Montaje de cerebros drosophila adultos: un método para preparar diapositivas para imágenes confocales
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Kelly, S.M., et al. Disección y Tinción inmunofluorescente de cuerpo de hongos y neuronas fotorreceptores en cerebros adultos de Drosophila melanogaster. J. Vis. (2017).
Este video describe un método de montaje de cerebros intactos de moscas adultas bajo una diapositiva de puente y muestra el protocolo realizado en cerebros inmunodeprim humanos para microscopía fluorescente.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Kelly et al., Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montaje de cerebros adultos D. melanogaster en diapositivas de microscopio e imágenes Construir una diapositiva de “puente”. Coloque dos tapas “base” de aproximadamente 1 cm de distancia en una diapositiva cargada positivamente. Asegúrese de que el lado…
Representative Results
Figura 1: Montaje de cerebros en preparación para imágenes de inmunofluorescencia. (A) Los cerebros están montados en diapositivas SuperFrost Plus con una cubierta de puente para evitar el aplanamiento de los cerebros. Dos resbalones de cubierta “base” se adhieren a un tobogán Superfrost Plus cargado positivamente con esmalte de uñas transparentes y cerebros diseccionados se colocan en el deslizamien…
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Citer Cet Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).