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Microinjeção de proteína CRISPR/Cas9 em bagre do canal, Ictalurus punctatus, embriões para Gene Editing
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JoVE Revista Genética
Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjeção de proteína CRISPR/Cas9 em bagre do canal, Ictalurus punctatus, embriões para Gene Editing

DOI:
10.3791/56275-v

•

16:08 min

•

January 20, 2018

•

, , , , , , ,
1School of Fisheries, Aquaculture and Aquatic Sciences,Auburn University, 2Department of Animal Wealth Development, Faculty of Veterinary Medicine,Suez Canal University, 3Anatomy and Embryology Department, Faculty of Veterinary Medicine,Cairo University, 4Department of Molecular Physiology and Biophysics,Vanderbilt University, 5Life Science Institute,University of Michigan

Capítulos

  • 00:00Título
  • 01:14Brood Stock Selection and Spawning
  • 04:16Sperm Preparation
  • 05:33Egg Collection and Fertilization
  • 08:07Needle Pulling and Loading
  • 10:20Microinjection of Catfish Embryos
  • 12:34Resultados
  • 15:24Conclusion

Summary

Traducción Automática

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Um protocolo simples e eficiente de microinjeção para edição de genes em embriões de bagre de canal usando o sistema CRISPR/Cas9 é apresentado. Neste protocolo, guia de RNAs e proteínas Cas9 foram injetadas na gema de uma célula de embriões. Este protocolo foi validado por nocauteando dois genes imune-relacionados de bagre do canal.

Tags

CRISPR/Cas9MicroinjectionChannel CatfishIctalurus PunctatusGene EditingTICAM1RBLBroodstock SelectionSpawningLHRHAHormone InjectionEmbryoProtocolFunctional Genomics

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