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Detektion von Protein Palmitoylierung in kultivierten Hippocampus-Neuronen durch Immunopräzipitation und Acyl-Biotin Exchange (ABE)
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Capítulos
- 00:05Título
- 02:08Extraction of Target Protein from Cultured Primary Hippocampal Neurons
- 05:54Acyl-Biotin Exchange: Hydroxylamine (HAM) Cleavage
- 09:17Elution of Biotin-conjugated Target Protein and SDS-PAGE
- 10:46Western Blotting and Detection of Palmitoylation of Target Protein
- 12:16Results: Detecting Palmitoylation of a Neuronal Protein
- 16:07Conclusion
Die reversible Zugabe von Palmitat an Proteine ist ein wichtiger Regulator des intrazellulären Protein-Trafficking. Dies ist von besonderem Interesse, wo viele Neuronen synaptische Proteine palmitoyliert. Wir nutzen einen einfachen biochemischen Verfahren zur palmitoylierten Proteinen in kultivierten Neuronen, die für mehrere Zelltypen und Gewebe angepasst werden kann zu detektieren.
