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使用无细胞系统对用于蛋白质原型的最小线性模板进行扩增的快速酶促方法
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Rapid, Enzymatic Methods for Amplification of Minimal, Linear Templates for Protein Prototyping using Cell-Free Systems
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使用无细胞系统对用于蛋白质原型的最小线性模板进行扩增的快速酶促方法

DOI:
10.3791/62728-v

•

07:35 min

•

June 14, 2021

•

,
1Chemical and Biological Engineering,Iowa State University

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:42Amplifying the Gene Fragment via PCR
  • 02:21Digestion and Circularization
  • 03:28Isothermal Rolling Circle Amplification (RCA)
  • 04:28Cell-free Reaction and Subtilisin Assay
  • 05:41Results: Protein Expression from the Rolling Circle Amplification (RCA) Templates Using Cell-Free Systems
  • 06:49Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

该研究描述了一种方案，用于在不克隆或使用活细胞的情况下从合成基因片段中创建大量（μg-mg）DNA以进行蛋白质筛选活动。将最小模板酶消化并循环化，然后使用等温滚动循环扩增进行扩增。无细胞表达反应可以用未纯化的产物进行。

Tags

Keywords: Cell-free SystemsProtein PrototypingRolling Circle AmplificationPCRDNA TemplateRestriction DigestionDNA LigationEnzymatic Amplification

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