Изоляции и приемных передачи высоких соли лечить антиген представляя дендритные клетки

Избыток пищевой соли является одним из основных факторов риска гипертонии. ^{1 , 2} американской ассоциации сердца рекомендует более 2300 миллиграммов (мг) потребления натрия (Na⁺) в день, однако; менее 10% населения США отмечает эту рекомендацию. ^{3 , 4} скромные сокращения потребления Na⁺ снизить кровяное давление и уменьшить ежегодный новых случаев ишемической болезни сердца и инсульта в США на 20%. ⁵ основная проблема избыточного потребления поваренной соли является, что 50% из населенности гипертонической exhibits соли чувствительность, определяется как 10 мм ртутного столба, увеличение артериального давления после загрузки Na⁺ или же падение артериального давления после Na⁺ ограничения и диурез. ⁶ соли чувствительность также происходит в 25% нормотензивной лиц и является независимым предиктором смерти и сердечно-сосудистых событий. ^{7 , 8} соли зондирования механизмов с участием почечной гипертонии хорошо изучены; Однако последние исследования показывают, что иммунные клетки могут смысле Na⁺. ^{9 , 10}

Последние данные свидетельствуют о том, что изменения в экстра почечной Na⁺ обработка может вызвать накопление Na⁺ в интерстиции и содействовать воспаления. ^{11 , 12} нашей лаборатории и другие показали, что клетки врожденная и адаптивного иммунитета способствовать обострению гипертонии. ^{9 , 13 , 14 , 15} различных гипертонической стимулы, включая ангиотензина II, норадреналина и соли причиной макрофагов, моноцитов и лимфоцитов T для проникновения в почках и сосудистую и поощрения удержания Na⁺ , сужение сосудов, кровяное давление Высота над уровнем моря и конец орган ущерб. ^{9 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20} в предыдущих исследований, мы обнаружили, что DCs накапливать isolevuglandin (IsoLG)-белок аддукты в ответ на различные стимулы гипертонический, включая ангиотензина II и дока соль гипертонии. ¹⁴ IsoLGs Высокореактивная продуктов перекисного окисления липидов, которые быстро и ковалентно аддукт с lysines белков и их накопление связан с активацией DC. ¹⁴ недавно мы установили, что повышенные Na⁺ является мощным стимулом для IsoLG белка аддукт формирования в мышиных, которую DCs.⁹ Na⁺ вступления в DCs опосредуется через Амилорид чувствительных перевозчиков. Na⁺ затем обменять на кальция (Ca^{2 +}) через ЦС^{2 +} обменник Na⁺. CA^{2 +} активирует протеинкиназы C (PKC) который активирует NADPH оксидаза, ведущих к увеличению супероксида (O₂^{· –}) и IsoLG белка аддукт формирования. ⁹ приемных передачи соли облученных DCs воспламеняет гипертензии в ответ к югу прессорных доза ангиотензина II. ⁹

Выявление CD11c⁺ РС из тканей ограничивалась ранее иммуногистохимии и RT-PCR и изоляции РС была ограничена ячейку Сортировка по проточной цитометрии. Хотя поток цитометрии сортировки клеток является мощный метод для изоляции иммунных клеток, он является дорогостоящим, требует много времени и приводит к низкой доходности жизнеспособных клеток. Таким образом, мы оптимизировали протокол шаг за шагом ткани пищеварение, в пробирке стимуляции и приемных передачи CD11c⁺ DCs для изучения гипертонии.