
| Food color (blue, E133) | Not stated | ||
| Soap solution (CVK 8) | Odor neutral soap | ||
| Digital caliper | |||
| Standard fly food | (for 20 L) | ||
| Agar | 160 g | ||
| Brewer's Yeast | 299.33 g | ||
| Cornmeal | 1,200 g | ||
| Molasses | 1.6 L | ||
| Propionic acid | 57.3 mL | ||
| Nipagin 30% | 160 mL |
Citer Cet Article
The CApillary FEeder (CAFE) Assay: A Method to Track Food Consumption and Preference in Drosophila. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20115, doi: (2023).