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Capítulos
- 00:04Introduction
- 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
- 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
- 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
- 07:57Quantification of Virus Titers
- 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
- 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
- 15:17Conclusion
Le protocole décrit une méthode permettant d’introduire une diversité génétique contrôlable dans le génome du virus de l’hépatite C en combinant la synthèse d’ARN mutant sur toute la longueur à l’aide de la PCR sujette aux erreurs et de la génétique inverse. La méthode fournit un modèle pour la sélection phénotypique et peut être utilisée pour les génomes de virus à ARN à sens positif de 10 kb de long.
