Journal
/
Biología
/
Sondando cinética mRNA no espaço e no tempo em Escherichia coli usando fluorescência de molécula única de duas cores na hibridização situ
JoVE Revista
Biología
This content is Free Access.
JoVE Revista Biología
Probing mRNA Kinetics in Space and Time in Escherichia coli using Two-Color Single-Molecule Fluorescence In Situ Hybridization

Sondando cinética mRNA no espaço e no tempo em Escherichia coli usando fluorescência de molécula única de duas cores na hibridização situ

DOI:
10.3791/61520-v

•

10:01 min

•

July 30, 2020

•

,
1Department of Physics,University of Illinois at Urbana-Champaign, 2Center for the Physics of Living Cells,University of Illinois at Urbana-Champaign, 3Carl R. Woese Institute for Genomic Biology,University of Illinois at Urbana-Champaign, 4Center for Biophysics and Quantitative Biology,University of Illinois at Urbana-Champaign

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:42Coverslip and Glass Slide Preparation
  • 01:46Time-Course Experiment and Sample Fixation
  • 03:18Cell Membrane Permeabilization
  • 03:57Probe Hybridization
  • 04:31Imaging
  • 05:25Post-Hybridization Wash and Imaging Preparation
  • 06:20Image Analysis
  • 07:36Results: Representative mRNA Kinetic Probing Analysis
  • 09:22Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Este protocolo descreve uma aplicação de fluorescência de molécula única na hibridização situ (smFISH) para medir a cinética in vivo da síntese e degradação do mRNA.

Tags

MRNA KineticsTwo-color Single-molecule Fluorescence In Situ Hybridization (smFISH)TranscriptionMRNA DegradationEscherichia ColiTime Course ExperimentIPTG InductionONPF RepressionCell FixationCell Permeabilization

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

Fluorescência In situ Hybridization (FISH) Protocolo no esperma humano

Usando Monte Whole In situ Hibridação a ligação de Biologia Molecular e Organísmicos

Medição da Cinética de Transcrição mRNA em células Living Single

A High Throughput In situ Método de hibridização para caracterizar padrões de expressão de mRNA no Rato Fetal Trato urogenital inferior

High Throughput Screening da atividade endoglucanase de fungos em Escherichia coli</em

Detecção de RNA viral por fluorescência<em> In situ</em> Hybridization (FISH)

Isolamento de Ribossomos ligados a polipeptídeos nascentes<em> In vitro</em> Identificar Sites Pausa translacionais Junto mRNA

Mapeamento bacterianas redes funcionais e vias<em> Escherichia Coli</em> Usando sintéticos matrizes genéticas

Visualização e análise de moléculas de mRNA Usando Fluorescência<em> In Situ</em> A hibridação em<em> Saccharomyces cerevisiae</em

Método simples para DNA de Fluorescência<em> In Situ</em> A hibridação com Cromossomos Squashed

Read Article