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Detecção de palmitoylation proteína em neurônios cultivados por imunoprecipitação e Acil-Biotina Exchange (ABE)
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Capítulos
- 00:05Título
- 02:08Extraction of Target Protein from Cultured Primary Hippocampal Neurons
- 05:54Acyl-Biotin Exchange: Hydroxylamine (HAM) Cleavage
- 09:17Elution of Biotin-conjugated Target Protein and SDS-PAGE
- 10:46Western Blotting and Detection of Palmitoylation of Target Protein
- 12:16Results: Detecting Palmitoylation of a Neuronal Protein
- 16:07Conclusion
A adição de palmitato reversível às proteínas é um importante regulador do tráfico intracelular de proteínas. Isto é de particular interesse, onde os neurónios em muitas proteínas sinápticas são palmitoilada. Nós utilizamos um método simples bioquímica para detectar proteínas palmitoilados em neurónios em cultura, que podem ser adaptadas para vários tipos de células e tecidos.
