Vivo에서 Microdialysis 메서드를 잘라 높은 분자 무게와 뇌 간 질 성 액체에서 큰 Extracellular 단백질을 수집 조사

ISF 총 두뇌 양의 15-20%를 구성 하 고 신호 변환, 기판 운송 및 폐기물 허가¹에 대 한 중요 한 microenvironment를 제공 합니다. 따라서, 살아있는 동물에서 ISF 수집 능력 질병 메커니즘 뿐만 아니라 다양 한 생물 학적 과정에 대 한 큰 의미를 제공 합니다. Vivo에서 microdialysis 몇 가지 방법 중 하나는 샘플 및 계량 extracellular 분자 ISF에서 깨어에서 자유롭게 이동 하는 동물 이며 신경 과학 연구 분야^2,3에 유용한 도구 역할을 그로 인하여. 이 방법에서는, 반 투과성 막으로 microdialysis 프로브는 두뇌에 삽입 되 고 상대적으로 느린 흐름 속도에서 관류 버퍼와 함께 끼얹는다 (0.1-5 µ L/min). 이 관류 동안 ISF에 extracellular 분자 수 동적으로 농도 기온 변화도 따라 프로브로 확산 하 고 있는 dialysate로 수집 합니다. 이 문서에서는 샘플 두뇌에 ISF에 방법, 원리와 방법을 모두 적용할 수 있습니다 다른 기관에 적절 한 수정에 의해 필요한 경우.

Microdialysis 처음 고용 되었다 1960 년대 그리고 이후 수집 등 아미노산 신경 전달 물질 두뇌에서 작은 분자를 광범위 하 게 사용 되었습니다. 그러나, 차단 막 (100 kDa-3 MDa)는 높은 분자 무게 microdialysis 프로브의 최근 상업적인 가용성 확장 뿐만 아니라^{4,,56 ISF에 상대적으로 더 큰 단백질에의 응용 7}. 이 프로브를 사용 하 여 연구 발견을 주도하 고 있다 그 단백질 등 타우 α-synuclein 오래 있을 생각 했다 독점 세포질은 또한 순수 ISF^4,,58에 존재.

Microdialysis 프로브를 사용 하 여 큰 차단 막 (일반적으로 1000 kDa)와 어려움 중 하나는 내부 압력 프로브에 축적 한 유체 손실에 더 취약 하는 것입니다. Microdialysis 프로브는 여기에 사용 되는이 문제를 방지 하려면 독특한 구조가. 압력 것입니다 하지 쌓아이 구조 때문에, 따라서 이러한 프로브 microdialysis perfuse (= push) 프로브 및 프로브 콘센트에서 dialysate 오는 수집 롤러/연동 펌프에 주사기 펌프를 사용 하 여 “푸시-풀” 모드에서 작동 해야 (= 풀) ⁹ (푸시와 풀 펌프, 압력 프로브에 환기 구멍을 취소 해야 하는 있지만 시스템은 기술적으로 구동 풀 펌프에 의해). 이 문서는 가이드 정 맥 주입의 stereotaxic 수술으로 시작 하 고 1000 kDa 차단 막과 microdialysis 프로브를 통해 ISF를 수집 하기 위해 microdialysis 라인을 설정 하는 방법에 설명 합니다.