Summary

Формирование микро- и нанопластиков из сельскохозяйственных пластиковых пленок для использования в фундаментальных исследованиях

Published: July 27, 2022
doi:

Summary

Мы показываем формирование и размерную характеристику микро- и нанопластиков (МП и НП соответственно) с использованием поэтапного процесса механического фрезерования, шлифования и визуализационного анализа.

Abstract

Микропластики (МП) и нанопластики (НП), рассеянные в сельскохозяйственных экосистемах, могут представлять серьезную угрозу для биоты в почве и близлежащих водных путях. Кроме того, химические вещества, такие как пестициды, адсорбированные НП, могут нанести вред почвенным организмам и потенциально попасть в пищевую цепь. В этом контексте используемые в сельском хозяйстве пластмассы, такие как пластиковые мульчирующие пленки, вносят значительный вклад в загрязнение пластиком в сельскохозяйственных экосистемах. Однако в большинстве фундаментальных исследований судьбы и экотоксичности используются идеализированные и плохо репрезентативные материалы МП, такие как полистирольные микросферы.

Поэтому, как описано здесь, мы разработали многоступенчатую процедуру лабораторного масштаба для механического формирования репрезентативных депутатов и НП для таких исследований. Пластичный материал получали из коммерчески доступных пластиковых мульчирующих пленок полибутирата адипат-ко-терефталата (ПБАТ), которые были эмбритированы либо путем криогенной обработки (CRYO), либо выветривания окружающей среды (W), а также из необработанных гранул PBAT. Затем пластиковые материалы обрабатывались механическим фрезерованием с образованием МП размером 46-840 мкм, имитируя истирание пластиковых фрагментов ветром и механическим оборудованием. Затем депутаты были разделены на несколько фракций размера, чтобы обеспечить дальнейший анализ. Наконец, фракция сита 106 мкм подвергалась мокрому измельчению для получения NP 20-900 нм, процесс, который имитирует медленный процесс уменьшения размера для наземных МП. Размеры и форма для депутатов были определены путем анализа изображений стереомикрографов, а динамическое рассеяние света (DLS) использовалось для оценки размера частиц для НП. Депутаты и НП, сформированные в результате этого процесса, обладали неправильными формами, что соответствует геометрическим свойствам депутатов, извлеченных из сельскохозяйственных полей. В целом, этот метод уменьшения размера оказался эффективным для формирования МП и НП, состоящих из биоразлагаемых пластмасс, таких как полибутиленадипат-котерефталат (ПБАТ), представляющих собой мульчирующие материалы, используемые для сельскохозяйственного специального растениеводства.

Introduction

В последние десятилетия быстро растущее мировое производство пластмасс и неправильная утилизация и отсутствие переработки пластиковых отходов привели к загрязнению окружающей среды, которое повлияло на морские и наземные экосистемы 1,2,3. Пластиковые материалы необходимы для современного сельского хозяйства, особенно для выращивания овощей, мелких фруктов и других специальных культур. Их использование в качестве мульчирующих пленок, высоких и низких туннельных покрытий, капельной ленты и других применений направлено на повышение урожайности и качества сельскохозяйственных культур, снижение производственных затрат и продвижение устойчивых методов ведения сельского хозяйства 4,5. Тем не менее, расширение использования «пластикультуры» вызвало обеспокоенность по поводу формирования, распределения и удержания пластиковых деталей в сельскохозяйственных условиях. После непрерывного процесса фрагментации, вызванного охрупчиванием в результате деградации окружающей среды в течение срока службы, более крупные пластиковые фрагменты образуют микро- и нанопластики (МНП), которые сохраняются в почве или мигрируют в соседние водные пути через водный сток и ветер 6,7,8. Факторы окружающей среды, такие как ультрафиолетовое (УФ) излучение через солнечный свет, механические силы воды и биологические факторы, вызывают пластическое охрупчивание экологически дисперсных пластмасс, что приводит к распаду более крупных пластиковых фрагментов на макро- или мезопластические частицы 9,10. Дальнейшая дефрагментация образует микропластики (МП) и нанопластики (НП), отражающие частицы среднего размера (номинального диаметра; г) 1-5000 мкм и 1-1000 нм соответственно11. Однако верхний предел dp для НП (т.е. нижний предел для депутатов) не согласован повсеместно, и в нескольких статьях он указан как 100 нм12.

НМП из пластиковых отходов представляют собой возникающую глобальную угрозу для здоровья почв и экосистемных услуг. Адсорбция тяжелых металлов из пресной воды депутатами привела к 800-кратному повышению концентрации тяжелых металлов по сравнению с окружающей средой13. Кроме того, депутаты в водных экосистемах создают многочисленные стрессоры и загрязняющие вещества, изменяя проникновение света, вызывая истощение кислорода и вызывая адгезию к различной биоте, включая проникновение и накопление в водных организмах14.

Недавние исследования показывают, что ПНП могут влиять на геохимию и биоту почвы, включая микробные сообщества и растения 15,16,17. Кроме того, НП угрожают продовольственной сети 17,18,19,20. Поскольку МНП легко подвергаются вертикальному и горизонтальному переносу в почве, они могут переносить поглощенные загрязняющие вещества, такие как пестициды, пластификаторы и микроорганизмы, через почву в грунтовые воды или водные экосистемы, такие как реки и ручьи 21,22,23,24. Обычные сельскохозяйственные пластмассы, такие как мульчирующие пленки, изготавливаются из полиэтилена, который должен быть удален с поля после использования и утилизирован на свалках. Однако неполное удаление приводит к значительному накоплению пластикового мусора в почвах 9,25,26. В качестве альтернативы, почвенно-биоразлагаемые пластиковые мульчи (BDM) предназначены для обработки в почве после использования, где они будут разлагаться с течением времени. Тем не менее, BDM временно сохраняются в почве и постепенно деградируют и фрагментируются на депутатов и НП 9,27.

Во многих современных экологических экотоксикологических исследованиях и исследованиях судьбы используются идеализированные и нерепрезентативные материалы модели депутатов и НП. Наиболее часто используемыми суррогатными МНП являются монодисперсные полистирольные микро- или наносферы, которые не отражают фактические МНП, проживающие в окружающей среде 12,28. Следовательно, выбор непредставительных депутатов и НП может привести к неточным измерениям и результатам. Основываясь на отсутствии соответствующих модельных ΜNP для наземных экологических исследований, авторы были мотивированы на подготовку таких моделей из сельскохозяйственных пластмасс. Ранее мы сообщали о формировании ПНД из БДМ и полиэтиленовых гранул путем механического измельчения и измельчения пластиковых гранул и пленочных материалов, а также о размерных и молекулярных характеристиках МНП29. В настоящем документе содержится более подробный протокол подготовки ПМН, который может быть применен более широко ко всем сельскохозяйственным пластмассам, таким как мульчирующие пленки или их гранулированное сырье (рисунок 1). Здесь, в качестве примера, мы выбрали мульчировочную пленку и сферические гранулы биоразлагаемого полимерного полибутилендипаттерефталата (ПБАТ) для представления сельскохозяйственных пластмасс.

Protocol

1. Переработка МП из пластиковых гранул путем криогенной предварительной обработки и измельчения ПРИМЕЧАНИЕ: Данная методология основана на процедуре, описанной в другом месте, с использованием пленки PBAT, состоящей из того же материала, который использовался дл?…

Representative Results

Для проверки метода экспериментальной процедуры и анализа МП и НП были сформированы из гранул и пленочных материалов и сопоставлены по размеру и форме с использованием микроскопических изображений. Способ, описанный на фиг.1, эффективно формировал МП и НП из биоразлага…

Discussion

Этот метод описывает эффективный процесс, первоначально описанный в предыдущей публикации29, для подготовки МНП, полученных из гранул и мульчирующих пленок, для экологических исследований. Процесс уменьшения размера включал криогенное охлаждение (только для пленки), сухо?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Это исследование финансировалось Сельскохозяйственным колледжем Герберта, Департаментом биосистемной инженерии и почв и Научным альянсом в Университете Теннесси, Ноксвилл. Кроме того, авторы с благодарностью отмечают финансовую поддержку, предоставленную в рамках гранта Министерства сельского хозяйства США 2020-67019-31167 для этого исследования. Первоначальное сырье для подготовки МНП биоразлагаемой мульчированной пленки на основе ПБАТ было любезно предоставлено компанией BioBag Americas, Inc. (Dunevin, FL, США) и гранулами PBAT компанией Mobius, LLC (Lenoir City, TN).

Materials

Aluminum dish, 150 mL  Fisher Scientific, Waltham, MA, USA 08-732-103 Drying of collected NPs
Aluminum dish, 500 mL VWR International, Radnor, PA, USA 25433-018 Collecting NPs after wet-grinding
Centrifuge Fisher Scientific, Waltham, MA, USA Centrific 228 Container for centrifugation
Delivery tube, #20, 840 µm Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA 3383M30 Sieving of the first fraction during milling
Delivery tube, #60, 250 µm Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA 3383M45 Sieving of the second fraction (3x)  during milling
Thermomixer,  5350 Mixer Eppendorf North America, Enfield, CT, USA 05-400-200 Analysis of sieving experiments
FT-IR Spectrum Two, spectrometer with attenuated total reflectance (ATR) Perkin Elmer, Waltham, MA, USA L1050228  Measuring FTIR spectra
Glass beaker, 1000 mL DWK Life Sciences, Milville, NJ, USA 02-555-113 Stirring of MPs-water slurry before grinding
Glass front plate Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA 3383N55  Front cover plaste for Wiley Mini Mill
Glass jar, 50 mL Uline, Pleasant Prairie, WI, USA S-15846P Collective MPs after milling
Glove Box, neoprene Bel-Art-SP Scienceware, Wayne, NJ, USA BEL-H500290000 22-Inch, Size 10
Zetasizer Nano ZS 90 size analyzer Malvern Panalytical, Worcestershire, UK  Zetasizer Nano ZS Measuring nanoplastics dispersed in DI-water
Microscope camera Nikon, Tokyo, 108-6290, Japan Nikon Digital Sight 10 Combined with Olympus microscope to receive digital images
Microscope Olympus, Shinjuku, Tokyo, Japan Model SZ 61 Imaging of MPs
Nitrogen jar, low form dewar flasks Cole-Palmer, Vernon Hills, IL, USA UX-03771-23 Storage of liquid nitrogen during cryogenic cooling
Accurate Blend 200, 12-speed blender Oster, Boca Raton, FL, USA 6684 Initiating the size reduction of cryogenically treated plastic film
PBAT film, – BioAgri™ (Mater-Bi®) BioBag Americas, Inc, Dunedin, FL, USA 0.7 mm thick Feedstock to form MPs and NPs, agricultural mulch film
PBAT pellets Mobius, LLC, Lenoir City, TN, USA Diameter 3 mm Feedstock to form microplastics (MPs) and nanoplastics (NPs) trough milling and grinding
Plastic centrifuge tubes, 50 mL Fisher Scientific, Waltham, MA, USA 06-443-18 Centrifugation of slurry after wet-grinding
Plastic jar, 1000 mL, pre-cleaned, straight sided Fisher Scientific, Waltham, MA, USA 05-719-733 Collection of NPs during and after wet grinding
Polygon stir bars, diameterø=8 mm, length=50.8 mm   Fisher Scientific, Waltham, MA, USA 14-512-127 Stirring of MPs slurry prior to wet-grinding
Scissors, titanium bonded Westcott, Shelton, CT, USA 13901 Cutting of initial PBAT film feedstocks
Square glass cell with square aperture and cap, 12 mm O.D. Malvern Panalytical, Worcestershire, UK  PCS1115 Measuring of NPs particle size
Stainless steel bottom, 3 inch, pan Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA 8401 For sieving after Wiley-milling
Stainless steel sieve, 3 inch, No. 140 (106 µm) Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA 1308 For sieving after Wiley-milling
Stainless steel sieve, 3 inch, No. 20 (850 µm) Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA 1296 Sieving of MPs after Wiley-milling
Stainless steel sieve, 3 inch, No. 325 (45 µm) Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA 1313 Sieving of MPs after Wiley-milling
Stainless steel sieve, 3 inch, No. 60 (250 µm) Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA 1303 Sieving of MPs after Wiley-milling
Stainless steel top cover, 3 inch Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA 8406 Sieving of MPs after Wiley-milling
Stainless steel tweezers Global Industrial, Port Washington, NY, USA T9FB2264892 Transferring of  frozen film particles from jar into blender
Vacuum oven, model 281A Fisher Scientific, Waltham, MA, USA 13-262-50 Vacuum oven to dry NPs after wet-grinding
Friction grinding machine, Supermass Colloider Masuko Sangyo, Tokyo, Japan MKCA6-2J Grinding machine to form NPs from MPs
Wet-grinding stone, grit size: 297 μm -420 μm Masuko Sangyo, Tokyo, Japan MKE6-46DD Grinding stone to form NPs from MPs
Wiley Mini Mill, rotary cutting mill Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA NC1346618 Size reduction of pellets and film into MPs and NPs
Software
FTIR-Spectroscopy software Perkin Elmer, Waltham, MA, USA Spectrum 10  Collection of spectra from the initial plastic, MPs and NPs
Image J, image processing program National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA Version 1.53n Analysis of digital images received from microscopy 
Microscope software, ds-fi1 software Malvern Panalytical , Malvern, UK Firmware DS-U1 Ver3.10 Recording of digital images
Microsoft, Windows,  Excel 365, spreadsheet software Microsoft, Redmond, WA, USA Office 365 Calculating the average particle size and creating FTIR spectra images
JMP software, statistical software SAS Institute Inc., Cary, NC, 1989-2021 Version 15 Statistical analysis of particle size and perform best fit of data set
Unscrambler software Camo Analytics, Oslo, Norway Version 9.2 Normalizing and converting FTIR spectra into .csv fromat

Referencias

  1. Jin, Z., Dan, L. Review on the occurrence, analysis methods, toxicity and health effects of micro-and nano-plastics in the environment. Environmental Chemistry. (1), 28-40 (2021).
  2. Kumar, M., et al. Current research trends on micro-and nano-plastics as an emerging threat to global environment: a review. Journal of Hazardous Materials. 409, 124967 (2021).
  3. Alimba, C. G., Faggio, C., Sivanesan, S., Ogunkanmi, A. L., Krishnamurthi, K. Micro (nano)-plastics in the environment and risk of carcinogenesis: Insight into possible mechanisms. Journal of Hazardous Materials. 416, 126143 (2021).
  4. Serrano-Ruiz, H., Martin-Closas, L., Pelacho, A. M. Biodegradable plastic mulches: Impact on the agricultural biotic environment. Science of The Total Environment. 750, 141228 (2021).
  5. Hayes, D. G., et al. Biodegradable plastic mulch films for sustainable specialty crop production. Polymers for Agri-Food Applications. , 183-213 (2019).
  6. Viaroli, S., Lancia, M., Re, V. Microplastics contamination of groundwater: Current evidence and future perspectives. A review. Science of The Total Environment. , 153851 (2022).
  7. Rillig, M. C., Lehmann, A. Microplastic in terrestrial ecosystems. Science. 368 (6498), 1430-1431 (2020).
  8. Anunciado, M. B., et al. Effect of environmental weathering on biodegradation of biodegradable plastic mulch films under ambient soil and composting conditions. Journal of Polymers and the Environment. 29 (9), 2916-2931 (2021).
  9. Yang, Y., et al. Kinetics of microplastic generation from different types of mulch films in agricultural soil. Science of The Total Environment. 814, 152572 (2022).
  10. Hayes, D. G., et al. Effect of diverse weathering conditions on the physicochemical properties of biodegradable plastic mulches. Polymer Testing. 62, 454-467 (2017).
  11. Schwaferts, C., Niessner, R., Elsner, M., Ivleva, N. P. Methods for the analysis of submicrometer-and nanoplastic particles in the environment. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 112, 52-65 (2019).
  12. Gigault, J., et al. Current opinion: what is a nanoplastic. Environmental Pollution. 235, 1030-1034 (2018).
  13. Naqash, N., Prakash, S., Kapoor, D., Singh, R. Interaction of freshwater microplastics with biota and heavy metals: a review. Environmental Chemistry Letters. 18 (6), 1813-1824 (2020).
  14. Manzoor, S., Naqash, N., Rashid, G., Singh, R. Plastic material degradation and formation of microplastic in the environment: A review. Materials Today: Proceedings. , 3254-3260 (2022).
  15. de Souza Machado, A. A., et al. Impacts of microplastics on the soil biophysical environment. Environmental Science & Technology. 52 (17), 9656-9665 (2018).
  16. Jacques, O., Prosser, R. A probabilistic risk assessment of microplastics in soil ecosystems. Science of The Total Environment. 757, 143987 (2021).
  17. Kwak, J. I., An, Y. -. J. Microplastic digestion generates fragmented nanoplastics in soils and damages earthworm spermatogenesis and coelomocyte viability. Journal of Hazardous Materials. 402, 124034 (2021).
  18. Wahl, A., et al. Nanoplastic occurrence in a soil amended with plastic debris. Chemosphere. 262, 127784 (2021).
  19. Vighi, M., et al. Micro and nano-plastics in the environment: research priorities for the near future. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology Volume 257. , 163-218 (2021).
  20. Pironti, C., et al. Microplastics in the environment: intake through the food web, human exposure and toxicological effects. Toxics. 9 (9), 224 (2021).
  21. Zurier, H. S., Goddard, J. M. Biodegradation of microplastics in food and agriculture. Current Opinion in Food Science. 37, 37-44 (2021).
  22. Horton, A. A., Dixon, S. J. Microplastics: An introduction to environmental transport processes. Wiley Interdisciplinary Reviews: Water. 5 (2), 1268 (2018).
  23. Panno, S. V., et al. Microplastic contamination in karst groundwater systems. Groundwater. 57 (2), 189-196 (2019).
  24. Su, Y., et al. Delivery, uptake, fate, an transport of engineered nanoparticles in plants: a critical review and data analysis. Environmental Science: Nano. 6 (8), 2311-2331 (2019).
  25. Yu, Y., Griffin-LaHue, D. E., Miles, C. A., Hayes, D. G., Flury, M. Are micro-and nanoplastics from soil-biodegradable plastic mulches an environmental concern. Journal of Hazardous Materials Advances. 4, 100024 (2021).
  26. Hayes, D. G. Enhanced end-of-life performance for biodegradable plastic mulch films through improving standards and addressing research gaps. Current Opinion in Chemical Engineering. 33, 100695 (2021).
  27. Qin, M., et al. A review of biodegradable plastics to biodegradable microplastics: Another ecological threat to soil environments. Journal of Cleaner Production. 312, 127816 (2021).
  28. Phuong, N. N., et al. Is there any consistency between the microplastics found in the field and those used in laboratory experiments. Environmental Pollution. 211, 111-123 (2016).
  29. Astner, A., et al. Mechanical formation of micro-and nano-plastic materials for environmental studies in agricultural ecosystems. Science of The Total Environment. 685, 1097-1106 (2019).
  30. Rist, S., Hartmann, N. B. Aquatic ecotoxicity of microplastics and nanoplastics: lessons learned from engineered nanomaterials. Freshwater Microplastics. , 25-49 (2018).
  31. Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).
  32. Raju, S., et al. Improved methodology to determine the fate and transport of microplastics in a secondary wastewater treatment plant. Water Research. 173, 115549 (2020).
  33. Caputo, F., et al. Measuring particle size distribution and mass concentration of nanoplastics and microplastics: addressing some analytical challenges in the sub-micron size range. Journal of Colloid and Interface Science. 588, 401-417 (2021).
  34. Xu, M., et al. Polystyrene microplastics alleviate the effects of sulfamethazine on soil microbial communities at different CO2 concentrations. Journal of Hazardous Materials. 413, 125286 (2021).
  35. Ding, L., et al. Insight into interactions of polystyrene microplastics with different types and compositions of dissolved organic matter. Science of The Total Environment. 824, 153883 (2022).
  36. Abbasimaedeh, P., Ghanbari, A., O’Kelly, B. C., Tavanafar, M., Irdmoosa, K. G. Geomechanical behaviour of uncemented expanded polystyrene (EPS) beads-clayey soil mixtures as lightweight fill. Geotechnics. 1 (1), 38-58 (2021).
  37. Li, Z., Li, Q., Li, R., Zhou, J., Wang, G. The distribution and impact of polystyrene nanoplastics on cucumber plants. Environmental Science and Pollution Research. 28 (13), 16042-16053 (2021).
  38. Sobhani, Z., Panneerselvan, L., Fang, C., Naidu, R., Megharaj, M. Chronic and transgenerational effects of polystyrene microplastics at environmentally relevant concentrations in earthworms (Eisenia fetida). Environmental Toxicology and Chemistry. 40 (8), 2240-2246 (2021).
  39. Lionetto, F., Esposito Corcione, C., Rizzo, A., Maffezzoli, A. Production and characterization of polyethylene terephthalate nanoparticles. Polymers. 13 (21), 3745 (2021).
  40. Dümichen, E., et al. Analysis of polyethylene microplastics in environmental samples, using a thermal decomposition method. Water Research. 85, 451-457 (2015).
  41. Robotti, M., et al. Attrition and cryogenic milling production for low pressure cold gas spray and composite coatings characterization. Advanced Powder Technology. 27 (4), 1257-1264 (2016).
  42. Ducoli, S., et al. A different protein corona cloaks "true-to-life" nanoplastics with respect to synthetic polystyrene nanobeads. Environmental Science: Nano. 9 (4), 1414-1426 (2022).
  43. El Hadri, H., Gigault, J., Maxit, B., Grassl, B., Reynaud, S. Nanoplastic from mechanically degraded primary and secondary microplastics for environmental assessments. NanoImpact. 17, 100206 (2020).
  44. Eitzen, L., et al. The challenge in preparing particle suspensions for aquatic microplastic research. Environmental research. 168, 490-495 (2019).
  45. Ekvall, M. T., et al. Nanoplastics formed during the mechanical breakdown of daily-use polystyrene products. Nanoscale advances. 1 (3), 1055-1061 (2019).
  46. Caldwell, J., et al. Fluorescent plastic nanoparticles to track their interaction and fate in physiological environments. Environmental Science: Nano. 8 (2), 502-513 (2021).
  47. Zeb, A., et al. Evaluating the knowledge structure of micro-and nanoplastics in terrestrial environment through scientometric assessment. Applied Soil Ecology. 177, 104507 (2022).
  48. Ji, Z., et al. Effects of pristine microplastics and nanoplastics on soil invertebrates: A systematic review and meta-analysis of available data. Science of The Total Environment. 788, 147784 (2021).
  49. de Alkimin, G. D., Gonçalves, J. M., Nathan, J., Bebianno, M. J. Impact of micro and nanoplastics in the marine environment. Assessing the Effects of Emerging Plastics on the Environment and Public Health. , 172-225 (2022).
  50. Pires, A., Cuccaro, A., Sole, M., Freitas, R. Micro (nano) plastics and plastic additives effects in marine annelids: A literature review. Environmental Research. , 113642 (2022).
  51. Hurley, R. R., Nizzetto, L. Fate and occurrence of micro (nano) plastics in soils: Knowledge gaps and possible risks. Current Opinion in Environmental Science & Health. 1, 6-11 (2018).
check_url/es/64112?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Astner, A. F., Hayes, D. G., O’Neill, H. M., Evans, B. R., Pingali, S. V., Urban, V. S., Young, T. M. Forming Micro-and Nano-Plastics from Agricultural Plastic Films for Employment in Fundamental Research Studies. J. Vis. Exp. (185), e64112, doi:10.3791/64112 (2022).

View Video