新生小鼠骨髓分离和骨髓来源巨噬细胞的制备

骨髓包含造血干细胞群和间充质干细胞群，这些细胞群是自我更新的，可以分化成各种细胞谱系。骨髓中的造血干细胞产生骨髓和淋巴谱系¹。间充质干细胞产生成骨细胞（骨骼）、脂肪细胞（脂肪）或软骨细胞（软骨）²。这些细胞在细胞生物学和组织工程领域有多种应用，包括基因治疗 ^3,4。存在于骨髓中的祖细胞在谱系特异性生长因子存在的情况下分化成特定的细胞类型。促红细胞生成素促进红细胞祖细胞的增殖，粒细胞集落刺激因子 （G-CSF） 刺激中性粒细胞集落的生长，血小板生成素调节血小板的产生，这是谱系特异性生长因子的几个例子⁵。细胞表面抗原标记的 FACS 和磁激活细胞分选 （MACS） 是分离和纯化特定骨髓来源细胞类型的成熟方法⁶。

尽管新生儿研究正在朝着寻找新生儿死亡原因和解决早产并发症的方向发展，但直接治疗开发仍然是一个未得到满足的医疗需求。Smith 和 Davis 表示，“儿科患者仍然是治疗性孤儿”⁷。在新生儿临床研究中，获得同意存在一些挑战，例如样本小、结果的终生影响以及获得同意的伦理问题⁸.因此，对特定于新生儿的 体内 和 体外 研究模型以实现转化相关性的需求很高。由于解剖水平和组织水平之间的相似性、较短的妊娠期和窝产仔数，啮齿动物是研究最多的哺乳动物模型系统。

在这里，我们描述了一种详细的、高度可行的和可重复的程序，用于从 7-9 日龄的小鼠幼崽中分离骨髓及其分化为巨噬细胞的能力。然而，通过使用不同的分化信号，可以实现多种细胞谱系。我们还证明了细胞表面标志物的存在以及骨髓来源的巨噬细胞 （BMDM） 预期的 体外 吞噬活性的存在。