Modelo de globo de vena cava inferior de roedores
Summary
El protocolo presenta un modelo de supervivencia en roedores para probar intervenciones con balón de venoplastia (VB) en venas profundas no trombóticas, trombóticas y postrombóticas.
Abstract
La venoplastia con balón es una técnica clínica comúnmente utilizada para tratar la estenosis venosa profunda y la oclusión como consecuencia de un traumatismo, anomalías anatómicas congénitas, trombosis venosa profunda aguda (TVP) o colocación de stents. La obstrucción venosa profunda crónica se caracteriza histopatológicamente por trombosis, fibrosis o ambas. En la actualidad, no existe un tratamiento directo que se dirija a estos procesos patológicos. Por lo tanto, es necesario un modelo animal in vivo fiable para probar nuevas intervenciones. El modelo de balón de venoplastia (VBM) de venoplastia de supervivencia en roedores permite el estudio de la venoplastia con balón en condiciones no trombóticas y postrombóticas en múltiples puntos temporales. El efecto local y sistémico de los balones de venoplastia recubiertos y no recubiertos se puede cuantificar mediante ensayos de tejidos, trombos y sangre, como la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR), Western blot, ensayo de inmunoadsorción enzimática (ELISA), zimografía, análisis de la pared de las venas y de las células de los trombos, ensayos de sangre total y plasma, y análisis histológico. El VBM es reproducible, replica las intervenciones quirúrgicas humanas, puede identificar cambios locales en las proteínas de los trombos de la pared venosa y permite múltiples análisis a partir de la misma muestra, disminuyendo el número de animales necesarios por grupo.
Introduction
Las obstrucciones venosas profundas por trombos no resueltos son una consecuencia común de la trombosis venosa profunda (TVP) y son una de las causas del síndrome postrombótico (SPT), que cuesta miles de millones de dólares en atención médica e impacta significativamente en la calidad de vida 1,2,3. El SPT es una patología inflamatoria única con la consiguiente fibrosis de la pared venosa4 que no se capta completamente en modelos de TVP en animales pequeños 5,6,7 y, lo que es más importante, los modelos anteriores no pueden evaluar la respuesta a las intervenciones terapéuticas. Las obstrucciones venosas trombóticas a menudo se tratan con colocación de stents y venoplastia con balón 8,9; Tales intervenciones se ven obstaculizadas por una alta tasa de reintervención debido a la reestenosis y la oclusión 10,11,12.
A pesar de la disponibilidad de balones recubiertos de fármacos para tratar las estenosis/oclusiones arteriales específicas, no existe ninguno para las venas profundas. El mecanismo molecular detrás de la reestenosis es poco conocido en las venas y no tiene terapia directa4. Por lo tanto, nuestro objetivo es presentar un modelo animal que pueda probar terapias administradas localmente a través de balones de venoplastia que simulen obstrucciones postrombóticas venosas profundas. Este modelo reproduce la condición postrombótica y evalúa cómo los diferentes tipos de balones de venoplastia afectan a la pared venosa in vivo.
Protocol
Representative Results
Discussion
El VBM se puede realizar en ratas ≥ 250 g utilizando globos en el rango de 2,5-3,5 mm. Para las ratas que superan los 750 g, la técnica está limitada por una mayor cantidad de tejido adiposo en la cavidad abdominal y el tamaño del órgano, en lugar de cambios en el diámetro de la VCI. A partir de nuestra experiencia, hemos encontrado que se necesitan 10 o más animales por grupo para obtener significación estadística entre los grupos para el análisis de proteínas de la pared venosa o ensayos de actividad e hist…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudio cuenta con el apoyo de la beca de investigación en Ciencias Básicas 2023 del American Venous Forum (AVF) y Surmodics, Inc.
Materials
| 3-0 DemeCRYL | DemeTech | G183019F4P | 12 per box |
| 5-0 DemeCRYL | DemeTech | G285017B0P | 12 per box |
| 7-0 DemeLENE | DemeTech | PM197011F13M | 12 per box |
| 8-0 DemeLON | DemeTech | NL868007C7P | 12 per box |
| Angled Clip Applier | SCANLAN | 3795-01A | 7-1/4″ (18.5 cm) |
| Baxter 0.9% Sodium Chloride Irrigation Bottle | Baxter | SKU: 195-7124 | 1000mL Bottle |
| Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip | Symmetry Surgical Inc | AA00 | 10/bx |
| Buprenorphine | Fidelis Animal Health | SKU- 099114 | 1.3mg/mL, 3mL |
| CD (Sprague Dawley) Rats | Charles River | Strain Code 001 | Male, 400 gm |
| Clip-It Traceable Timer | TRACEABLE PRODUCTS | Cat. No. 5046 | |
| Cotton-Tip Applicator 3" | Dukal Corporation | 922-00037BX100 | 1000/BOX |
| Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak | Medline | MDS88000B9 | 1 Gal |
| Eye Lube | Optixcare | SKU-065441 | 20gm |
| Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System | Stryker | TP700 | |
| Heifetz Microclips 12mmx2.25mm | SCANLAN | 3795-20 | Straight |
| Heifetz Microclips 12mmx2.25mm | SCANLAN | 3795-28 | Curved |
| Heifetz Microclips 8mmx1.75mm | SCANLAN | 3795-14 | Straight |
| Heifetz Microclips 8mmx1.75mm | SCANLAN | 3795-18 | Curved |
| Inflation device | Merit Medical | IN4130 | BasixCOMPAK with Analog Display |
| Isoflurane | MFR VETONE | SKU-501017 | 100mL, Liquid for Inhalation |
| Microsurgery kit containing tweezers and forceps | Customized | ||
| Oxygen, E-tank | Medline | MDM1630 | |
| Sharpened Guidewire | Customized | ||
| Sterile Glad Press-n-Seal | Glad | SKU # PSS-140 | ETO Exposed |
| Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4×4 | Medline | SKU PRM21444H | 100Ct |
| Surgical microscope | Zeiss | S100 / OPMI pico | |
| Surgical Scrub & Handwash | Vetoquinol | NDC: 17030-003-16 | 16 oz |
| Ultrasound Gel | Medline | CTR001305 | 8.5 oz, 12/CS |
| Ultrasound system | Siemens | ACUSON Antares | 3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral |
| Venoplasty Balloon | Customized |
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