Il saggio CApillary FEeder (CAFE): un metodo per tenere traccia del consumo e delle preferenze alimentari nella Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Diegelmann, S., et al. J. Vis. Exp. (2017).
Questo video descrive il test CApillary FEeder, o CAFE, un metodo comportamentale che misura l’assunzione di cibo e la preferenza dei moscerini della frutta sfrenati. Il protocollo in primo piano mostra come eseguire il saggio con un’evaporazione minima dai capillari riempiti di liquido utilizzati per consegnare il cibo e monitorarne l’assunzione.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017). 1. Assemblaggio ed esecuzione del saggio FEeder CApillary Se il digiuno non è necessario, trasferire le mosche sperimentali al saggio maschiando o soffiando.” Assicurati di includere tre fiale di controllo senza mosche per quantificare l’evaporazione. Rimuovere con cura una punta di pipetta (2 – …
Representative Results
Figura 1: Il saggio Drosophila melanogaster CApillary FEeder. A) Il saggio di alimentazione con le mosche. La carta filtrante inumidita fornisce acqua nella parte inferiore del flaconcino. Durante l’esperimento vengono forniti quattro capillari (cibo di colore rosso e blu in capillari opposti). Si noti che i capillari sono fissati in posizione da una seconda punta di pipetta e le posizioni inutil…
Materials
| Vials (breeding) | Greiner Bio-One | 960177 | www.greinerbioone.com |
| Vials (CAFE assay) | Greiner Bio-One | 217101 | www.greinerbioone.com |
| Lid-CAFE assay | Workshop | – | – |
| Plastic box, low wall | Plastime | 353 | www.plastime.it |
| Cover for the plastic box | Workshop | – | – |
| Capillaries | BLAUBRAND | REF 7087 07 | www.brand.de |
| Pipette tips | Greiner Bio-One | 771290 | www.greinerbioone.com |
| Filter paper circles | Whatman | 10 311 804 | www.sigmaaldrich.com |
| D(+)-Sucrose | AppliChem | 57-50-1 | www.applichem.com |
| Ethanol absolute | VWR Chemicals | 20,821,330 | www.vwr.com |
| Food color (red, E124) | Backfun | 10027 | www.backfun.de |
| Food color (blue, E133) | Backfun | 10030 | www.backfun.de |
| Soap solution (CVK 8) | CVH | 103220 | www.cvh.de |
| Digital caliper | GARANT | 412,616 | www.hoffmann-group.com |
| Vials (breeding) | Height 9.8 cm, diameter 4.8 cm | ||
| Vials (CAFE assay) | Height 8 cm, diameter 3.3 cm | ||
| Lid-CAFE assay | Produced in university workshop, technical drawing supplied Please click here to download this file. |
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| Plastic box, low wall | A plastic grid inlay was custom-made for 8 x 10 vial positions | ||
| Cover for the plastic box | Dimensions (37 x 29 x 18 cm) | ||
| Capillaries | DIN ISO 7550 norm, IVD-guideline 98/79 EG, ends polished | ||
| Pipette tips | Pipettes for the outer circle are cut according to the lid | ||
| Filter paper circles | 45 mm diameter works nicely if folded for the vials used | ||
| D(+)-Sucrose | Not harmful | ||
| Ethanol absolute | Highly flammable liquid and vapor | ||
| Food color (red, E124) | Not stated | ||
| Food color (blue, E133) | Not stated | ||
| Soap solution (CVK 8) | Odor neutral soap | ||
| Digital caliper | |||
| Standard fly food | (for 20 L) | ||
| Agar | 160 g | ||
| Brewer's Yeast | 299.33 g | ||
| Cornmeal | 1,200 g | ||
| Molasses | 1.6 L | ||
| Propionic acid | 57.3 mL | ||
| Nipagin 30% | 160 mL |
Citer Cet Article
The CApillary FEeder (CAFE) Assay: A Method to Track Food Consumption and Preference in Drosophila. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20115, doi: (2023).