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Journal
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Genética
/
哺乳類システムのクローン作成 CRISPR ガイド RNA
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Genética
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JoVE Revista
Genética
CRISPR Guide RNA Cloning for Mammalian Systems
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
哺乳類システムのクローン作成 CRISPR ガイド RNA
DOI:
10.3791/57998-v
•
06:48 min
•
October 02, 2018
•
Sathiji Nageshwaran*
1,2
,
Alejandro Chavez*
1,2,3
,
Nan Cher Yeo
2
,
Xiaoge Guo
2
,
Alissa Lance-Byrne
,
Angela Tung
,
James J. Collins
4,5,6,7
,
George M. Church
2
1
Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering
,
Harvard University
,
2
Department of Genetics
,
Harvard Medical School
,
3
Department of Pathology
,
Massachusetts General Hospital
,
4
Institute for Medical Engineering & Science
,
Massachusetts Institute of Technology
,
5
Synthetic Biology Center
,
Massachusetts Institute of Technology
,
6
Department of Biological Engineering
,
Massachusetts Institute of Technology
,
7
Broad Institute
Capítulos
00:04
Título
00:25
Preparation of the Primers and Expression Vectors
02:05
Ligating the Annealed gRNA Oligonucleotides
02:59
Transformation of
E. coli
04:03
PCR Analysis
05:35
Results: CRISPR Guided RNA Cloning
06:23
Conclusion
Summary
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ここでは、シンプルで効率的と sgRNA のクローニングのコスト効果の高い方法の通りです。
Tags
CRISPR
Guide RNA
Cloning
Mammalian System
Plasmid
Single-guide RNA
Oligonucleotide
Ligation
E. Coli
Competent Cells
Transformation
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