Здесь представлено новое автоматизированное устройство для ушиба спинного мозга для мышей, которое может точно воспроизводить модели ушиба спинного мозга различной степени.
Повреждение спинного мозга (ТСМ) из-за травматических повреждений, таких как автомобильные аварии и падения, связано с постоянной дисфункцией спинного мозга. Создание контузионных моделей травмы спинного мозга путем воздействия на спинной мозг приводит к патологиям, сходным с большинством травм спинного мозга в клинической практике. Точные, воспроизводимые и удобные животные модели травмы спинного мозга имеют важное значение для изучения травмы спинного мозга. Мы представляем новое автоматизированное устройство для ушиба спинного мозга для мышей, интеллектуальную систему травм спинного мозга Университета Гуанчжоу Цзинань, которая может создавать модели ушибов спинного мозга с точностью, воспроизводимостью и удобством. Система точно создает модели различной степени повреждения спинного мозга с помощью лазерных датчиков расстояния в сочетании с автоматизированной мобильной платформой и передовым программным обеспечением. Мы использовали эту систему для создания трехуровневых моделей мышей с травмами спинного мозга, определили их баллы по шкале Бассо (BMS) и провели поведенческие анализы, а также тесты на окрашивание, чтобы продемонстрировать их точность и воспроизводимость. Показан каждый шаг разработки моделей травм с использованием этого устройства, формируя стандартизированную процедуру. Этот метод позволяет создавать воспроизводимые модели мышей с ушибом спинного мозга и снижает факторы манипулирования человеком за счет удобных процедур обращения. Разработанная животная модель является достоверной для изучения механизмов повреждения спинного мозга и связанных с ними подходов к лечению.
Травма спинного мозга обычно приводит к постоянной дисфункции спинного мозга ниже поврежденного сегмента. В основном это вызвано предметами, ударяющимися о позвоночник, и гиперэкстензией позвоночника, такими как дорожно-транспортные происшествияи падения1. В связи с ограниченной доступностью эффективных вариантов лечения травмы спинного мозга, выяснение патогенеза повреждений спинного мозга на животных моделях будет информативным для разработки соответствующих подходов к лечению. Модель ушиба спинного мозга, вызванной воздействием на спинной мозг, приводит к разработке животных моделей с аналогичной патологией к большинству клинических случаев повреждения спинного мозга 2,3. Поэтому важно создавать точные, воспроизводимые и удобные модели животных для ушиба спинного мозга.
С тех пор, как в 1911 году Аллен изобрел первую животную модель травмы спинного мозга, были достигнуты значительные успехи в разработке инструментов длясоздания моделей повреждений спинного мозга у животных. В зависимости от механизмов травмы модели повреждения спинного мозга классифицируются как ушиб, компрессия, дистракционная деформация, вывих, транссекция или химическая6. Среди них модели контузии, которые используют внешние силы для смещения и травмирования спинного мозга, наиболее близки к клинической этиологии большинства пациентов с травмой спинного мозга. Поэтому модель контузии использовалась многими исследователями при изучении травм спинного мозга 3,7. Для разработки моделей ушибов спинного мозга используются различные инструменты. Многоцентровые исследования травм спинного мозга животных (MASCIS) Нью-Йоркского университета (NYU) производят ушибы спинного мозга с помощью устройства для сброса веса8. После нескольких обновленных версий импактор MASCIS широко используется для разработки моделей животных при ушибе спинного мозга9. Однако, когда ударный стержень MASCIS падает и ударяется о спинной мозг, могут произойти множественные травмы, что влияет на степень повреждения в моделях травм спинного мозга. Кроме того, достижение механической точности для обеспечения точности прибора и повторяемости производственной модели также является сложной задачей. Импакторы с бесконечным горизонтом вызывают ушибы, контролируя силу, приложенную к спинному мозгу, а не тяжелые капли10. Он использует компьютер, подключенный к датчику, для непосредственного измерения силы удара между ударным механизмом и спинным мозгом. При достижении порога ударник немедленно втягивается, тем самым избегая отскока груза и повышая точность10,11. Тем не менее, использование этой мелкой моторики для нанесения повреждений может привести к непоследовательнымповреждениям и функциональным дефицитам6. Устройство Университета штата Огайо (OSU) сжимает дорсальную поверхность спинного мозга с переходной скоростью с помощью электромагнитного драйвера12,13. Это устройство похоже на импакторы с бесконечным горизонтом, так как оно использует компрессии на короткие расстояния для нанесения травм спинного мозга. Однако он имеет различные ограничения в том, что первоначальное определение нулевой точки вызовет ошибки из-за присутствия спинномозговой жидкости 6,14. Таким образом, существует множество инструментов, которые могут быть использованы для разработки моделей контузии спинного мозга на животных, но все они имеют некоторые ограничения, которые приводят к недостаточной точности и воспроизводимости моделей животных. Поэтому для более точного, удобного и воспроизводимого создания моделей ушиба спинного мозга мышью необходим автоматизированный и интеллектуальный импактор травмы спинного мозга.
Мы представляем новый импактор для травм спинного мозга, интеллектуальную систему травм спинного мозга Университета Гуанчжоу Цзинань (G smart SCI system; Рис. 1) для создания моделей ушибов спинного мозга. В качестве позиционирующего устройства устройство использует лазерный дальномер в сочетании с автоматизированной мобильной платформой для автоматизации ударов по заданным параметрам удара, включая скорость удара, глубину поражения и время пребывания. Автоматизированная работа снижает человеческий фактор и повышает точность, а также воспроизводимость моделей животных.
Травма спинного мозга может привести к сенсорному и двигательному дефициту, что может привести к серьезным физическим и умственным нарушениям. В Китае частота травм спинного мозга в разных провинциях колеблется от 14,6 до 60,6 на миллион18. Рост распространенности ТСМ окажет б…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая, No 82102314 (для ZSJ) и 32170977 (для HSL) и Фондом естественных наук провинции Гуандун, No 2022A1515010438 (для ZSJ) и 2022A1515012306 (для HSL). Это исследование было поддержано Программой клинических передовых технологий Первой аффилированной больницы Цзинаньского университета, Китай, No JNU1AF- CFTP- 2022- a01206 (HSL). Это исследование было поддержано Проектом научно-технического плана Гуанчжоу, No 202201020018 (для HSL), 2023A04J1284 (для ZSJ) и 2023A03J1024 (для HSL).
0.01M PBS (powder, pH7.2-7.4) | Solarbio Life Sciences | P1010 | |
2,2,2-Tribromoethanol | Macklin | 75-80-9 | |
4% paraformaldehyde tissue fixative | Biosharp life science | BL539A | |
Biomicroscope | Leica | LCC50 HD | |
CatWalk | Noldus Information Technology | CatWalk XT 9.1 | |
Cover glass | CITOTEST Scientific | 10212432C | |
Embedding machine | Changzhou Zhongwei Electronic Instrument | BMJ-A | |
Ethanol absolute | DAMAO | 64-17-5 | |
FootFaultScan | Clever Sys Inc. | – | |
Glass slide | CITOTEST Scientific | 80302-2104 | |
Hematoxylin and Eosin Staining Kit | Beyotime Biotechnology | C0105S | |
micro-grinding drill | FEIYUBIO | 19-7010 | |
Mouse spinal fixator | RWD Life Science | 68094 | |
Paraffin microtome | Thermo | shandon finesse 325 | |
RotaRod for Mice | Ugo Basile | 47600 | |
Stereomicroscope | KUY NICE | SZM-7045 | |
Tert-Amyl alcohol | Macklin | 75-85-4 | |
Xylene | China National Pharmaceutical | #10023418 |