Journal
/
Bioquímica
/
Hoge gevoeligheid meten van transcriptie Factor-DNA-bindende affiniteiten concurrerende getitreerd wordt met behulp van fluorescentie microscopie
JoVE Revista
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Revista Bioquímica
High Sensitivity Measurement of Transcription Factor-DNA Binding Affinities by Competitive Titration Using Fluorescence Microscopy
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Hoge gevoeligheid meten van transcriptie Factor-DNA-bindende affiniteiten concurrerende getitreerd wordt met behulp van fluorescentie microscopie

DOI:
10.3791/58763-v

•

06:38 min

•

February 07, 2019

•

, , , ,
1Gene Center and Department of Biochemistry, Center for Protein Science Munich (CIPSM),Ludwig-Maximilians-Universität München

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:00Oligomer Annealing
  • 01:45Gel Preparation
  • 03:35Addition of the Competitor DNA Solution and Image Acquisition
  • 04:41Competitive Titration Assay and the Fitting Procedure
  • 05:17Results: Determining TF-DNA Binding Affinities Using Fluorescence Microscopy
  • 06:07Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Hier presenteren we een nieuwe methode voor de vaststelling van bindende affiniteiten bij evenwicht en in oplossing met hoge gevoeligheid op grote schaal. Dit verbetert de kwantitatieve analyse van transcriptie factor-DNA-bindende. De methode is gebaseerd op geautomatiseerde fluorescentie anisotropie metingen in een gecontroleerde levering systeem.

Tags

Keywords: Transcription Factor-DNA BindingFluorescence MicroscopyDissociation ConstantCompetitive TitrationAnisotropy MeasurementBinding AffinityProtein-DNA InteractionDNA AnnealingAgarose GelTitration PlateCalibration WellNile Blue Dye

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

check_url/es/58763?article_type=v

Kwantificering van bacteriële histidine kinase autofosforylering Met een Nitrocellulose bindingsassay
check_url/es/58763?article_type=v

Hoge resolutie single particle analyse van elektroncryo-microscopie beelden met behulp van SPHIRE
check_url/es/58763?article_type=v

Meting van eiwitbinding aan F-actine door co-sedimentatie
check_url/es/58763?article_type=v

Bepaling van antilichaam met hoge affiniteit antigeen-bindend Kinetics met behulp van vier Biosensor Platforms
check_url/es/58763?article_type=v

Imaging amyloïde weefsels gekleurd met verlichte geconjugeerd Oligothiophenes door hyperspectrale Confocal Microscopie en fluorescentie levensduur Imaging
check_url/es/58763?article_type=v

Rab10 fosforylering detectie door LRRK2 activiteit met behulp van SDS-pagina met een fosfaat-bindende-Tag
check_url/es/58763?article_type=v

Analyse van β-Amyloid-geïnduceerde afwijkingen op fibrine Clot structuur door spectroscopie en Scanning elektronen microscopie
check_url/es/58763?article_type=v

Vastleggen en identificatie van RNA-bindende proteïnen met behulp van klik chemie-bijgewoonde RNA-interactome vangen (CARIC) strategie
check_url/es/58763?article_type=v

DNA-sequentie herkenning door DNA primase met behulp van high-throughput Primase profilering
check_url/es/58763?article_type=v

High-throughput totale interne reflectie fluorescentie en directe stochastische optische reconstructie microscopie met behulp van een Photonic chip

Read Article