Summary

Prueba de compresión automatizada de la lente ocular

Published: April 05, 2024
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Summary

Presentamos un método automatizado para caracterizar el módulo elástico efectivo de una lente ocular mediante una prueba de compresión.

Abstract

Las propiedades biomecánicas de la lente ocular son esenciales para su función como elemento óptico de potencia variable. Estas propiedades cambian drásticamente con la edad en el cristalino humano, lo que resulta en una pérdida de la visión de cerca llamada presbicia. Sin embargo, los mecanismos de estos cambios siguen siendo desconocidos. La compresión de la lente ofrece un método relativamente simple para evaluar la rigidez biomecánica de la lente en un sentido cualitativo y, cuando se combina con técnicas analíticas adecuadas, puede ayudar a cuantificar las propiedades biomecánicas. Hasta la fecha, se han realizado una variedad de pruebas de compresión de lentes, incluidas las manuales y automatizadas, pero estos métodos aplican de manera inconsistente aspectos clave de las pruebas biomecánicas, como el preacondicionamiento, las tasas de carga y el tiempo entre mediciones. Este artículo describe una prueba de compresión de lente totalmente automatizada en la que una platina motorizada se sincroniza con una cámara para capturar la fuerza, el desplazamiento y la forma de la lente a través de un protocolo de carga preprogramado. A partir de estos datos se puede calcular un módulo elástico característico. Si bien se demuestra aquí utilizando lentes porcinas, el enfoque es apropiado para la compresión de lentes de cualquier especie.

Introduction

El cristalino es el órgano transparente y flexible que se encuentra en el ojo y que le permite enfocar a diferentes distancias cambiando su poder de refracción. Esta habilidad se conoce como acomodación. El poder refractivo se ve alterado debido a la contracción y relajación del músculo ciliar. Cuando el músculo ciliar se contrae, el cristalino se engrosa y se desplaza hacia adelante, aumentando su poder refractivo 1,2. El aumento de la potencia de refracción permite que la lente enfoque los objetos cercanos. A medida que los humanos envejecen, el cristalino se vuelve más rígido y esta capacidad de acomodación se pierde gradualmente; Esta afección se conoce como presbicia. El mecanismo de endurecimiento sigue siendo desconocido, al menos en parte debido a las dificultades asociadas con la caracterización biomecánica de la lente.

Se han empleado diversos métodos para estimar la rigidez y las propiedades biomecánicas del cristalino. Estos incluyen la rotación de lentes 3,4,5, los métodos acústicos 6,7,8, los métodos ópticos como la microscopía de Brillouin9, la indentación 10,11 y la compresión12,13. La compresión es la técnica experimental más accesible, ya que se puede realizar con instrumentación simple (por ejemplo, cubreobjetosde vidrio 14,15) o con una sola platina motorizada. Anteriormente hemos mostrado cómo las propiedades biomecánicas de la lente pueden estimarse rigurosamente a partir de una prueba de compresión16. Este proceso es técnicamente desafiante y requiere un software especializado al que no pueden acceder fácilmente los investigadores de lentes interesados en las mediciones de rigidez relativa. Por lo tanto, en el presente estudio, nos centramos en métodos accesibles para estimar el módulo elástico de la lente teniendo en cuenta el tamaño de la lente. El módulo elástico es una propiedad intrínseca del material relacionada con su deformabilidad: un módulo elástico alto corresponde a un material más rígido.

La prueba en sí es una prueba de compresión de placas paralelas y, por lo tanto, se puede realizar en sistemas de prueba mecánicos comerciales adecuados. Aquí, se construyó un instrumento personalizado compuesto por un motor, una etapa lineal, un controlador de movimiento, una célula de carga y un amplificador. Estos se controlaban mediante un software personalizado que también registraba el tiempo, la posición y la carga a intervalos regulares. Las lentes de cerdo no se adaptan, pero son de fácil acceso y económicas17. Se desarrolló el siguiente método para comprimir gradualmente el cristalino del ojo y cuantificar su módulo elástico. Este método se puede replicar fácilmente y será útil en el estudio de la rigidez de la lente.

Protocol

Los ojos de cerdo se obtuvieron de un matadero local. No se requirió la aprobación del comité de ética. 1. Disección del cristalino (Figura 1) Retire todo el tejido circundante de los ojos de cerdo y el exceso de carne de la esclerótica, hasta que solo quede el nervio óptico. Usa pinzas curvas y tijeras de disección pequeñas para completar este proceso. Use el nervio como un ancla para sostener el ojo durante la disección. Con un bisturí, haz un corte circunferencial corto en el limbo y luego otro en el ecuador.NOTA: Este paso se realiza en este orden para evitar dañar la lente y la cápsula. Inserte unas microtijeras en el corte en el limbo y retire la córnea levantando la córnea con unas pinzas finas de punta roma mientras corta alrededor de la circunferencia de la córnea. Retire el iris levantándolo con pinzas de punta roma y córtelo con unas microtijeras. Inserte las tijeras de disección en el corte ecuatorial, luego corte circunferencialmente alrededor de todo el ecuador hasta que la esclerótica esté dividida. Una vez completado el corte, retire la parte posterior de la esclerótica. Retire el vítreo suavemente con pinzas, dejando restos mínimos para evitar dañar la lente. Si es necesario, corte el humor vítreo coronalmente para permitir que la parte posterior se separe del cristalino y del segmento anterior. Haz un corte meridional a través de la esclerótica de anterior a posterior con unas tijeras. Comenzando en el nuevo corte meridional a través de la esclerótica, use microtijeras para cortar las zonules lejos de la lente. Usando el peso de la lente o el borde de la placa de disección, estire suavemente las zonulas al separar ligeramente la lente y la esclerótica, permitiendo que las microtijeras corten entre la lente y el cuerpo ciliar, a través de las zonulas y alrededor de la circunferencia de la lente. Esto aislará la lente sin dañar la cápsula de la lente si se hace correctamente. Si lo desea, retire la cápsula con pinzas para perforar la cápsula en su ecuador, luego retire la cápsula con dos pinzas. Coloque la lente en solución salina tamponada con fosfato (PBS). Inspeccione visualmente la lente en busca de daños antes de realizar pruebas mecánicas. 2. Compresión de la lente con/sin cápsula de la lente (Figura 2) NOTA: Todos los pasos aquí, con la excepción de los pasos 2.1 y 2.4, están controlados por computadora. Obtener o construir un aparato de compresión de placas paralelas que tenga una célula de carga con una capacidad de 50 gramos de fuerza con la capacidad de medir el desplazamiento del orden de 1 μm. Programe la etapa motorizada y cargue la celda para realizar el régimen de carga que se describe a continuación (por ejemplo, Archivo Suplementario 1). Casi llene una caja cuadrada de 1 5/8 pulgadas x 1 5/8 pulgadas con PBS y colóquela en la plataforma de compresión. Baje la placa superior en contacto con la placa inferior para determinar el límite inferior de movimiento y la altura absoluta del espacio. Levante la placa superior ~15 mm. Centre la lente en la caja, cuidando que el plano ecuatorial sea horizontal. Baje la placa superior cerca de la superficie superior de la lente, pero no en contacto con ella. Inicie el movimiento para mover la placa superior en contacto con la lente, utilizando la retroalimentación de fuerza con un umbral de contacto de 3 mN. Comience el registro de datos una vez determinado el contacto, el tiempo de registro, la posición de la placa superior en relación con la placa inferior y la fuerza a 500 Hz. Aplique una carga de preacondicionamiento en la que la lente se comprime en un 2,5 % de su altura inicial tres veces, luego en un 5 % tres veces, luego en un 7,5 % tres veces a una velocidad de 1 % / s. Mantenga constante la posición de la placa superior durante 1 minuto después del preacondicionamiento. Aplique una compresión del 15% a una velocidad del 1%/s, seguida de la descarga a la misma velocidad. Continúe el movimiento de descarga hasta que la placa superior haya recorrido un 2% adicional del grosor de la lente descargada lejos de la placa inferior para asegurarse de que la lente se desadhiera de la placa superior. 3. Estimación del módulo de la lente Calcule el grosor de la lente en función del espacio del instrumento en el punto de contacto. Alternativamente, utilice el análisis de imágenes para medir el grosor de una fotografía tomada antes de la prueba. Calcule el módulo elástico E usando el modelo de Hertz para la compresión de una esfera entre placas paralelas (ecuación [1]; Expediente Complementario 2).(1)Donde R es el radio de curvatura en el punto de contacto (se supone que es igual a la mitad del grosor de la lente); F es la fuerza de compresión informada por la célula de carga; es la relación de Poisson (se supone igual a 0,5 correspondiente a un material incompresible); y u es la aproximación descendente de la etapa superior desde el punto de contacto. Tenga en cuenta que el módulo elástico y la relación de Poisson son propiedades del material que indican, respectivamente, la rigidez intrínseca de la lente y la compresibilidad relativa de la lente.NOTA: Este método descuida cualquier función de la cápsula de la lente, pero tiene en cuenta aproximadamente el tamaño de la lente, lo que permite la comparación entre especies.

Representative Results

Se comprimieron seis lentes porcinas, primero con la cápsula intacta y luego después de una cuidadosa extracción de la cápsula. Los valores de espesor fueron de 7,65 ± 0,43 mm para las lentes encapsuladas y de 6,69 ± 0,29 mm para las lentes desencapsuladas (media ± desviación estándar). En la Figura 3 se muestra un historial de carga típico. Las curvas de fuerza-desplazamiento resultantes estaban bien ajustadas por el modelo de Hertz (es decir, tenían una fuerza proporcional al de…

Discussion

La compresión de la lente es un método versátil para estimar la rigidez de la lente. Los procedimientos descritos anteriormente permiten la comparación entre lentes de diferentes especies y diferentes tamaños. Todas las deformaciones se normalizan en función del tamaño de la lente, y el cálculo del módulo elástico tiene en cuenta aproximadamente el tamaño de la lente. El módulo efectivo es considerablemente más alto que el módulo reportado previamente para la lente porcina

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Con el apoyo de la subvención R01 de los Institutos Nacionales de Salud EY035278(MR, por sus siglas en inglés).

Materials

Curved Medium Point General Purpose Forceps Fisherbrand 16-100-110
Galil COM Libraries Galil Motion Control
High Precision Scalpel Handle  Fisherbrand 12-000-164
Linear Stage McMaster-Carr 6734K4 0.125"
Load Cell FUTEK LSB200-FSH03869
Load Cell Amplifier FUTEK IAA300-FSH03931
MATLAB The Mathworks, Inc.
Microprobe Surgical Design  22-079-740
Miniature Self Opening Precision Scissors  Excelta  63042-004
Motion Controller Galil Motion Control DMC-31012
Motor Galil Motion Control BLM-N23-50-1000-B
Straight Hemastats  Fine Science  NC9247203 stainless steel, 14cm 

Referencias

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Citar este artículo
Alzoubi, D., Rich, W., Reilly, M. A. Automated Compression Testing of the Ocular Lens. J. Vis. Exp. (206), e66040, doi:10.3791/66040 (2024).

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