Einführung in die Fluoreszenzmikroskopie

Ein Fluoreszenzmikroskop ist ein sehr vielfältiges analytisches Instrument, das die vergrößernden Eigenschaften der Lichtmikroskopie mit der auf Fluoreszenz basierenden Visualisierung kombiniert. Fluoreszenz ist ein Phänomen, das auf der Absorbanz und Emission eines kleinen Wellenlängenbereiches von einem fluoreszierenden Molekül, auch Fluorochrome genannt, beruht. Ein Fluoreszenzmikroskop besteht aus einem einfachen Lichtmikroskop und einer zusätzlichen, starken Lichtquelle mit speziellen Filtern. Außerdem braucht man ein fluoreszierendes Präparat.

Dieses Video beschreibt die einfachen Prinzipien der Fluoreszenzmikrokopie, einschließlich des Mechanismus der Fluoreszenz, Stoke’s Verschiebung, und dem Ausbleichen. Es werden auch zahlreiche Beispiele gezeigt wie Präparate mit fluoreszierenden Farbstoffen gekennzeichnet werden können, beispielsweise mit Antikörpern, die an Fluorochrome gekoppelt sind, mit fluoreszenten Farbstoffen für Nukleinsäuren, und mit autofluoreszenten Proteinen.

Die Hauptbestandteile eines Fluoreszenzmikroskops, also die Xenon oder Quecksilberlampe, der Lichtfilter, der dichroitische Spiegel, und die Benutzung eines Shutters um die Probe zu beleuchten, werden beschrieben. Zum Schluss gehen wir auf einige Beispiele und Anwendungen der Fluoreszenzmikroskopie genauer ein.