ניהול מרחוק מעבדה: וירוס נשימתי דיאגנוסטיקה

1. התקנה הערה: רק 2-4 אנשים נדרשים לפרוס את יחידת מעבדה “לגו כמו”. בצורה אופטימלית, 4 אנשים ישמש כדי לפרוס, אבל זה אפשרי עם רק 2. לנצל את משאית מעלית מזלג (איור 1 א’,ב’) או התקן אחר הרמה מתאימים להתמודד עם הגורם המכיל. להשתמש משאית מעלית מזלג לפחות שבעה טונות של כושר הרמה כדי להתמודד עם שני סוגי מכולות24. כדי להגדיר את יחידת מעבדה, בחר תקופה של 90 x 60 מטרים רבועים (27.4 x 18.3 ז2) על נוף שטוח כדי להבטיח שאין חסימות לעכב את הפריסה נאותה. ודא שלאתר יש היטב סחוט אדמה כדי להבטיח ניקוז האתר כמו זו עלולה לגרום בעיות פוטנציאליות עם פיזור מים אחרי גשם נופל. שימוש בגן זה הוחלק בעבר, שהם קשה אדמת הדחוס חוזק מינימלי של kN/dm 102. האזור שמסביב עליו מאפשרת גישה ציוד נחוץ לפריקת היחידה מן שלו המכשיר שינוע, להכיל תמיכה הציוד הנדרש להשלים את המשימה. למקם את יחידת או יחידות שלו ‘מצב העברה’ במרכז של האתרים שנבחרו ולהתאים את רמת. כל יחידה מצוידת ארבעה נסיכים עקב החלקת משאבים המאפשרים פריסה באתר שיש ציון מרבי של 6.5% (~ 4 מעלות). גובה מינימלי של המכולות הוא ~ 6 אינץ ‘ כדי להבטיח כי הרצפה שאיבות וצינורות הפרשות עובד כראוי. לא להאריך שקעי יותר מ 12 סנטימטרים. לצרף את הכן התומך הזרוע של השקע. ודא המכולה רמה על-ידי הצבת משווה גובה של בועה במרכז כל רכבת תחתית. אל תרחיב היחידה עד הוא כבר היה בתנוחה כראוי! הרחב את היחידה על-ידי פתיחת הלוחות לקבלת פונקציונליות מלאה. תחילה לאתר את מוט תמיכה שני חלקים. להתחבר לקוטב תמיכה כך את גובהו הוא כמעט כגובה יחידת מיכל. הקוטב מאפשרת למשתמש לפתוח את הלוח ולתמוך המשקל של החלונית ‘ גג ‘ כפי מהדלתות הצדדיות נפתחות. יש סרטון בטיחות שפועל כמו סיכה כדי לשמור על הלוחות נעול. להסיר את הסרטון בטיחות תחילה, ולאחר מכן הרם ומשוך את הסיכה הנעילה מצלמת מן החור. מקם את הסיכה מאחורי את הידית, הזז את ידית המנעול מצלמת ממוקם בצדדים (ניתן להרחבה) התחתון של המיכל. . להרים את הגג ביהירות לוח 1 בהתחשב כי לוח זה יש גז, ברגע הדלתות לוח אינם נעולים, מהם ישחרר. זה יאפשר למשתמש שיוכל להרים את הגג (לוח 1) באמצעות הקוטב תמיכה שני חלקים. העבר העצה של הקוטב תמיכה תחת לוח גג לתמוך באופן זמני (איור 4A). בזמן המעצר למעלה בחלונית ‘ גג ‘ עם לתקוע את התמיכה, תמצא את שרשרת בטיחות, הממוקם על גבי צד של המיכל שמאל. בסיועם של 2-3 אנשים, בזהירות גרור את לוח 2 עד הרשת בטיחות הוא ישר, מחזיק את המשקל של לוח 2, יש העוסקים. לחבר את החגורה רצועה כננת להר לוג בעבודת יד על ידי ליפוף זה סביב החלק החיצוני של ההליכה גז. הערה שאם אין כלי כננת, ניתן להשלים באופן ידני הצעד הקודם לפחות שני אנשים משני צידי הלוח באופן ידני מחזיק והורדת זה.התראה: המשקל של הפאנל הוא 260 ק ג! ודא אין אנשים או פריטים של לוח 2 ושימוש המנוף, לקדוח, להמשיך להוריד את הלוח (איור 4B). כאשר לוח 2 לחלוטין מופחת, נתק את הכננת רצועה קטע אותו בחזרה לתוך המנוף. הסר את המנוף והנח אותו בצד השני של המיכל כהכנה לשימוש. בשני הצדדים של היחידה זהים ובצע את השלבים אותם מעל לצד השני של היחידה. לפריסה מלאה של הצד הראשון, מושיט יד לחלונית ‘ ‘ (אשר נמצא כעת הרצפה) והרם לפחות שני אנשים בכל צד, באופן ידני לוח 3 כלפי מעלה לתוך המקום כמו הדלת ואת קיר החזית של הצד (איור 4C). שני האנשים יישארו להחזיק בלוח 3, ואילו האדם השלישי מסיר את מוט תמיכה.התראה: אף אחד לא צריך להיות בתוך היחידה או תחת קורת גג עד 3 לוח קיר נמצא במקום! מבפנים של לוח 3, לאתר את התפסים בשני ולכלוא אותו למקומו באמצעות את רצועת הביטחון. ודא ש-gaskets גומי פאנל גג שחור הם שלף לפנים הפנימי של היחידות. זה חייב להתבצע כדי למנוע אחרים חדירה מים לתוך יחידת והגשם. מבפנים של המיכל, נעילת לוח 4. ברגע סמארטפון, לדחוף החוצה לוח 4 (איור 4D) כך זה נפתחת כמו דלת. בריחי המנעול השניים בטיחות בתוך הקיר. נעילת לוח 5, חזור על השלבים באותו לוח 4. המאבטחים זה לוח עם הבריחים הבטיחות פנימי זהה. לאחר כל יחידת הפנים ננעל, שידת ההחתלה את turnbuckle עד הרצפה ואת קירות סוף חתומות. ברגע בשני הצדדים של המיכל בבטחה מורחבים, לבדוק את השקעים, לבצע שינויים נחוצים מפני הסטת שייתכן שהתרחשה. בדוק את המקלט יהיה ברמה שבועית. לאחר מזג אוויר קיצוניים (גשם או רוח) לבדוק נסיכים על מכולות, משתנות בהתאם. הרחב את המיכל השני אם המודולים מעבדה ו”יצירת מתוכננים לשימוש (איור 5). להתחבר היחידות מקור חשמל ואספקת מים. ניתן למצוא הוראה מפורטת על התקנה של גנרטור דיזל המחוברים ליחידות באמצעות תיבת מפסק ידני עפ י24.הערה: יחידת מעבדה מרחוק עכשיו נפרס. שאינן ניתנות לכיווץ אמצעי האחסון הפנימי של היחידה מאפשרת לאחסן מינימום של אספקת ציוד, מעבדה הכרחי עבור בדיקות אבחון מסוים. התקנת מערכת לחץ עבור מודול BSL-3 מתואר בפירוט24 ודורש בקרת איכות נוספים. 24 2. רשימת פעולות לביצוע עבור הגנה אישית של זרימת העבודה מעבדה בסיסית הערה: שגיאה באחת כללי בטיחות, בדיקות שלבים דרישה מעבדה עלול לפסול את התוצאות של תהליך הבדיקה כולה. לפני הכנת להזין את יחידת מעבדה המותקנים, לוודא כי כל דרישות הבטיחות BSL-2 או BSL 3 התפקדו: סלט עם ציוד מגן אנשי נאות (PPE), שטיפת ידיים, לבש כפפות, מטהר בכל סביבות עבודה כי הם כדי להשתמש בו. בצע את הפעולות לביצוע טבלה 1 המכיל בדרישות הבטיחות להגנה אישית במהלך הבדיקות לרוץ עם המעבדה BSL-2, המודול BSL-3 (שהורכב הכפפות חדר – לחץ שלילי וחדר PCR – חיובי הלחץ). Decontaminate כל מרחב עבודה ואספקה במעבדה. אם מתכנן להשתמש בפתרון נתרן תת-כלורי (0.5%), הידוע גם בשם נוזל אקונומיקה, כדי decontaminate את סביבת העבודה ואספקה, גם משתמש 70% אתנול לנקות בכל התחומים נחשפים אקונומיקה, כמו אקונומיקה יכול לערבב עם חומרים כימיים אחרים בסביבת העבודה ליצירת גזים רעילים. תשליך את כל המוצרים אקונומיקה לתוך סל פסולת המיועדת משלהם. לפני שאתם מתחילים לעבוד ביחידת מעבדה, להיות מוכר שבסידור ופריסת שלה. כללים חלים על עיבוד דגימות בחדר הכפפות (GB). החדר GB הוא לחץ שלילי! לפעול תא הכפפות, בדוק הוראת היצרן. מקורות רבים מספקים לימוד מפורט על הכפפות הפעולה25.הערה: מטרת assay הזה הוא כדי לחלץ ולטהר חומצה ריבונוקלאית (RNA) או חומצה deoxyribonucleic (DNA), אם קיים, מ דגימות. DNA/RNA שחולצו ייבדק על ידי בזמן אמת RT-PCR לזיהוי נוכחות או היעדרות של פתוגנים ויראליים יישוב – שפעת (INF). 3. אבחון וירוס שפעת מהירה על ידי RT-PCR במתקן מעבדה BSL-2 קבלת ורישום להחיל את רשימת פעולות לביצוע עבור עיקרון השוויון הפוליטי (ראה סעיף 2). INF הוא סוכן Class 2 הדורשים תרגול BSL-2. עיקרון השוויון הפוליטי המתאים לאימון BSL-2 נדרש. בנוסף, ללבוש משקפי ומעילים מעבדה שרוול קשורים באזיקים למזער חשיפה אפשרית של העור. על פי המלצות ארגון הבריאות העולמי (WHO)26, להשתמש שדקרון סטרילי או סחבות זהורית עם פירים פלסטיק עבור דגימה של דרכי הנשימה.הערה: כותנה או סידן alginate מטליות מטליות במקלות עץ עשוי להכיל תרכובות בטל וירוסים מסוימים ומעכבות PCR בדיקות26,27. כמו לדוגמה מטליות נלקחים מחולים, להסיעם אל המתקן מעבדה מן השדה או מרפאה. העברת דגימות דרך חלון מעבר; אין אפשרות לפתוח חלון זה משני הצדדים. בחלון pass-through, צינורות תרסיס המכיל דוגמאות עם מלבין 1 דקות ולאחריו 70% אתנול, לנגב היבש על מנת לספק טיהור נאותה לפני שהם נכנסים יחידת מעבדה. בעקבות, ועלייתו הטכנאי במעבדה בתוך היחידה לפתוח את החלון pass-through, לאסוף הדגימות מהגורם אקונומיקה כדי להיות רשום. בדרך כלל, האדם עובר את הדגימה. והאדם חילוץ המדגם אינן זהות. פתח את החלון pass-through ולאסוף את הדוגמאות כדי להיות רשום. נגב את דוגמיות זה היו נקיים אקונומיקה, אתנול. לנגב את הפנים של חלון מעבר עם אקונומיקה ואחריו 70% אתנול פתרון. לרשום מדגם בתוך מערכת מבוססת-לוח אינטראקטיבי או מחשב נייד. לזהות מדגם עם הפרטים הבאים:-אוסף תאריך-תאריך התחלה- ומין החולה-סוג הדגימה (למשל., ספוגית האף)-מזהים ייחודיים-עוד מידע רלבנטי השתמש ברקודים עבור תיוג צינורות. להוסיף ברקוד כל שפופרת מדגם של 4 שפופרות ריק המיועד aliquots. להעביר את הדגימות למכסה האוורור. לסרוק ברקוד על כל שפופרת, ודא פרטי הזיהוי של המדגם הנכון מופיע במסך מבוסס לוח המערכת או מחשב נייד. אם ברקודים אינם זמינים, השתמש סמן עמידים לאלכוהול. תמיד לסמן את הצנצנת עצמה, מעולם לא יכול לקבל החליף את כובע כזה במהלך טיפול! להשלים את תהליך הרישום. מדגם aliquot לאחר יש כבר מתויג מבחנות, להשתמש ארון אבטחה מסוג Class 2 מוסמך כדי להתמודד עם דגימות aliquots של דגימות. Aliquot אחד יכול לשמש לבדיקה מיידית, האחרים יישמרו לצורך מטרת הפניה או שגוי. דגימות מגיעים עם ספוגית באף טיפ במדיום תחבורה ויראלי, לעורר את הטיפ ספוגית במדיום עבור 30 s ולסחוט אותו כנגד הצד של הבקבוקון. ואז להסיר אותה בינוני, השלך אותו עם פרוטוקול פסולת ותברואה (בהתאם למחוק, החיטוי או לתלות בתוך תמיסת כלור מטריים).הערה: הנפח הקטן ביותר של בינוני צריך להיות מאוחסן הוא 0.5 מ. לפיכך, ניתן לחלק מדגם 3 mL 6 aliquots (תת דגימות). להשתמש שפופרת אחסון הקפאה 1 מ”ל עבור כל דגימה של 0.5 מ ל כדי לספק יותר נפח בינוני קפוא. כאשר לוקחים aliquots, השתמש טריים פיפטות סטרילי או חד פעמיות עבור כל דגימה וזורקים אותם לתוך מכולות פסולת ותברואה למניעת זיהום צולב. ודא כי כל שפופרת בחוזקה חתום וסגור. לנצל את aliquot אחד לכל דגימה לחילוץ מיידי ולאחסן כל aliquots אחרים במקפיא (ב-80 מעלות צלזיוס, כמו זה הוא דוגמא הנשימה) לשימוש עתידי. לפני הזזת לתחנת עבודה, לנקות כל סביבת העבודה משטחים וציוד עם אקונומיקה ואחריו פתרון 70% אתנול. מיצוי וטיהור כדי להבטיח איכות של מהלך הבדיקה, לבר-קוד של ה-PCR לטעום aliquots של הדגימה טיפול שטח לתחנת עבודה (בטיחות BSL-2 הקבינט) המיועד לחילוץ. זו בטיחות בארון יש קבוצה נפרדת של פיפטות טיפול של המדגם. להשתמש בערכה מיני RNA נגיפי לחילוץ של דגימות ה-RNA. בצע הוראות היצרן לשם טיהור של RNA נגיפי על-ידי פרוטוקול ספין. להכין את תערובת הבסיס לפי מספר דוגמאות צורך מדחיסה. לשמור על פירוק ולדגום מאגר ראשי לערבב בטמפרטורת החדר. הכן את מספר הדגימות צורך מדחיסה. תווית 1.5 mL מיקרו-צנטריפוגה צינורות עם מספרי ברקוד או מזהה ייחודי. הגדר פיפטה µL 560. את החל טיפ פיפטה נקי. להוסיף µL 560 המאגר פירוק כל שפופרת עם תוויות ברורות. עצה להשליך. החל טיפ פיפטה נקי. הוסף µL 140 המדגם. למחוק את הישן ולהחיל טיפ פיפטה נקי. חזור עם הדגימה אחרים. החל טיפ פיפטה נקי. להוסיף מאגר µL 140 tube שליטה שלילי. סגור את כל שפופרת בצורה מאובטחת. דופק-מערבולת לטעום 1 aliquot עם המאגר פירוק חוזר ס’ 15 עם מדגם aliquot 2 , הצינור שליטה. מיקרו-צנטריפוגה כל לטעום עבור Incubate ס’ 5 הדגימות 10 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר 10 דקות של דגירה, centrifuge מחדש את החצוצרות שלה כדי להסיר את כל טיפות בתוך כל מכסה הצינורית. להוסיף µL 560 של אתנול פתרון הדגימה. לשנות את הטיפ פיפטה. חזור עם דוגמיות הנותרים או נוספים. סגור כל שפופרת מדגם בצורה מאובטחת, דופק-מערבולת כל דגימה עבור ס’ 15 מיקרו-צנטריפוגה הדגימות עבור 5 s. החל את התערובת על העמודה ספין. להשיג נקי mL 2 צינורות איסוף. הוסף עמודות ספין, לתייג אותם כך שיתאימו את הדגימות. העברת µL 630 מדגם לעמודה התואמת, בהתאם. לאבטח כמוסות ומעבר לצנטריפוגה. פזר באופן שווה את הדגימות בצנטריפוגה. צנטריפוגה ב 6,000 × g עבור 1 דקות להסיר את המאגר פירוק. לחזור לתחנת העבודה. החלפת צינורות איסוף. להוסיף למאגר פירוק הנותרים, חזור על השלב צנטריפוגה. למחוק את הצינורות מדגם aliquot המקורי. להשליך את eluate ולשטוף את העמודה ספין עם שני אנשים רגילים. החל µL 500 של מאגר AW1. חזור עם כל דגימה. לאבטח כמוסות של כל דגימה, צנטריפוגה ב 6,000 × g במשך דקה אחת. חוזר עם AW2 מאגר השני, צנטריפוגה ב × 20,000 g למשך 3 דקות. סוף סוף elute את הרנ א על-ידי הוספת • תנאי מאגר. למקם את העמודה לתוך צינור נקי mL 1.5, פתח את העמודה והוסף 60 µL של המאגר דגירה ממוצע בטמפרטורת החדר במשך 1 דקה, צנטריפוגה ב 6,000 x g עבור 1 דקות. הדגימות. אתה מוכן לניתוח ה-PCR. PCR-הגברה וזיהוי לבצע הגברה PCR באזור נפרד המיועד PCR. לבצע הגברה PCR של היעד ויראלי באמצעות PCR פרוטוקול שלב הניתוח על פי הוראות היצרן. שימו לב, שילוב מאסטר הוא עשה שימוש תחל ספציפי ויראלי, רגשים, מאגר RT-PCR x 2, האנזים RT-PCR. להוסיף את תערובת הבסיס צלחות או צינורות, ואז מוסיפים ומערבבים דוגמאות בודדות (ראה Section 4.4). העברת את הצלחת אל המכונה PCR ולהפעיל בהתאם לתנאי הגברה היעד ויראלי. ברגע דגימות נטענים על גבי מכשיר PCR זה לוקח כ-90 דקות כדי להשלים את ההפעלה. תחזוקה לאחר השימוש ציוד לבצע תחזוקה ומחזורי לאחר השימוש ציוד על-פי בטבלה 2. 4-אבחון וירוס שפעת מהירה מאת RT-PCR במתקן מעבדה BSL-3 הערה: בתנאים BSL-3, נסיוני יישאר זהה, אך אמצעי בטיחות יקבלו עדיפות מעל הכל. לפני שנכנסים המעבדה BSL-3, להסתכל דרך חלון שקוף כדי לוודא כי לחץ שלילי הקימה ביחידת ה-הכפפות. זה יהיה ברור כי לחץ שלילי נוצרה כאשר כדור ורוד בתוך קיר גלוי. קבלת ורישום לאחר לחץ שלילי הקימה, תפתחי את הדלת, הזינו היחידה. מיד לשטוף ידיים, ואז להמשיך עיקרון השוויון הפוליטי. להחיל את רשימת פעולות לביצוע עבור עיקרון השוויון הפוליטי של זרימת העבודה BSL-3 (ראה סעיף 2). להמשיך לשים על עיקרון השוויון הפוליטי לפי הסדר הבא: תחת כפפות, חלוק, ערדליים, מסכה, מגן הפנים, השני זוג כפפות. מומלץ ללבוש חלוק מלא המגינה על הגוף כולו. להפעיל את המכונה ולאפשר לחץ בתא הכפפות כדי לייצב. השתמש פתרון תרסיס אקונומיקה כדי decontaminate בכל האזורים, וכן ציוד לשימוש בתוך ומחוץ את תא הכפפות. תשליך של חומרי פסולת אקונומיקה לתוך מכולה היחידה אקונומיקה. השתמשו שימוש פתרון אתנול 70% כדי לנקות את כל האזורים של אקונומיקה. להעביר את הדגימה דרך החלון pass-through.הערה: לפני שנפלו ב לעבור דרך החלון, לחטא צינורות המכיל דוגמאות מאת השוקע באמבט תת-כלורי במשך 1-2 דקות במיוחד, לרסס דגימות עם פתרון אקונומיקה ולהשאיר למשך לפחות 1 דקות, מעבר לפני קבלת אותם בתוך היחידה BSL-3. האדם עובר את הדגימה מ בחוץ, האדם המקבל, מחלץ את הדגימה בתוך מעבדה BSL-3 לא צריכה להיות זהה. לקבל את הדגימות ביחידה BSL-3 ולנקות אותם לפני הליך רישום ולקרוא צעדים. לרשום מדגם עם מערכת המבוססת על לוח אינטראקטיבי או מחשב נייד. לזהות מדגם עם הפרטים הבאים (עיין בסעיף 3.1.5). השתמש ברקודים עבור תיוג צינורות. אם ברקודים אינם זמינים, השתמש סמן עמידים לאלכוהול.הערה: מארק תמיד את הצנצנת עצמה, מעולם לא יכול לקבל החליף את כובע כזה במהלך הטיפול! מדגם aliquot ברגע מדגמים רשומים צינורות. היה רשום, למקם את הדגימות הכפפות מוסמך דרך המגש נעול אוויר כדי לאחזר את הדגימות בפנים תא הכפפות. סגור את הדלת. לאחר מכן לפתוח את הדלת השנייה דרך הכפפות כדי לאחזר את הדגימות. אל תפתח שתי הדלתות בעת ובעונה אחת. נפתחים ונסגרים כל דלת בשני שלבים שונים עבור אמצעי זהירות. הפעל את תאורת UV-C. ברגע הדגימות הועברו בביטחה הפנים הכפפות, בצע את הפעולות המתוארות בעבר ליצירת מדגם aliquots בקופסת הכפפות. ניתן להשתמש aliquot אחד של דגימה לבדיקה מיידית, האחרים יישמרו לצורך מטרת הפניה או שגוי. דגימות מגיעים עם ספוגית באף טיפ במדיום תחבורה ויראלי. לקחת דגימות ושים אחת לתוך כל מבחנה. מערבבים את הטיפ ספוגית האמצעי עבור 30 s ולסחוט אותו כנגד הצד של הבקבוקון לפני הסרתו של המדיום, להעלותו ולבערו ניצול פסולת פרוטוקול ותברואה (בהתאם למחוק, החיטוי או לתלות בתוך תמיסת כלור מטריים).הערה: הנפח הקטן ביותר של בינוני צריך להיות מאוחסן הוא 0.5 mL, שימוש המבחנות 1 מ”ל למטרה זו. לפיכך, ניתן לחלק מדגם 3 mL 6 aliquots (תת דגימות). השתמש טריים פיפטות סטרילי או חד פעמיות עבור כל דגימה וזורקים אותם כפסולת ותברואה. לאחר דגימות aliquoted, להעביר את הדגימות במכל אטום. סגור את צלוחיות עם הגנה ולהסיר תא הכפפות. תוך הכפפות, תסגור את התיק פסולת חומרים מסוכנים, להכין תיק פסולת חדש כדי למנוע זיהום לחצות. Decontaminate סביבת העבודה הכפפות של החלת אקונומיקה עבור 5 דקות ו- 70% אתנול פתרון אחר כך. לנצל את aliquot אחד לכל דגימה לצורך בדיקה באופן מיידי ולאחסן אחרים במקפיא ב-80 מעלות צלזיוס כפי דגימה בדרכי הנשימה. לאחר טיהור לשמור על אחד aliquot לבדיקה, להעביר כל הדגימות מתוך תא הכפפות לאחסון במקפיא-80 ° C. מיצוי וטיהור לאחר הטיהור, להעביר את aliquots מדגם לבר-קוד לצורך ניתוח ה-PCR של הדגימה טיפול באזור בחזרה לתוך תא הכפפות. בתא הכפפות, לבצע את כל השלבים פירוק תהליך החילוץ. להשתמש בערכה מיני RNA נגיפי לחילוץ של RNA דוגמאות על פי הוראות היצרן. בצע את ההוראות המפורטות עבור טיהור של RNA נגיפי על-ידי פרוטוקול ספין בהוראות היצרן. הכן את מספר הדגימות צורך מדחיסה. תווית 1.5 mL מיקרו צנטריפוגה צינורות עם מספרי ברקוד או מזהה ייחודי. להוסיף µL 560 המאגר פירוק µL 140 של המערבולת ולדגום את הדופק. תקופת דגירה של 10 דקות בטמפרטורת החדר.הערה: ההליך איון יכול להשתנות בהתאם לסוג הפתוגן BSL-3 זה הוא חילוץ, במקרים מסוימים השתקה של כרומוזום נוסף עשוי להיות נחוץ. לאחר השלב פירוק, בחוזקה לאטום את הפקקים על כל דגימה, למקם המעבר נשוף אוויר נעול (אם לצנטריפוגה ממוקם מחוץ הכפפות). העברת דגימות lysed לתוך ארון עד לתום ההליך אבטחה.הערה: הליך שאיבה וטיהור של RNA יכולה להסתיים בתא הכפפות או בקופסת הכפפות ואחריו ביולוגית הקבינט בהתאם הפתוגן BSL-3 והפרוטוקולים הנדרשים. הקפד decontaminate את סביבת העבודה ואספקה בתא הכפפות שוב באמצעות אקונומיקה, 70% אתנול פתרון כדי לנקות את כל האזורים נחשף בעבר אקונומיקה. בצע את השלבים במקטע 3.3.6 – 3.3.10 עבור כביסה ולטיהור הרנ א. לאחר החילוץ, להעביר את הדגימות חלון מעבר לניתוח ה-PCR. לאחר דגימות הוסר, הועבר, decontaminate את סביבת מעבדה בחוץ תא הכפפות, לפי סעיף 2. לפני הסרת עיקרון השוויון הפוליטי לחכות עד זרימת אוויר ביחידת הגיעה בבטחה את המספר הנכון של סינון מחזורים לפני שמתחילים להסיר את עיקרון השוויון הפוליטי. מיד אחרי הסרת סילוק כל עיקרון השוויון הפוליטי לתוך עיקרון השוויון הפוליטי פסולת מכולות, להמשיך לשטוף את הידיים עם מים וסבון במעבדה לפני היציאה היחידה, לפי סעיף 2. PCR-הגברה וזיהויהערה: הגברה PCR מתבצע באזור נפרד המיועד PCR ומחובר עם האזור הכפפות דרך חלון מעבר. סביבת העבודה ואת הציוד צריך להיות decontaminated לפני מבחן. להסיר את הדגימות RNA שחולצו מן החלון pass-through. לבצע הגברה PCR של היעד ויראלי באמצעות פרוטוקול ה-PCR של צעד אחד. להכין את תערובת הבסיס באמצעות תחל ספציפי ויראלי, רגשים, 2 x RT-PCR מאגר האנזים RT-PCR. להשתמש צינור 1.5 מ עם הרכיב הבא עבור כל assay יישוב: מים, תחל הגששים, מאגר x 2 ואת האנזים RT-PCR. מערבולת ולסחוט תערובת הבסיס. Aliquot תערובת הבסיס לתוך כל הצינורות רצועת. להחזיר את ערכת ה-PCR אחסון בטמפרטורה המומלץ ברגע תערובת הבסיס הוכן. להוסיף כל אחד הצינורות רצועת באמצעות טיפ נפרד בין כל שפופרת רצועת הדגימות בודדים. לסובב את הדגימה צלחת או צינורות-1,500 סל ד עבור 1 דקות. הדגימות מוכנים להיות טעון על גבי יחידת ה-PCR בזמן אמת. להעביר לצלחת עם דגימות מכשיר PCR ולהפעיל את המכונה בהתאם לתנאי הגברה היעד ויראלי. זה לוקח כ 90 דקות כדי להשלים סיבוב אחד. לפני איסוף התוצאות ולהשאיר את המעבדה, להסיר את עיקרון השוויון הפוליטי, מספקת decontaminate כל תחנת עבודה והכנה הבדיקה ‘ אבחון ‘ הבא, לפי סעיף 2. תחזוקה לאחר השימוש ציוד לבצע תחזוקה ומחזורי לאחר השימוש ציוד על-פי בטבלה 2.הערה: אנו צריכים אבחון הכולל הוא כ- 4 שעות. וזמן מיצוי PCR להגדיר זמן יכול להשתנות בהתאם למספר דוגמאות, הבדיקה ‘ אבחון ‘ יכול לקחת 4-5 שעות או יותר, בהתאמה.