멀티플렉스 형광 Immunohistochemical 얼룩, 이미징, 및 림프 종 조직학 샘플 분석

림프 신생 세포의 억제 되지 않는 악성 확산에 의해 발생 합니다. 이 세포 면역 시스템의 중요 한 구성 요소 이며, 골 수, 림프절, 비장, 및 다른 점 막 관련 림프 시스템 등 기본 2 차 면역 기관에 지역화. 림프 신생 형태학, immunophenotype, 유전자 기능 및 임상 프레 젠 테이 션을 포함 하 여 특징의 별자리에 따라 분류는 누가 장애의 다른 유형의 그룹입니다. 각 매개 변수는 역할을, 하는 동안 혈통 정의 기능을 유지 하 고 인식 하는 B 세포, T 세포 및 자연적인 살인자 (NK) 세포¹에서 파생 된 신생 WHO 분류 시스템에 대 한 기초를 형성.

림프 종의 분류에 키 림프 톨²의 다양 한 하위의 백혈구 표면 표식에 대 한 항 체의 특성화 되었습니다. Immunohistochemistry (IHC) 전통적으로 이러한 마커 분석에 사용 되었습니다과 가벼운 현미경 ^{통해 구상 될 수 있다 세포 및 조직 기반 분자 검출에 특정 항 원-항 체 인식의 원리에 따라 그러나 3}. 기존의 밝은 필드 비 멀티플렉스 IHC에서 단일 슬라이드에 여러 목표물의 식별 한계가 있기 때문에 그것은 종종 단일 조직 섹션에 여러 개의 색상 신호를 안정적으로 구분 하기 어려운-특히 매우 낮은 식⁴의 항 원에 대 한 육안 평가 및 정량화 얼룩의 주관적, 분석 및 데이터 해석⁵에 변화를 일으키는 될 수 있습니다.

따라서, 기존의 IHC에 포 르 말린 조정의 파라핀 끼워 넣어진 (FFPE) 샘플은 림프 종 같은 면역학 다양 한 질병에 여러 목표물의 동시 검색 가능 합니다. 또한, 주변의 면역 세포에서 종양 약 세포를 구별 하지 않습니다 정확 하 게. 이 림프 종에 소설 biomarkers의 관련성을 보고 하는 연구를 방해. 이러한 맥락에서 다중 형광 IHC (mf-IHC) 제공 유망한 대안 항 coexpression의 양적 평가 허용 및 제한 보존 하는 동안 더 높은 정밀도로 공간 관계^6,7. 이 이미징 기술은 디지털 이미지 분석 소프트웨어와 제휴는 때 데이터 해석은 보다 효율적 및 종양과 microenvironment이^8,9의 연구를 용이 하 게 한다. 이 프로토콜에는 tyramide 기반 면역 형광 (IF) 다중화 방법 신호를 증폭 하는 적용 되 고 같은 종^5,7 에 개발도 그 어떤 호스트 종에서 어떤 IHC 검증 항 체와 호환 ^{, 10}. 1 차 및 이차 항 체는 여러 얼룩의 순차 응용 프로그램에 대 한 허용 하는 각 단계 후 박탈 될 수 있도록 관심의 조직에 fluorophore의 직접 활용에 대 한 tyramide 기반 프로토콜 허용 항 체 분 없이.

멀티플렉스 전략 목표 및 림프 종에서 그들의 변종 면역학 패턴을 식별 하 여 예 후와 치료 결과 예측 하는 데 유용 있을 것입니다. IHC T와 B 림프 구 마커 및 angioimmunoblastic T-세포 림프 종 (AITL)에서 T-follicular 도우미 마커 패널의 연구에 대 한 우리의 실험실에 적용 된 다중 형광 주변 T 세포 림프 종의 하위 공격적으로 임상 특징 동작 및 종양이¹¹. 이 방법의 유틸리티는 또한 확산 큰 B-세포 림프 종 (DLBCL) 어디 Bruton의 티로신 키 니 아 제 억제의 잠재적인 치료 사용 제안 동시 C-MYC 및 BCL-2 식을 B 세포 수용 체의 신호 증가에 나와 있는 ¹² .

여기 우리는 적절 한 컨트롤 조직 선택 항 체 유효성 검사에서 전체 프로토콜 설명 및 림프 FFPE를 사용 하 여 멀티플렉싱 조직, 스캔을 사용 하 여 스테인드 슬라이드의 최종 분석 자동화 양적 병리학 이미징 시스템입니다.