Summary

Un aparato de ejercicio de pez cebra inducido por la natación para enfoques de entrenamiento versátiles

Published: October 18, 2024
doi:

Summary

El aparato de ejercicio diseñado para peces menos afortunados facilita la implementación de diversos protocolos de ejercicio con diferentes intensidades mediante la manipulación de la velocidad del flujo de agua, alcanzable a través de la reotaxis.

Abstract

Para investigar de manera exhaustiva los efectos del ejercicio en la salud y la enfermedad, los modelos animales desempeñan un papel fundamental. El pez cebra, un organismo modelo de vertebrado ampliamente utilizado, ofrece una plataforma única para este tipo de estudios. Este estudio introdujo el desarrollo de un aparato rentable adaptado para los estudios de ejercicio del pez cebra utilizando materiales fácilmente disponibles. El dispositivo se basa en los principios de un túnel de natación y abarca una red de tuberías y válvulas conectadas a una bomba sumergible. El caudal de agua se controla meticulosamente mediante un sensor y se regula mediante válvulas. Para evaluar la efectividad del aparato, se implementaron dos protocolos de entrenamiento: entrenamiento continuo de intensidad moderada (MICT) y entrenamiento interválico de alta intensidad (HIIT). Los peces fueron entrenados colectivamente y su rendimiento en la natación se evaluó a través de una prueba de resistencia. Ambos protocolos de entrenamiento condujeron a mejoras en el rendimiento de la natación después de 30 días de entrenamiento e indujeron alteraciones en la respuesta molecular al ejercicio en comparación con un grupo de control sedentario. En particular, HIIT demostró una eficiencia superior a MICT. El sistema de entrenamiento del pez cebra demostró ser una herramienta valiosa para las investigaciones en fisiología del ejercicio y avanza aún más en la utilidad del modelo de pez cebra en este campo.

Introduction

El ejercicio físico abarca cualquier movimiento corporal realizado por los músculos esqueléticos que resulte en un mayor gasto de energía, siendo el ejercicio un subconjunto estructurado y repetitivo de las actividades físicas1. El ejercicio, una actividad multifactorial y rentable que involucra a todo el cuerpo, produce numerosos beneficios para la salud, como la prevención del síndrome metabólico y la sarcopenia2. En consecuencia, el campo de la fisiología del ejercicio tiene un interés significativo, ya que busca dilucidar cómo el cuerpo se adapta al estrés agudo del ejercicio, el estrés crónico del entrenamiento físico y el impacto general del ejercicio enla salud.

La realización de estudios de fisiología del ejercicio en humanos puede ser costosa y requerir mucho tiempo debido a los desafíos en el diseño experimental y el seguimiento de los participantes3. Por lo tanto, el uso de modelos animales en entornos de laboratorio ha sido muy recomendable debido a su uniformidad genética y fisiológica. Además, en condiciones controladas de laboratorio, los animales suelen tener estilos de vida sedentarios y una ingesta de alimentos regulada4. Entre los modelos animales, los roedores han sido los más utilizados en la investigación relacionada con el ejercicio físico1. Sin embargo, el pez cebra (Danio rerio; Hamilton, 1822) es un modelo complementario a los murinos y a otras especies para los estudios del ejercicio 5,6,7,8.

En la investigación del pez cebra, el ejercicio físico se puede llevar a cabo utilizando túneles de natación disponibles comercialmente o hechos a medida. Entre las opciones disponibles en el mercado, el túnel tipo Blazka, desarrollado por el Sistema Loligo, es el más utilizado 7,9,10. Este sistema induce la natación forzada a través de una hélice acoplada a un motor eléctrico, generando un flujo continuo de agua dentro del túnel. Esta capacidad de natación se basa en el principio de la reotaxis, un comportamiento innato en los peces que los impulsa a nadar contra las corrientes de agua y mantenersu posición. La reotaxis permite la medición de la velocidad crítica de natación (Ucrit), que representa la velocidad máxima que un pez puede mantener durante un período específico. Sin embargo, vale la pena señalar que este equipo, si bien es valioso para evaluar el comportamiento de natación y el consumo de oxígeno, tiene un costo significativo12.

Los investigadores han desarrollado aparatos alternativos para ejercitar al pez cebra, a menudo basados en el mecanismo de tipo Blazka10,13,14 o mecanismos más simples 8,15,16. No obstante, estos métodos pueden estar limitados por las demandas técnicas del protocolo, incluidas las duraciones prolongadas, los gastos sustanciales de equipo y las limitaciones en el rendimiento y la precisión. En consecuencia, el objetivo principal del estudio fue diseñar un sistema de ejercicio de pez cebra asequible y fácil de usar utilizando materiales fácilmente disponibles, proporcionando un nuevo aparato alternativo para el ejercicio físico en peces. Un objetivo secundario fue implementar regímenes de ejercicio aeróbico y anaeróbico en pez cebra, avanzando aún más en la utilización del modelo de pez cebra como estrategia de intervención en la investigación del ejercicio.

Protocol

Los procedimientos recibieron la aprobación previa del Comité de Ética en Uso Animal de la Universidad Federal de São Paulo (CEUA/UNIFESP nº 9206260521). En este estudio solo se emplearon hembras adultas de tipo salvaje Danio rerio, de 6 meses de edad y con un peso de 2,5-3 g. El equipo y los reactivos necesarios para el estudio se enumeran en la Tabla de Materiales. 1. Aparato de ejercicio de pez cebra hecho a medida</stro…

Representative Results

El aparato de ejercicio demostró una notable eficiencia en la regulación de la velocidad del flujo. Para mejorar gradualmente la velocidad de nado, el flujo de agua se incrementó gradualmente semanalmente para todos los grupos, excepto para el grupo SED, que se mantuvo a una velocidad de flujo constante de 0,06 m/s. En particular, el aparato permitía un notable nivel de precisión, logrando ajustes de velocidad de flujo tan finos como 0,001 m/s. Sin embargo, la tasa de error fue del …

Discussion

En este estudio, se desarrolló un sistema de ejercicio innovador y rentable inspirado en el respirómetro de túnel de natación de Loligo Systems21 y el sistema de canal22 para el examen exhaustivo del rendimiento de natación del pez cebra. La Umax se determinó aumentando sistemáticamente el caudal de agua en etapas discretas, con incrementos de velocidad que ocurrieron en intervalos cortos (20-30 min) hasta que el pez alcanzó el agot…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Se extiende su gratitud al Dr. Omar Mertins por proporcionar generosamente acceso al laboratorio para el mantenimiento de los peces y la realización de pruebas. Además, se reconocía a la FAPESP, al CNPq y a la CAPES por la concesión de becas para apoyar esta investigación.

Materials

CPVC Female 90-Degree Elbow for Plumbing Tigre 22150260 3/4-inch 
24AWG Wire Sky Cablo Store Connection between components in the Perforated Circuit Board (1m)
Acrylic pipe The Clear Plastic Shop 41138408 3/4-inch 
Aquarium Submersible Fish Tank Aqua Tank 300w
CPVC Pipe Tigre 10121787 3/4-inch 
Female Threaded Gate Water Valve Tigre 27950310 3/4-inch 
Female Threaded Globe Water Valve Tigre 27940510 3/4-inch 
hrough-hole resistor BXV 10 kΩ, 0.25W t
Lab Support Stand With Clamp with 30 inch rod  Masiye Labs RSC0001 Support the horizontal pipes
LCD screen  Eichip 16 x 2, model JHD162A
Male x Male Dupont Jumpers Chyan Connection between arduino and flow sensor (30 cm)
Perforated Circuit Board single sided KY WIN ROBOT 5 x 10 cm
Potentiometer LUSYA DL-ALPSA01 10kΩ
Roll of Water Blocking Tape One World 5603131000 To avoid leaks
Silicone hose Tigre 14211250 2 cm inner
Solder Station QHTITEC EU/US PLUG Arduine system welding 
Solder Wire Spool BEEYIHF I001-A001-Set Arduine system welding 
Threaded Male Socket and Unthreaded Female Socket CPVC Pipe Fitting TIgre 35447849 3/4-inch 
Tricaine (MS-222) Sigma-Aldrich E10521 Anesthetic
UNO-R3 board UNO R3 CH340G+MEGA328P Chip 16Mhz  FSXSEMI For Arduino UNO R3 Development board
Unthreaded CPVC Tee Pipe Fitting, Female Tigre 22200267 3/4-inch 
Unthreaded Female CPVC Socket Pipe Fitting Tigre 22170260 3/4-inch 
Water Flow Sensor  model YF-B5  Siqma Robotics SQ8659 1-25 L/min
Water Pump  Sunsun Model HJ-2041, 3000L/h, 65W
Water reservoir Custom 30 L

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Medina Nunes, M. E., Silva do Carmo, L. H., Budu, A., Carvalho Araujo, R. A Swimming-Induced Zebrafish Exercise Apparatus for Versatile Training Approaches. J. Vis. Exp. (212), e66382, doi:10.3791/66382 (2024).

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