Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) является лечебный метод предложил для лечения психических заболеваний. Животную модель имеет важное значение для понимания конкретных биологические изменения, вызываемые ЦТД. Этот протокол описывает модель мыши ЦТД, использующая хронически имплантированных электродов.
Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) является методом неинвазивной neuromodulation, предложил в качестве альтернативного или дополнительного лечения для нескольких психоневрологических заболеваний. Биологические эффекты ЦТД полностью не поняты, которые отчасти объясняется из-за трудностей в получении ткани человеческого мозга. Этот протокол описывает модель мыши ЦТД, использующая хронически имплантированных электродов, позволяя изучение долгосрочных биологических эффектов ЦТД. В этой экспериментальной модели ЦТД изменения экспрессии генов корковых и предлагает выдающийся вклад в понимание обоснование для терапевтического использования.
Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) является неинвазивным, лоу кост, терапевтический метод, который фокусируется на нейрональных модуляция с помощью малой интенсивности непрерывное токов1. Есть в настоящее время двух установок (одна и cathodal) для ЦТД. Хотя одна стимуляция оказывает текущее электрическое поле слишком слабы, чтобы вызвать потенциалы действия, электрофизиологии исследования показали, что этот метод производит изменения в синаптической пластичности2. Например доказательств показывает, что ЦТД индуцирует долгосрочные потенцирование (LTP) эффекты, такие как увеличение пиковых амплитудно возбуждающих постсинаптических потенциалов3,4 и модуляции корковой возбудимости5.
И наоборот cathodal стимуляция вызывает ингибирование, что приводит к мембране гиперполяризации6. Гипотеза для этого механизма на основе физиологических выводов, где описывается ЦТД для модуляции частоты потенциал действия и продолжительности в нейрональных тела3. В частности этот эффект не напрямую вызывают потенциалы действия, хотя он может перейти порог деполяризации и содействовать или препятствовать нейронов стрельбы7. Эти контрастных эффекты мы продемонстрировали ранее. Например одна и cathodal стимуляции противоположные последствия условных реакций зарегистрировано активности через электромиографии в кроликов8. Однако исследования также показали, что пролонгированной стимуляции одна сессий может привести к снижению возбудимости увеличение cathodal токи могут привести к возбудимости, представляя самостоятельно контрастных эффекты3.
Как одна, так и cathodal стимулам агрегирования использование электродных пар. Например одна стимуляции, «активный» или «анод» электрода помещается над областью мозга для модуляции, тогда как «ссылка» или «катод» электрод расположен над регионом, где эффект тока предполагается незначительное9. В cathodal стимуляции перевернут расположения электродов. Интенсивность стимуляции для эффективного ЦТД зависит от текущей интенсивности и электрода аспекты, которые затрагивают электрического поля по-разному10. В наиболее опубликованных исследований, средняя интенсивность тока составляет 0,10 до 2.0 мА и 0,1 мА до 0,8 мА для человека и мышей, соответственно6,11. Хотя электродов размером 35 см2 обычно используется в организме человека, отсутствует надлежащее понимание относительно размеров электродов для грызунов и более тщательное расследование является необходимой6.
ЦТД было предложено в клинических исследованиях с попыткой предоставления альтернативного или дополнительного лечения для нескольких неврологических и нервно-психических расстройств11 таких как эпилепсия12, биполярное расстройство13, ход5 , майор14депрессии, болезни Альцгеймера15, рассеянный склероз16 и болезнь Паркинсона17. Несмотря на растущий интерес к ЦТД и его использование в клинических испытаний, подробные сотовых и молекулярных вызвали изменения в ткани мозга, короткие и долгосрочные последствия, а также поведенческих результатов, являются еще более глубоко быть расследовано18, 19. Поскольку прямой человека подход к тщательно изучить ЦТД не является жизнеспособным, использование ЦТД животной модели могут предложить ценную информацию в клеточном и молекулярном события, лежащие в основе терапевтические механизмы ЦТД благодаря доступности для ткани головного мозга животного.
Имеющиеся данные ограничены относительно ЦТД моделей мышей. Большинство сообщенных моделей используются различные разработке макетов, электрод размеры и материалы. Например, Винклер и др. (2017) имплантированных головы электрода (Ag/AgCl, 4 мм в диаметре), наполненный соленой и зафиксировал его череп с акриловой цемента и винты20. Отличается от нашего подхода, их груди электрод был имплантирован (платины, 20 x 1,5 мм). Nasehi и др. (2017) используется процедура очень похож на наш, хотя грудной электрод был сделан из солевых пропитанной губкой (углерода заполнены, 9,5 см2)21. Другое исследование имплантированных обоих электродов в голову животного, которое было достигнуто с помощью фиксированной пластин и охватывающих голова животного с дирижером гидрогеля22. Здесь мы описываем ЦТД мыши модель, которая использует хронически имплантированных электродов через простой хирургических процедур и ЦТД установки (рис. 1).
В последние годы нейростимуляция методы ввода клинической практике как перспективный процедура для лечения нервно-психиатрическими расстройствами23. Чтобы уменьшить ограничения, налагаемые отсутствие знаний о механизмах нейростимуляция, мы представили здесь модель мыш…
The authors have nothing to disclose.
Мы благодарим г-н Родриго де Соуза за помощь в поддержании мыши колоний. L.A.V.M-Докторантура научный накидки. Эта работа была поддержана Грант PRONEX (FAPEMIG: APQ-00476-14).
BD Ultra-Fine 50U Syringe | BD | 10033430026 | For intraperitonially injection. |
Shaver (Philips Multigroom) | Philips (Brazil) | QG3340/16 | For surgical site trimming. |
Surgical Equipment | |||
Model 940 Small Animal Stereotaxic Instrument with Digital Display Console | KOPF | 940 | For animal surgical restriction and positioning. |
Model 922 Non-Rupture 60 Degree Tip Ear Bars | KOPF | 922 | For animal surgical restriction and positioning. |
Cannula Holder | KOPF | 1766-AP | For implant positioning. |
Precision Stereo Zoom Binocular Microscope (III) on Boom Stand | WPI | PZMIII-BS | For bregma localization and implant positioning. |
Temperature Control System Model | KOPF | TCAT-2LV | For animal thermal control. |
Cold Light Source | WPI | WA-12633 | For focal brightness |
Tabletop Laboratory Animal Anesthesia System with Scavenging | VetEquip | 901820 | For isoflurane delivery and safety. |
VaporGuard Activated Charcoal Adsorption Filter | VetEquip | 931401 | Delivery system safety measures. |
Model 923-B Mouse Gas Anesthesia Head Holder | KOPF | 923-B | For animal restriction and O2 and isoflurane delivery. |
Oxygen regulator, E-cylinder | VetEquip | 901305 | For O2 regulation and delivery. |
Oxygen hose – green | VetEquip | 931503 | For O2 and isoflurane delivery. |
Infrared Sterilizer 800 ºC | Marconi | MA1201 | For instrument sterilization. |
Surgical Instruments | |||
Fine Scissors – ToughCut | Fine Science Tools | 14058-11 | For incision. |
Surgical Hooks | INJEX | 1636 | In House Fabricated – Used to clear the surgical site from skin and fur. |
Standard Tweezers or Forceps | – | – | For skin grasping. |
Surgical Consumables | |||
Vetbond | 3M | SC-361931 | For incision closing. |
Cement and Catalyzer KIT (Duralay) | Reliance | 2OZ | For implant fixation. |
Sterile Cotton Swabs (Autoclaved) | JnJ | 75U | For surgical site antisepsis. |
24 Well Plate (Tissue Culture Plate) | SARSTEDT | 831,836 | For cement preparation. |
Application Brush | parkell | S286 | For cement mixing and application. |
Pharmaceutics | |||
Xylazin (ANASEDAN 2%) | Ceva Pharmaceutical (Brazil) | P10160 | For anesthesia induction. |
Ketamine (DOPALEN 10%) | Ceva Pharmaceutical (Brazil) | P30101 | For anesthesia induction. |
Isoflurane (100%) | Cristália (Brazil) | 100ML | For anesthesia maintenance. |
Lidocaine (XYLESTESIN 5%) | Cristal Pharma | – | For post-surgical care. |
Ketoprofen (PROFENID 100 mg) | Sanofi Aventis | 20ML | For post-surgical care. |
Ringer's Lactate Solution | SANOBIOL LAB | ############ | For post-surgical care. |
TobraDex (Dexamethasone 1 mg/g) | Alcon | 631 | For eye lubrification and protection. |
Stimulation | |||
Animal Transcranial Stimulator | Soterix Medical | 2100 | For current generation. |
Pin-type electrode Holder (Cylindrical Holder Base) | Soterix Medical | 2100 | Electrode support (Implant). |
Pin-type electrode (Ag/AgCl) | Soterix Medical | 2100 | For current delivery (electrode). |
Pin-type electrode cap | Soterix Medical | 2100 | For implant protection. |
Body Electrode (Ag/AgCl Coated) | Soterix Medical | 2100 | For current delivery (electrode). |
Saline Solution (0.9%) | FarmaX | ############ | Conducting medium for current delivery. |
Standard Tweezers or Forceps | – | – | For tDCS setup. |
Real Time Polymerase Chain Reaction | |||
BioRad CFX96 Real Time System | BioRad | C1000 | For qPCR |
SsoAdvancedTM Universal SYBR Green Supermix (5 X 1mL) | BioRad | 1725271 | For qPCR |
Hard Shell PCR Plates PCT COM 50 p/ CFX96 | BioRad | HSP9601 | For qPCR |
Microseal "B" seal pct c/ 100 | BioRad | MSB1001 | For qPCR |