Spontan aktivitet for at udvikle neurale netværk kan måles ved hjælp af AM-ester former for calcium-følsomme indikator farvestoffer. Ændringer i intracellulært calcium, hvilket tyder på neuronal aktivering, der detekteres som forbigående ændringer i indikatoren fluorescens med en-eller to-foton billedbehandling. Denne protokol kan tilpasses til en række udviklingshæmmede afhængige neuronale netværk<em> In vitro</em>.