Yetişkin Drosophila Beyinlerinin Montajı: Konfokal Görüntüleme için Slayt Hazırlama Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Kelly, S.M., vd. Yetişkin Drosophila melanogaster Beyinlerinde Mantar Gövdesi ve Fotoreceptör Nöronlarının Diseksiyonu ve İmmünofluoresan Boyanması. J. Vis. Exp. (2017).
Bu video, bir köprü kaydırağı altında yetişkin sineklerden sağlam beyinleri monte etme yöntemini açıklar ve floresan mikroskopi için bağışıklığı olan beyinlerde gerçekleştirilen protokolü gösterir.
Protocol
Bu protokol Kelly ve ark.,Mantar Vücudunun Diseksiyonu ve İmmünofluoresan Lekelemesi ve Yetişkin Drosophila melanogaster Beyinlerinde Fotoreceptör Nöronları, J. Vis. Exp. (2017) bir alıntıdır. 1. Yetişkin D. melanogaster Beyinlerinin Mikroskop Slaytlarına ve Görüntülemeye MonteSi Bir “köprü” slaytı oluşturun. pozitif yüklü bir slaytta yaklaşık 1 cm arayla iki “taban” kapak kılıfı yerleştirin. Slaydın pozitif yüklü tara…
Representative Results
Şekil 1: İmmünofluoresans görüntülemeye hazırlık için beyinlerin montajı. (A) Beyinler, beyinlerin düzleşmesini önlemek için köprü kapağına sahip SuperFrost Plus slaytlarına monte edilir. İki “taban” kapak kayması, net tırnak cilası ve parçalanmış beyinler ile Superfrost Plus pozitif yüklü bir slayda yapışır ve daha sonra aralarındaki kaydırağa yerleştirilir. Beyinlerin …
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Citer Cet Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).