Применение кардиоактивных препаратов на модели инфаркта миокарда свиньи

Все эксперименты проводились в соответствии с «Австралийским кодексом по уходу за животными и их использованию в научных целях» и были одобрены Комитетом по этике животных местного медицинского округа Западного Сиднея. Для настоящего исследования использовали допубертатных свинок крупной белой породы ландрас массой 18-20 кг. 1. Животноводство Размещайте животных в соответствии с правилами местного комитета по этике животных.ПРИМЕЧАНИЕ: Животные, включенные в этот протокол, содержатся индивидуально, чтобы избежать драк и травм и гарантировать, что не будет конкуренции за еду. Тем не менее, все животные могли видеть, слышать и чувствовать запах сородичей. Их загоны имеют бетонный пол для удобства уборки и имеют как крытую, так и внешнюю защищенную часть. Свиньи обеспечиваются соломенной подстилкой в закрытой части и «игрушками» для обогащения в открытой части. 2. Седация и общий наркоз УспокоениеУбедитесь, что животное голодало не менее 12 часов перед началом тяжелой седации или общей анестезии. Если у животного еще нет сосудистого доступа в виде центрального катетера, используйте внутримышечный седативный протокол. Внутримышечная седация состоит из 8 мг/кг кетамина, 0,3 мг/кг мидазолама, 0,2 мг/кг метадона и 10 мкг/кг медетомидина (см. таблицу материалов). Вводят эту смесь в эпитаксиальную мускулатуру животного с помощью иглы 21 G. В среднем, животным требуется 5-10 минут, чтобы получить сильный седативный препарат.ПРИМЕЧАНИЕ: Свинья, находящаяся в состоянии стресса, более устойчива к седативным препаратам; Убедитесь, что спокойный и уверенный дрессировщик дает животному седативные препараты и не подвергает животное чрезмерному стрессу. Если животное испытывает стресс, лучше всего оставить его в покое на 5-10 минут и повторить попытку. Выполните внутривенную седацию, если установлен центральный катетер и открыт. Внутривенная седация состоит из 2 мг/кг кетамина, 0,2 мг/кг мидазолама, 0,2 мг/кг метадона и 2 мкг/кг медетомидина. Сначала промойте внутривенную капельницу 0,9% хлоридом натрия, чтобы обеспечить проходимость. Затем медленно протолкните половину смешанного шприца через линию и промойте 0,9% хлоридом натрия. Понаблюдайте за животным, которое должно быть сильно усыплено в течение 20-30 секунд. Если животное еще не находится под действием седативных препаратов, промойте оставшуюся половину шприца, как описано в шаге 2.1.5. Сосудистый доступПосле введения седативных препаратов транспортируйте свинью в операционную. Предварительно насыщайте свинью кислородом с помощью лицевой маски и расхода кислорода 5 л/мин. Подключите пульсоксиметр к хвосту, ушам или языку свиньи, чтобы контролировать животное на протяжении всего времени. С помощью канюли 22 или 24 G получите доступ к левой и правой краевым венам уха и закрепите их скотчем. Общий наркозРасположите свинью в положении лежа на грудине. Вводят 1-3 мг/кг пропофола (см. таблицу материалов) внутривенно в виде медленного толчка, титруемого для достижения эффекта. Попросите помощника держать рот животного открытым (челюсть на этом этапе должна быть расслабленной) и вытянуть шею. С помощью ларингоскопа (см. Таблицу материалов) надавите на основание языка и надгортанник, чтобы обнажить черпаловидные хрящи гортани. Пропустите смазанную эндотрахеальную трубку (размер 5,5 или 6,0; см. таблицу материалов) стилетом через черпаловидные хрящи в трахею. Иногда сопротивление может ощущаться при прохождении через гортань; Этому можно противодействовать с помощью мягкого вращения эндотрахеальной трубки. Если животное сопротивляется интубации, введите больше пропофола внутривенно. Извлеките стилет из эндотрахеальной трубки. Надувайте манжету эндотрахеальной трубки до тех пор, пока не убедитесь, что вокруг трубки нет утечек воздуха. Как правило, требуется 4-6 мл воздуха, хотя объем может варьироваться в зависимости от размера пробирки и животного. Закрепите эндотрахеальную трубку за ушами животного. Подключите животное к контуру редыхательной анестезии с функцией ИВЛ с регулировкой громкости. Когда животное подключено к сети, выключите аппарат искусственной вентиляции легких.ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что регулируемый клапан ограничения давления (APL) или «выдвижной клапан» всегда открыт. Если не оставить клапан открытым, это может привести к смертельной баротравме животного. Уменьшите расход кислорода в анестезиологическом контуре до 2 л/мин. Установите аппарат ИВЛ с положительным давлением в режим регулировки громкости. Установите дыхательный объем 10 мл/кг и частоту дыхания 20 вдохов/мин. Убедитесь, что соотношение вдоха и выдоха установлено на уровне 1:2. На протяжении всей процедуры регулируйте частоту дыхания, чтобы убедиться, что углекислый газ в конце выдоха находится в пределах 35-50 мм рт.ПРИМЕЧАНИЕ: Давление на вдохе не должно превышать 20 см H2O. Повышение давления на вдохе требует тщательного обследования на предмет перегибов или закупорок трубок. Чтобы смягчить повышенное давление, не связанное с трубками, соотношение вдоха/выдоха может быть уменьшено до 1:1,5, а дыхательный объем уменьшен. Если животное гемодинамически стабильно, поддерживайте его ингаляционной анестезией. Если животное не является гемодинамически стабильным, поддерживайте его с помощью тотального внутривенного наркоза, как описано в шаге 2.3.14.Если животному будет введена ингаляционная анестезия, начните с 2,5% изофлурана с момента первого подключения анестезиологического контура. В течение следующих 30 мин постепенно отучайте животное от груди до 1,5% ингаляционного изофлурана. Поддерживайте животное на 1,5% изофлуране до конца процедуры. Каждые 10 минут оценивайте глубину анестезии, проверяя пальпебральные рефлексы и тонус челюсти. При необходимости отрегулируйте дозу изофлурана для поддержания глубины анестезии. Если животное гемодинамически нестабильно, поддерживайте его с помощью полной внутривенной анестезии, позволяющей лучше контролировать глубину анестезии без сердечно-сосудистых осложнений, связанных с ингаляционными анестетиками.Подготовьте либо шприцевые насосы, либо стандартные насосы для жидкости с пропофолом, фентанилом и мидазоламом. Соедините их с животным общей линией.ПРИМЕЧАНИЕ: Пропофол можно вводить в дозе 0,1-0,6 мг/кг/мин, фентанил – 1-5 мкг/кг/ч, а мидазолам – 0,05-0,2 мг/кг/ч. Как и в случае с ингаляционной анестезией, титруйте эти препараты для воздействия на протяжении всей анестезии, чтобы поддерживать соответствующую глубину анестезии. Обеспечьте внутривенную инфузионную поддержку 0,9% раствором натрия хлорида или раствором Хартмана (см. таблицу материалов) со скоростью 5 мл/кг/ч. Наблюдайте за животным с помощью измерений артериального давления, капнографии, мониторинга анестезиологических газов, температуры, пульсоксиметрии и электрокардиографии. Во время любой процедуры обеспечьте дополнительную анальгезию в виде 0,2 мг/кг метадона внутривенно каждые 4 ч после премедикации.ПРИМЕЧАНИЕ: Анальгезию можно проводить через более короткие промежутки времени, если животное демонстрирует признаки боли во время анестезии (тахикардия, облегчение глубины анестезии без изменения поддерживающих препаратов). 3. Размещение центральной линии Расположите свинью в спинном положении лежа так, чтобы задние конечности были вытянуты, левая передняя конечность вытянута, а правая передняя конечность согнута и закреплена галстуком. Асептически подготовьте шею свиньи, и накройте драпировкой. Используйте линейный ультразвуковой датчик (см. Таблицу материалов) со стерильным покрытием для определения местоположения правой яремной вены. Лучше всего это достигается с помощью зонда, ориентированного перпендикулярно трахее и медленно перемещающего его латерально от гортани. Включите режим цветного допплера, чтобы определить яремную вену. Яремную вену можно отличить от сонной артерии по схлопываемости и непрерывному непульсирующему потоку. Используйте иглу Кука 18 G (см. Таблицу материалов) для доступа к вене под контролем УЗИ. Как только доступ будет получен, пропустите проволоку J-образной кончики диаметром 0,035 дюйма (см. Таблицу материалов) через иглу и проденьте ее в сосуд. Выньте иглу через проволоку. Проденьте предварительно промытую центральную линию через проволоку и протолкните ее в вену. Следите за тем, чтобы провод всегда был виден на дистальном конце линии.ПРИМЕЧАНИЕ: Двухпросветный центральный венозный катетер 5 Fr (см. Таблицу материалов) использовался для пациентов, нуждающихся во внутривенном доступе в течение 1-4 недель. Если есть трудности с продвижением лески через кожу, используйте скальпель No 11, чтобы сделать небольшой разрез 2-4 мм, чтобы облегчить прохождение линии по проволоке. Приложите отрицательное давление с последующей промывкой к каждой внешней магистрали, чтобы обеспечить проходимость. Зажмите каждую линию. Прикрепите прилагаемые анкеры к внешним линиям и закрепите их на месте нерассасывающимися нитями 2-0 или 3-0 (см. Таблицу материалов). Наложите дополнительные швы, чтобы закрепить внешние линии дорсально, чтобы животное не грызло их. Прикрепите промытые удлинители к наружным катетерным катетерам и зажмите. Наденьте на животное куртку для свиньи (см. Таблицу материалов) и закрепите линии внутри. Если во время той же анестезии еще предстоит выполнить другие процедуры, наденьте куртку непосредственно перед восстановлением животного. 4. Инфаркт миокарда ПРИМЕЧАНИЕ: Животные, использованные в этой модели, получили инфаркт миокарда после ранее опубликованного метода7. Проводят инфаркт миокарда за 2 недели до трансэпикардиальных и трансэндокардиальных инъекционных процедур 8,9,10. Имплантация осмотической минипомпы проводилась сразу после коронарной реперфузии в рамках той же процедуры. 5. Введение лекарства или клеток Торакотомия и инъекция клеток эпикардаВнутривенно вводят профилактические антибиотики в виде 22 мг/кг цефазолина (см. таблицу материалов). Продолжайте каждые 90 минут на протяжении всей процедуры. Расположите животное в правом боковом положении лежа. Нанесите фентаниловый пластырь со дозировкой 100 мкг/ч (см. Таблицу материалов) на плоскую плоскость позади ушей свиньи. Наложить лейкопластырную повязку или шов 2-0.ПРИМЕЧАНИЕ: Этот пластырь считается «активным» через 12 часов после установки и обеспечивает обезболивание в течение 72 часов. Настройте кабели и патчи системы электроанатомического картирования в соответствии со спецификациями продукта (см. Таблицу материалов). Отметьте на животном 10-сантиметровую горизонтальную линию между ребрами 4 и 5 карандашом или хирургическим маркером. Приготовьте смесь лидокаина (2 мг/кг) и бупивакаина (1 мг/кг) в одном шприце с иглой 25 г. Асептически подготовьте место операции и накиньте животное. Выполните блокаду кожной линии в отмеченном месте разреза, введя иглу в кожу под небольшим углом, слегка отведя поршень, чтобы предотвратить обратный поток крови в шприц, и медленно вводя раствор по мере извлечения иглы из кожи. Повторите этот процесс, двигаясь вниз по линии.ПРИМЕЧАНИЕ: Необходимо прикладывать отрицательное давление к шприцу в каждом новом месте инъекции, чтобы гарантировать, что бупивакаин не вводится внутрисосудисто. Внутрисосудистое введение бупивакаина может привести к быстрому летальному исходу. Скальпелем No 22 сделайте разрез кожи диаметром 10 см по отмеченной линии. Используя монополярное прижигание (см. Таблицу материалов), углубляйте разрез через нижележащие мышечные слои до тех пор, пока не будут достигнуты межреберные мышцы. Подготовьте стерильный шприц с 0,5 мг/кг бупивакаина и 1 мг/кг лигнокаина и приложите иглу 25 г. Введите иглу под небольшим углом на каудальный край четвертого ребра. Приложите отрицательное давление к поршню, чтобы убедиться, что игла не прошла через межреберную вену или артерию. Медленно вводите четверть объема шприца, удерживая иглу неподвижной. Повторите шаг 5.1.12 еще в трех местах, на расстоянии 3-5 см друг от друга по каудальному краю четвертого ребра. Ножницами Метценбаума (см. Таблицу материалов) осторожно разрежьте межреберные мышцы, затем разрежьте плевру после подтверждения анестезиологом. Когда плевра будет разрезана, выключите аппарат искусственной вентиляции легких, чтобы позволить легким отпасть от плевры. После того, как разрез будет сделан, снова включите аппарат искусственной вентиляции легких и отрегулируйте положительное давление в конце выдоха до 4 смH2O. Поместите самоудерживающиеся ребра между ребрами и медленно открывайте, чтобы обнажить сердце. С помощью тканевых щипцов осторожно захватите перикард и сделайте надрез ножницами Метценбаума, чтобы сердце можно было экстериоризировать.ПРИМЕЧАНИЕ: Во время этого и нескольких последующих этапов часто возникают аритмии. ЭКГ необходимо тщательно контролировать, и любые сердечные манипуляции должны быть временно прекращены, если животное становится гемодинамически нестабильным (среднее артериальное давление ниже 55 мм рт. ст.). Внутривенные болюсы метараминола (0,25 мг) вводятся по мере необходимости для улучшения артериального давления. Наложите временные швы 2-0 на оба конца и по бокам разреза перикарда, чтобы зафиксировать его к грудной стенке и создать перикардиальный колодец. Убедитесь, что боковые стороны перикарда поддерживаются, чтобы сделать перикард как можно более мелким. Используйте смоченные тампоны или лапаротомические губки, чтобы уложить область, окружающую сердце. Это поможет сохранить стабильность сердца и предотвратить высыхание открытых тканей. Выведите верхушку сердца из полости перикарда указательным пальцем за левый желудочек. Позаботьтесь о том, чтобы свести к минимуму компрессию левого желудочка.ПРИМЕЧАНИЕ: Здоровое сердце может биться комфортно, когда верхушка направлена вертикально, сидя на его основании с мягкой поддержкой, но без сжатия. Существует начальное снижение артериального давления, связанное с манипуляцией, но оно должно восстановиться до приемлемого уровня при отсутствии внешней компрессии желудочков.Если через 15 с восстановление отсутствует или наступает очень медленно, немедленно возвращают сердце в полость перикарда и принимают необходимые меры для улучшения гемодинамических показателей перед дальнейшим вывихом.ПРИМЕЧАНИЕ: Если желудочек может быть вывихнут, положение верхушки вне перикарда можно сохранить, поместив марлевые пакеты соответствующего размера внутрь перикарда для поддержки желудочка. Кроме того, удлиненный, увлажненный тампон может быть помещен под основание сердца, где он действует как «перевязь», которая направляет верхушку сердца вверх к разрезу (рис. 1A). Создайте электроанатомическую карту напряжения эпикардиальной поверхности левого желудочка с помощью электрофизиологического картирующего катетера (рис. 1B). Идентификация шрамов, границ и удаленных зон с помощью стандартных отключений напряжения.ПРИМЕЧАНИЕ: Рубец и удаленная зона определялись биполярными отсечками 1,5 мВ, а униполярными отсечками 8,3 мВ, соответственно11,12. Согните иглу терапевтического шприца 27 G примерно под углом 80-90°. Введите иглу в целевую ткань под небольшим углом и надавите на поршень шприца, чтобы выпустить от 1/4 до 1/3 от общего объема. Необходимо наблюдать побледнение ткани (рис. 1С). Используйте электрофизиологический картирующий катетер для аннотирования местоположения места инъекции на сгенерированной карте эпикардиального напряжения (рис. 1D).ПРИМЕЧАНИЕ: В видеопротоколе в демонстрационных целях использовались инъекции транспортных средств, состоящих из среды для культивирования клеток (RPMI 1640). Частично извлеките иглу и перенаправьте ее в пределах миокарда. Выделите еще от 1/4 до 1/3 объема шприца. Продолжайте до тех пор, пока шприц не опустеет. Повторяйте шаги 5.1.20-5.1.24 до тех пор, пока не будет введена желаемая доза. Снимите тампоны с сердца и осторожно снимите «стропу» под сердцем, чтобы оно вернулось в нейтральное положение. На этом этапе часто возникают аритмии, и необходимо соблюдать осторожность, как описано в шаге 5.1.17. Снимите швы 2-0 с перикарда. Ослабьте втягивающее устройство и снимите его с грудной клетки. Используйте полидиоксаноновые шовные нити (PDS) размера 1 с круглой иглой с тупым концом, чтобы закрыть грудную клетку, пропустив ее через промежутки между ребрами 3 и 4 и ребрами 5 и 6.ПРИМЕЧАНИЕ: Узкие швы в форме восьмерки обеспечивают эффект шкива для приближения ребер. Необходимо наложить два или три таких шва, в зависимости от размера животного. Перед затягиванием и завязыванием швов, сближающих ребра, вставьте короткий отрезок силиконовой трубки в вентральный край разреза. Поместите свободный конец трубки в миску со стерильным физиологическим раствором для подводного герметичного дренажа плевральной полости. Закройте вышележащие мышечные слои простым непрерывным узором с помощью рассасывающихся швов 2-0. Закройте кожу простым непрерывным или сцепленным узором13 с помощью нерассасывающегося шва 2-0 или 3-0. Когда закрытие раны будет завершено, вытесните свободный воздух из грудной клетки с помощью вентиляции с положительным давлением.Включите аппарат искусственной вентиляции легких в режим «свободное дыхание». Используйте резервуарный мешок в контуре повторного дыхания, чтобы обеспечить постоянное положительное давление в дыхательных путях (поддерживайте на уровне 20-30 см/ч2O). Продолжайте это давление до тех пор, пока в солевой чаше не перестанет наблюдаться бурление, указывающее на отсутствие свободного воздуха в грудной клетке. Снимите силиконовую трубку. Наложите лейкопластырную повязку на место операции и наложите разбросанные простые прерывистые швы, чтобы помочь удерживать повязку на месте. При выздоровлении вводят 0,3 мг/кг метадона подкожно и 0,2-0,5 мг/кг ондансетрона (см. таблицу материалов) внутривенно. Имплантация осмотического мини-насоса яремной веныРасположите животное, как описано в шаге 3.1. Асептически подготовьте и задрапируйте правую сторону шеи животного. Лезвием скальпеля No 22 сделайте надрез длиной 8-10 см, проходящий краниально от точки, расположенной на 2-3 см латеральнее manubrium sterni. Этот разрез должен стать немного более боковым по мере того, как он будет перемещаться краниально. Используйте ножницы Метценбаума для рассечения кожных мышц колли, грудино-идоидной и грудиноцефалической мышц. Используйте технику тупого рассечения, чтобы углубить разрез до тех пор, пока не станет видна наружная яремная вена. Поместите самоудерживающиеся втягивающие устройства в разрез и откройте их для улучшения видимости. С помощью коричневых тканевых щипцов Адсона (см. таблицу материалов) и ножниц Метценбаума удалите мягкие ткани, окружающие яремную вену, как сверху, так и снизу (рис. 2А). Это очень важный шаг, так как на более поздних стадиях мягкие ткани, лежащие над сосудом, могут препятствовать прохождению трубки мининасоса. Используйте рассасывающийся шов 5-0 через каудальный открытый конец вены, примерно в 1 см черепа от самого каудального видимого края сосуда. Шов накладывают на 5-миллиметровые «укусы» следующим образом: краниально-каудальный с правой стороны, справа налево и каудально-краниальный с левой стороны. Получившийся узор должен выглядеть как «три стороны квадрата». Убедитесь, что хвосты швов с обоих концов равны по длине. Соберите мини-насос, как описано в руководстве по эксплуатации продукта (см. Таблицу материалов). Завяжите петли эластичными сосудистыми завязками вокруг сосуда как на краниальном, так и на каудальном концах. Изначально держите их свободными. Попросите помощника натянуть сосудистые узлы, чтобы закупорить сосуд. С помощью иглы 14 G сделайте прокол в вене в центре «трехстороннего квадрата», созданного шовным материалом (шаг 5.2.7; Рисунок 2Б). Проденьте трубку мини-насоса в прокол. Она должна легко проходить в сосуд. Если вы встретите сопротивление, не продолжайте давить; Вместо этого вытащите трубку и повторите попытку. Продвигайте трубку до тех пор, пока не останется 1-2 см снаружи сосуда. Затяните шовный материал вокруг трубки катетера и завяжите его простым прерывистым узлом. Попросите помощника освободить и удалить сосудистые узлы. Несколько раз оберните корпус мини-помпы нерассасывающимся шовным материалом 2-0 и завяжите так, чтобы шовная нить надежно закрепилась на помпе. Затем закрепите насос на близлежащих мягких тканях простым прерывистым узлом (рис. 2C, D). Извлеките втягивающие устройства из разреза. Закройте разрез стандартным трехслойным простым непрерывным закрытием. Во время выздоровления вводят 0,2 мг/кг мелоксикама подкожно. Чрескожная трансэндокардиальная инъекцияРасположите животное в спинном положении лежа с вытянутыми передними и задними конечностями и закрепите галстуками. Асептически подготавливают хвостовую часть живота и медиальную часть бедер животного. Накройте животное фенестрированной прокладкой для ангиографии бедренной кости (см. таблицу материалов). Настройте кабели и патчи системы электроанатомического картирования в соответствии со спецификациями продукта (см. Таблицу материалов). Используйте линейный ультразвуковой датчик для определения бедренной артерии. Под контролем УЗИ проколите бедренную артерию иглой Кука и проденьте в сосуд через иглу проводник длиной 0,035 дюйма. Выньте иглу через проволоку. Проденьте артериальную оболочку и проводник 8 Fr на артериальный провод и продавите его, пока только ступица не будет открыта для кожи. Следите за тем, чтобы провод всегда был виден, выходя из ступицы оболочки.ПРИМЕЧАНИЕ: Поскольку это большие ножны, иногда может потребоваться скальпель No 11 для создания небольшого разреза кожи для облегчения прохода. Снимите оболочку интродьюсера и провода. Вводят внутривенно гепарин (100-200 ЕД/кг). Введите трансэндокардиальный инъекционный катетер через оболочку и продвигайтесь к левому желудочку ретроградным аортальным доступом. Создайте электроанатомическую карту левого желудочка, осторожно проведя катетером по поверхности эндокарда. Выполняйте осевое вращение и плавные изменения сгибания кончика для достижения хорошего эндокардиального контакта. Идентификация рубцовых, пограничных и удаленных зон с помощью стандартных отключений напряжения. Направьте катетер с флюороскопическим и электроанатомическим контролем к предпочтительному месту инъекции. Выполните мягкое осевое вращение с отклонением дистального кончика, чтобы зафиксировать и поддерживать стабильный эндокардиальный контакт. Подтвердите положение наконечника катетера с помощью не менее двух рентгеноскопических проекций. Осторожно продвигайте стержневой катетер, затем продлите иглу на контролируемую глубину интрамиокарда (3,5 мм для апикальной инъекции, 5 мм для септальной инъекции). Промойте 4-6 мл йодсодержащего контрастного вещества (см. Таблицу материалов) через инъекционный катетер до тех пор, пока они не станут заметны при рентгеноскопии. Наблюдайте за контрастом в течение следующих 10-30 с, чтобы убедиться, что он остается в тканях (рис. 3А). Внимательно наблюдайте за ЭКГ во время выдвижения иглы и инъекции, так как приступы желудочковой эктопии являются распространенным явлением.ПРИМЕЧАНИЕ: Желудочковая эктопия возникает, когда кончик иглы входит в контакт с миокардом. Если инъекция контрастного вещества прошла успешно, следует ввести интересующее ее вещество. Промойте его контрастным веществом до тех пор, пока не увидите его рентгеноскопически.ПРИМЕЧАНИЕ: Интересующий агент индивидуален для пользователя, в зависимости от того, какую терапию он тестирует. Втяните иглу. Извлеките инъекционный катетер из артериальной оболочки. Снимите артериальную оболочку и надавливайте на участки до 20 мин до достижения гемостаза. 6. Восстановление под общим наркозом Выключите используемые ингаляционные анестетики или внутривенные анестезиологические помпы. Уменьшите частоту дыхания на аппарате искусственной вентиляции легких до 8-10 вдохов/мин. Через 2-5 мин перевести аппарат ИВЛ в режим «свободного дыхания» не более чем на 30 с за один раз. Понаблюдайте за животным и капнографом на предмет спонтанного дыхания. Если произошло спонтанное дыхание, оставьте аппарат искусственной вентиляции легких выключенным. Если у животного апноэ, снова включите аппарат искусственной вентиляции легких еще на 1-2 минуты и повторите попытку, пока не будет достигнуто спонтанное дыхание.ПРИМЕЧАНИЕ: Время восстановления варьируется в зависимости от процедурных особенностей и особенностей животного, но может варьироваться от 15 минут до 1 часа. Как только животное начнет дышать комфортно (частота дыхания 15-30 вдохов/мин, уровень углекислого газа в конце выдоха менее 60, SpO2 выше 95%), отключите кислород, оставив другие средства мониторинга подключенными. Удалите временные участки сосудистого доступа и приложите давление, чтобы предотвратить образование гематомы. Если животное остается стабильным и продолжает насыщаться кислородом в течение следующих 5 минут, его можно транспортировать в зону восстановления. После трех последовательных самопроизвольных глотаний сдуйте манжету эндотрахеальной трубки и осторожно извлеките трубку. Наблюдайте за животным еще не менее 5 минут, чтобы убедиться, что оно продолжает получать кислород должным образом и не сталкивается с дыхательной недостаточностью. Проточный кислород следует использовать по мере необходимости, если животное десатурирует после экстубации.