Extracción y análisis de propóleos verde Taiwan
Summary
Presentamos un protocolo para usar etanol como solvente para extraer y caracterizar propóleos verde Taiwan que exhibe actividad antibacteriana.
Abstract
Taiwan propóleos verde es rico en flavonoides, prenylated y exhibe una amplia gama de actividades biológicas, como antioxidante, antibacteriano y contra el cáncer. Los compuestos bioactivos de propóleos verde Taiwan son propolins, es decir, C, D, F y G. La concentración de propolins en el propóleos verde Taiwan varía dependiendo de la temporada y ubicación geográfica. Por lo tanto, es fundamental establecer un procedimiento estándar y repetible para determinar la calidad del propóleos verde Taiwan. Aquí, presentamos un protocolo que utiliza la extracción de etanol, cromatografía líquida de alto rendimiento y un análisis de la actividad antibacteriana para caracterizar la calidad del propóleos verde taiwanés. Este método indica que la extracción de etanol de 95% y 99.5% alcanzar las producciones de materia seca máximo de propóleos verde Taiwan, lo que las concentraciones más altas de propolins que tienen propiedades antibacterianas. Según estos resultados, el presente Protocolo se considera confiables y repetibles para determinar la calidad del propóleos verde Taiwan.
Introduction
El propóleos es una mezcla resinosa natural producida por la especie de abeja Apis mellifera. El propóleos ha sido ampliamente utilizado desde la antigüedad en medicina popular. Un estudio divulgado recientemente que el propóleos es beneficioso para la prevención de las infecciones microbianas e inflamación1. Numerosos estudios han demostrado que los principales compuestos bioactivos en el propóleos son flavonoides, ésteres de ácidos fenólicos, prenylated p-ácidos hidroxicinámico y diterpenic ácidos2,3. Hasta la fecha, se han identificado 10 prenylated flavanone derivados propoleo verde Taiwan mediante cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC)4,5,6,7. El más abundante entre ellos es propolins de5,C, D, F y G7. Los considerables efectos biológicos de propóleos verde Taiwan se correlacionan con su alto contenido de propolins8.
Las concentraciones de compuestos bioactivos en el propóleos varían mucho dependiendo de la temporada y ubicación geográfica de la cual se obtiene el propóleos. Propóleos Europeo contiene principalmente flavonoides aglicona y fenólicos ácidos9. Los principales compuestos bioactivos en el propóleos de Brasil son prenylated p-cumárico ácidos, tales como artepillin C10. Un estudio demostró que la estación es un factor crítico para determinar el contenido total propolin en taiwanés propóleos verde11. El contenido de propolin en propóleos verde Taiwan es más alta en verano (mayo – julio) y la más baja en invierno11. La propiedad antibacteriana del propóleos se ha considerado extensamente para ser un indicador de actividad biológica. Generalmente, las muestras de propóleos recolectados de diversas regiones han exhibido una propiedad antibacteriana similar; por ejemplo, es generalmente eficaz contra casi todas las bacterias Gram-positivas y exhibe un limitado efecto antibacterial contra bacterias Gram-negativas10,12,13. Interacciones sinérgicas entre los flavonoides en el propóleos fueron demostradas para tener un efecto antibacteriano14. Del mismo modo, propóleos verde Taiwan informó tener un efecto antimicrobiano contra bacterias Gram-positivas15. Además, un estudio también identificó un efecto antimicrobiano de las interacciones de la propolins en taiwanés propóleos verde8.
La caracterización de los compuestos bioactivos en el propóleos es difícil porque su composición química puede variar según su fuente de origen. Por lo tanto, es necesario establecer un método factible y repetible para determinar la calidad de lo propóleos verde Taiwan. Sin embargo, se ha establecido ningún procedimiento estándar para la extracción de propóleos verde taiwanés y posterior análisis funcional. Se han propuesto varios métodos que se aplican diversamente solventes orgánicos e inorgánicos para propóleos extracción16,17,18,19,20. Ya que el propóleos es una mezcla lipofílica, estudios han demostrado que la extracción orgánica es mejor que inorgánicos extracción8,18,19. La concentración total propolin en Taiwan propóleo verde y sus propiedades antibacterianas son indicadores de la calidad del propóleos verde Taiwan. Así, el propósito de este estudio es presentar un protocolo para uso de etanol como solvente para extraer y caracterizar las propiedades antibacterianas del propóleo verde Taiwan.
Protocol
Representative Results
Discussion
Un estudio informó que la maceración, utilizando diferentes concentraciones de etanol, podría ser utilizado para extracción de propóleo brasileño17; sin embargo, el proceso fue largo17. Tardó menos de 10 días para extraer los compuestos bioactivos, tales como contenido fenólico, de propóleo brasileño17. Alternativamente, la extracción de etanol en combinación con la calefacción a 37 ° C, 50 ° C o 70 ° C durante 30 min se ha propuesto…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este manuscrito fue editado por Wallace de edición académica.
Materials
| ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| Whatman no. 4 filter paper | Sigma-Aldrich | WHA1004125 | |
| methanol | Sigma-Aldrich | 34860 | |
| reverse phase RP-18 column | Phenomenex Inc. | 00G-0234-E0 | |
| Staphylococcus aureus | ATCC | BCRC 10780 | |
| Escherichia coli | ATCC | BCRC 10675 | |
| tryptic soy broth | Sigma-Aldrich | 22092 | |
| nutrient broth | Sigma-Aldrich | 70122 | |
| dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650 | |
| spice grinder | Waring | WSG60K | |
| microplate Reader | Molecular Devices | EMAX PLUS | |
| HPLC system | Agilent | 1200 Series | |
| vacuum evaporation | BÜCHI | Rotavapor R-215 |
Referencias
- Zabaiou, N., et al. Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product. Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).
- Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin. Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).
- Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).
- Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis. Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).
- Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources. Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).
- Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis. Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).
- Huang, W. J., et al. Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).
- Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis. Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).
- Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis. Zeitschrift für Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).
- Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity. Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).
- Chen, Y. W., et al. Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons. Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).
- Grange, J. M., Davey, R. W. Antibacterial properties of propolis (bee glue). Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).
- Kujumgiev, A., et al. Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins. Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).
- Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus. Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).
- Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan. Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).
- Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents. Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).
- Cunha, I. B. S., et al. Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts. Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).
- Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. Extraction properties of propolis with ethanol concentration. Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).
- Park, Y. K., Ikegaki, M. Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).
- Ramanauskienė, K., Inkėnienė, A. M. Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity. Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).
- Machado, B. A., et al. Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil. PLoS One. 11 (1), e0145954 (2016).
- Monroy, Y. M., et al. Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water. The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).
- Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan. Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).
- Chen, L. H., et al. Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet. Nutrients. 10 (4), e503 (2018).
