Extraktion und Analyse der taiwanesischen grünen Propolis
Summary
Wir präsentieren Ihnen ein Protokoll für die Verwendung von Ethanol als Lösungsmittel zu extrahieren und zu charakterisieren, taiwanesische grüne Propolis, das antibakteriellen Aktivität aufweist.
Abstract
Taiwanesische grüne Propolis ist reich an prenylierten Flavonoide und weist eine Vielzahl von biologischen Aktivitäten, wie z. B. antioxidative, antibakterielle, und Anti-Krebs. Die bioaktiven Substanzen der taiwanesischen grünen Propolis sind Propolins, C, D, F und G. Die Konzentration der Propolins im taiwanesischen grünen Propolis variiert je nach der Jahreszeit und der geografischen Lage. Daher ist es wichtig, ein standard und wiederholbare Verfahren zur Bestimmung der Qualität der taiwanesischen grünen Propolis zu etablieren. Hier präsentieren wir eine Protokoll, die Ethanol-basierte Extraktion, Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie und eine antibakterielle Aktivitätsanalyse verwendet, um die taiwanesische grüne Propolis Qualität charakterisieren. Diese Methode gibt an, dass 95 % und 99,5 % Ethanol Extraktionen die maximale Trockenmasse Erträge von taiwanesischen grüne Propolis erreichen, nachgiebig dabei die höchsten Konzentrationen an Propolins, die antibakterielle Eigenschaften haben. Nach diesen Erkenntnissen gilt dieses Protokolls zuverlässig und reproduzierbar zur Qualitätsbestimmung von taiwanesischen grünen Propolis.
Introduction
Propolis ist eine natürliche harzigen Mischung von Bienenarten Apis Melliferaproduziert. Propolis hat seit der Antike in der Folk-Medizin verbreitet. Eine Studie berichtete kürzlich, dass Propolis vorteilhaft zur Vorbeugung von mikrobiellen Infektionen und Entzündungen1. Zahlreiche Studien haben gezeigt, dass die wichtigsten bioaktiven Substanzen im Propolis Flavonoide, phenolische Acid Ester, prenylierten p sind-Cumarsäure Säuren und Diterpenic Säuren2,3. Bisher wurden 10 prenylierten Flavanone Derivate von taiwanesischen grünen Propolis durch Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC)4,5,6,7identifiziert. Die am häufigsten vorkommende unter diesen sind Propolins C, D, F und G5,7. Die erheblichen biologischen Wirkungen der taiwanesischen grünen Propolis korrelieren mit dem hohen Gehalt an Propolins8.
Die Konzentrationen von bioaktiven Substanzen im Propolis variieren stark je nach Saison und geographische Lage aus dem Propolis gewonnen wird. Europäische Propolis enthält hauptsächlich die Flavonoid Aglykon und phenolischen Säuren9. Die wichtigsten bioaktiven Substanzen im Propolis aus Brasilien sind prenylierten p-Cumarsäure Säuren, wie z. B. Artepillin C10. Eine Studie zeigte, dass die Saison ein entscheidender Faktor ist für die Bestimmung des insgesamt Propolin Inhalts in taiwanesischen grünen Propolis11. Der Propolin-Inhalt in taiwanesischen grünen Propolis ist höchste im Sommer (Mai – Juli) und niedrigsten im Winter11. Die antibakterielle Eigenschaft von Propolis gilt weithin als Indikator der biologischen Aktivität. Im allgemeinen zeigten die Proben von Propolis gesammelt aus verschiedenen Regionen eine ähnliche antibakterielle Eigenschaft; zum Beispiel, es ist in der Regel wirksam gegen fast alle Gram-positiven Bakterien und weist eine begrenzte antibakterielle Wirkung gegen Gram-negativen Bakterien10,12,13. Synergistische Wechselwirkungen zwischen der Flavonoide in Propolis wurden, haben eine antibakterielle Wirkung14demonstriert. In ähnlicher Weise wurde taiwanesischen grünen Propolis berichtet, eine antimikrobielle Wirkung gegen gram-positive Bakterien15haben. Eine Studie identifiziert darüber hinaus auch einen antimikrobiellen Wirkung aus den Wechselwirkungen von Propolins in Taiwan grüne Propolis8.
Die Charakterisierung von bioaktiven Substanzen im Propolis ist schwierig, da seine chemische Zusammensetzung nach der Quelle des Ursprungs variieren kann. Daher ist es notwendig, machbare und wiederholbare Methode zur Qualitätsbestimmung von der taiwanesischen grünen Propolis zu etablieren. Allerdings wurde kein Standardverfahren für die taiwanesische grüne Propolis Extraktion und anschließenden Funktionsanalyse gegründet. Mehrere Methoden, die verschiedentlich organische und anorganische Lösungsmittel gelten sind für Propolis Extraktion16,17,18,19,20vorgeschlagen worden. Da Propolis eine lipophile Mischung ist, haben Studien gezeigt, dass organische Extraktion besser als anorganische Extraktion8,18,19. Die totale Propolin-Konzentration im taiwanesischen grünen Propolis und seine antibakteriellen Eigenschaften sind wichtige Indikatoren für die Qualität der taiwanesischen grünen Propolis. So ist der Zweck dieser Studie, ein Protokoll für die Verwendung von Ethanol als Lösungsmittel zu extrahieren und zu charakterisieren die antibakteriellen Eigenschaften von taiwanesischen grünen Propolis zu präsentieren.
Protocol
Representative Results
Discussion
Eine Studie berichtet, dass Mazeration, mit verschiedenen Konzentrationen von Ethanol, für brasilianische Propolis Extraktion17verwendet werden könnte; Allerdings war der Prozess zeitaufwendig17. Es dauerte mindestens 10 Tage, die bioaktiven Verbindungen, wie z. B. phenolische Inhalte aus brasilianischen Propolis17zu extrahieren. Alternativ schlägt Ethanol Extraktion in Kombination mit Heizung bei 37 ° C, 50 ° C oder 70 ° C für 30 min für die…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dieses Manuskript wurde von Wallace wissenschaftliche Bearbeitung bearbeitet.
Materials
| ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| Whatman no. 4 filter paper | Sigma-Aldrich | WHA1004125 | |
| methanol | Sigma-Aldrich | 34860 | |
| reverse phase RP-18 column | Phenomenex Inc. | 00G-0234-E0 | |
| Staphylococcus aureus | ATCC | BCRC 10780 | |
| Escherichia coli | ATCC | BCRC 10675 | |
| tryptic soy broth | Sigma-Aldrich | 22092 | |
| nutrient broth | Sigma-Aldrich | 70122 | |
| dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650 | |
| spice grinder | Waring | WSG60K | |
| microplate Reader | Molecular Devices | EMAX PLUS | |
| HPLC system | Agilent | 1200 Series | |
| vacuum evaporation | BÜCHI | Rotavapor R-215 |
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