Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Capítulos
- 00:04Introduction
- 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
- 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
- 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
- 07:57Quantification of Virus Titers
- 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
- 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
- 15:17Conclusion
Protokollen beskriver en metode til at indføre kontrollerbar genetisk mangfoldighed i hepatitis C-virusgenomet ved at kombinere mutant RNA-syntese i fuld længde ved hjælp af fejlbehæftet PCR og omvendt genetik. Metoden giver en model for fænotypeselektion og kan bruges til 10 kb lange RNA-virusgenomer med positiv sans.
