Journal
/
Bioquímica
/
Hög precision FRET vid en-molekylnivå för biomolekylstrukturbestämning
JoVE Revista
Bioquímica
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido.  Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
JoVE Revista Bioquímica
High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Hög precision FRET vid en-molekylnivå för biomolekylstrukturbestämning

DOI:
10.3791/55623-v

•

11:24 min

•

May 13, 2017

•

, , , , ,
1Department of Chemistry,Clemson University, 2Department of Physics and Astronomy,Clemson University, 3Department of Biochemistry and Molecular Biology, Center for Membrane Biology, Graduate School for Biomedical Sciences,University of Texas Health Science Center

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:07Preparation of Materials
  • 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
  • 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
  • 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
  • 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
  • 10:54Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Ett protokoll för hög precision FRET-experiment på den enda molekylnivån presenteras här. Dessutom kan denna metod användas för att identifiera tre konformationella tillstånd i den ligandbindande domänen av N-metyl-D-aspartat (NMDA) -receptorn. Att bestämma exakta avstånd är det första steget mot att bygga strukturella modeller baserade på FRET-experiment.

Tags

Keywords: High Precision FRETSingle-moleculeBiomolecule Structure DeterminationFörster Resonance Energy TransferMultiparameter Fluorescence DetectionInterdye Distance MeasurementNMDA ReceptorConformational StatesStructural ModelDynamic Biomolecules

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

check_url/es/55623?article_type=v

Strukturell information från enda molekyl FRET Experiment Använda Fast Nano-positioneringssystem
check_url/es/55623?article_type=v

En enkel, Robust och hög genomströmning enda molekyl Flow Stretching Assay genomförandet för att studera Transport av molekyler längs DNA
check_url/es/55623?article_type=v

Singel-molekyl Manipulation av G-quadruplexes av magnetisk pincett
check_url/es/55623?article_type=v

Hög genomströmning, absolut bestämning av halten av ett Protein som är valda på vävnad nivåer med hjälp av kvantitativa Dot Blot analys (QDB)
check_url/es/55623?article_type=v

Använda tre färger singel-molekyl bandet att studera korrelationen av proteininteraktioner
check_url/es/55623?article_type=v

Kovalent immobilisering av proteiner för den enda molekyl kraft spektroskopin
check_url/es/55623?article_type=v

Proteom-wide kvantifiering av märkning homogenitet på nivån enda molekyl
check_url/es/55623?article_type=v

Encellsanalys av transkriptionellt aktiva alleler med enmolekylig FISK
check_url/es/55623?article_type=v

Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage
check_url/es/55623?article_type=v

Göra exakta och exakta enmolekyliga FRET-mätningar med hjälp av SmfBox med öppen källkod

Read Article