Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 01:21Purification of TcTERT
- 03:18T. castaneum Total RNA Isolation
- 04:53in vitro Reconstitution of T. castaneum Telomerase
- 05:38Telomerase Repeat Amplification Protocol (TRAP) Assay
- 07:57Representative Results for the in vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase
- 08:52Conclusion
Arbetet med att isolera den katalytiska subenheten av telomeras, TERT, i tillräckliga kvantiteter för strukturella studier, har haft en begränsad framgång i mer än ett decennium. Här presenterar vi metoder för isolering av den rekombinanta Tribolium castaneum TERT (<em> TC</em> TERT) och beredning av den aktiva<em> T. castaneum</em> Telomeras ribonucleoprotein (RNP) komplex<em> In vitro</em>.
Tags
TelomeraseT. CastaneumCatalytic SubunitIsolationRecombinantTelomerase RibonucleoproteinIn Vitro ReconstitutionDNA RepeatsTelomeresReverse TranscriptaseLinear ChromosomesEnd-to-end FusionDegradationDNA ReplicationHayflick LimitSomatic CellsCancer CellsCell ImmortalityProtein SubunitIntegral RNA ComponentTemplate SynthesisCrystal Structure
