Neonatal Mouse Bone Marrow Isolation and Preparation of Bone Marrow-Derived Macrophages

Madhavi Annamanedi; Jordan K. Vance; Cory M. Robinson

doi:10.3791/66613

Journal

Immunologie et infection

Phagocytic Assay Evaluation of Neonatal Bone Marrow Derived Macrophages

May 24, 2024

Isolamento del midollo osseo di topo neonatale e preparazione di macrofagi derivati dal midollo osseo

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Metodo non enzimatico per l'isolamento di cellule di midollo osseo di topo neonatale

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Differenziazione di macrofagi derivati dal midollo osseo neonatale utilizzando un surnatante di cellule L929

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Valutazione della funzione fagocitaria dei macrofagi derivati dal midollo osseo neonatale utilizzando un test di captazione batterica fluorescente

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Madhavi Annamanedi¹, Jordan K. Vance¹, Cory M. Robinson^1,2

¹Department of Microbiology, Immunology, & Cell Biology,West Virginia University School of Medicine, ²Vaccine Development Center,West Virginia University Health Sciences Center

Summary

Questo protocollo descrive un metodo semplice e non enzimatico per isolare cellule di midollo osseo neonatale di topo di 7-9 giorni e generare macrofagi differenziati utilizzando un surnatante di cellule L929 come fonte di fattore stimolante le colonie di granulociti (M-CSF). I macrofagi derivati dal midollo osseo sono stati ulteriormente analizzati per gli antigeni di superficie F4/80, CD206, CD11b e la competenza funzionale.