Один Sensillum записей для саранчи Palp членистоногих Basiconica
Summary
Этот документ описывает подробный и очень эффективный протокол для записи одного sensillum из сенсилл basiconica на щупальцы насекомых ротовые органы.
Abstract
Щупальцы саранчи ротовые, считаются обычными вкусовые органов, которые играют важную роль в выборе пищи саранчи, особенно для обнаружения энергонезависимой химические сигналы через членистоногих chaetica (ранее именовавшаяся терминала членистоногих или Хохлатый сенсилл). Есть теперь больше свидетельств того, что эти щупальцы также имеют функцию обоняния. Одорант рецептор (LmigOR2) и одоранта связывающий белок (LmigOBP1) локализованных версий в нейроны и аксессуаров клетки, соответственно, в сенсилл basiconica щупальцы. Один sensillum запись (ССР) используется для записи ответов нейронов рецепторов одоранта, который является эффективным методом для отбора активных лигандов на конкретных одоранта рецепторы. ССР используется в функциональных исследований одоранта рецепторов в palp членистоногих. Структура сенсилл basiconica, расположенный на купол щупальцы несколько отличается от структуры на антенн. Таким образом при выполнении ССР, вызвал отдушки, некоторые конкретные советы могут быть полезны для получения оптимальных результатов. В этом документе представил подробный и очень эффективный протокол для ССР от насекомых palp членистоногих basiconica.
Introduction
Животные эволюционировали широкий спектр влагалище органов, которые чувствуют экзогенных химических сигналов. У насекомых наиболее важным влагалище органы являются усики и щупальцы. На эти органы несколько видов влагалище волосы, называется влагалище членистоногих, иннервируются влагалище нейронов (ДНС) в пределах волоски. ДНС в влагалище членистоногих признать конкретные химические сигналы через сигнала от химических раздражителей электрические потенциалы, которые затем передаются до центральной нервной системы,12,3 .
ДНС выразить различные влагалище рецепторов [например, одорант рецепторов (СПР)], ИОНОТРОПНЫХ рецепторы (IRs) и вкусовые рецепторы (гр) на их мембраны, которые кодируют экзогенных химические сигналы, связанные с различными типами chemosensation 45,,6. Характеристика ДНС является ключом к прояснению молекулярных и клеточных механизмов насекомых chemoreception. Теперь один sensillum запись (ССР) является широко используется техника для характеристика насекомых ДНС в усиков членистоногих многих насекомых, включая мух7,8месяцев, жуки9, тли10,11саранчи, и Муравьи12. Однако, несколько исследований применили ССР насекомых щупальцы13,14,,1516,17, потому что сделать конкретные структуры их членистоногих Электрофизиологические запись трудно18.
Стаи саранчи (прямокрылые) часто вызывают серьезные урожая ущерба и экономических потерь19. Считается, что щупальцы играть важную роль в выборе пищи саранчи20,21,,2223,24. Два типа влагалище членистоногих расследуются сканирующего электронного микроскопа (SEM). Обычно на каждом купол саранчи щупальцы18наблюдаются 350 сенсилл chaetica и 7-8 сенсилл basiconica. Сенсилл chaetica являются вкусовые членистоногих, которые чувствуют энергонезависимой химические сигналы, тогда как сенсилл basiconica имеют функцию обоняния, зондирования летучие химические сигналы.
На саранчи щупальцы, диаметры разъемам волос сенсилл basiconica (ОК. 12 мкм), гораздо больше, чем те из сенсилл chaetica (ОК. 8 мкм)18,25. Кутикулярного стена сенсилл basiconica на щупальцы гораздо толще, чем усиков членистоногих18. Кроме того купол palp имеет жидкости содержимое в пределах очень гибкий кутикулы. Эти характеристики означают, что проникновение с микроэлектродные и приобретения хороших электрофизиологических сигналов является более сложным, чем для усиков членистоногих. В этом документе представлен подробный и очень эффективный протокол ССР для саранчи palp членистоногих basiconica с видео.
Protocol
Representative Results
Discussion
Насекомых полагаются на щупальцы обнаружить запахи пищи, и считается, что их щупальцы играть важную роль в видообразования13,27. Щупальцы являются простые органы обоняния и получают все большее внимание как привлекательная модель для изучения neuromolecular сет…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Работа выполнена при поддержке гранта от Фонда национального естественных наук Китая (No.31472037). Любое упоминание о торговых наименований или коммерческих продуктов в этой статье исключительно с целью предоставления конкретной информации и не подразумевает рекомендацию.
Materials
| Tungsten wire | ADVENT | W559504 | Used for making the electrode and fixing the palp |
| NaNO2 | Sigma-aldrich | 563218-25G | Used for sharpening the tungsten wire |
| AC Power Supply | Syntech | A2-70 | Providing the voltage in sharpening the tungsten wire |
| Stereoscope | Motic | SMZ-163 | Used for observing the sharpening of tungsten wire |
| Microscope | Olympus | W-51 | Used for observing the sensilla on locust maxillary palp |
| Intelligent Data Acquisition Controller | Syntech | IDAC-4 | Real-time on screen display of all signals before and during recording |
| Stimulus controller | Syntech | CS-55 | Used for controlling the stimulus application |
| Electronic micromanipulator | C.M.D.T | CFT-8301D | Used for minor movement of the recording electrode |
| Micromanipulator | Narishige | MN-151 | Used for minor movement of the reference electrode |
| Speaker | EDIFIER | R101T06 | Connected with IDAC-4 and providing sound for the signal |
| Magnetic base | PDOK | PD-101 | Used to hold the electrode, and stimulus delivery tube |
| Vibration Isolation Table | TianHe | HAP-100-1208 | Used for isolating the vibration from the equipment |
| Glass slide | CITOGLAS | ZBP-407 | Used for making the base for the MPH |
| Blu-tack | Bostik | Blu-tack-45g | Fixing the tungsten wire |
| Pasteur tube | YARE | WITEG | Placing the filter paper containing stimuli solutions |
Referencias
- Carey, A. F., Carlson, J. R. Insect olfaction from model systems to disease control. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (32), 12987-12995 (2011).
- Leal, W. S. Odorant reception in insects: roles of receptors, binding proteins, and degrading enzymes. Annual Review of Entomology. 58, 373-391 (2013).
- Zhang, J., Walker, W. B., Wang, G. Pheromone reception in moths: from molecules to behaviors. Progress in Molecular Biology and Translational Science. 130, 109-128 (2015).
- Vosshall, L. B., Amrein, H., Morozov, P. S., Rzhetsky, A., Axel, R. A spatial map of olfactory receptor expression in the Drosophila antenna. Cell. 96 (5), 725-736 (1999).
- Benton, R., Vannice, K. S., Gomez-Diaz, C., Vosshall, L. B. Variant ionotropic glutamate receptors as chemosensory receptors in Drosophila. Cell. 136 (1), 149-162 (2009).
- Vosshall, L. B., Stocker, R. F. Molecular architecture of smell and taste in Drosophila. Annual Review of Neuroscience. 30, 505-533 (2007).
- de Bruyne, M., Foster, K., Carlson, J. R. Odor coding in the Drosophila antenna. Neuron. 30, 537-552 (2001).
- Roelofs, W., et al. Sex pheromone production and perception in European corn borer moths is determined by both autosomal and sex-linked genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 84 (21), 7585-7589 (1987).
- Larsson, M. C., Leal, W. S., Hansson, B. S. Olfactory receptor neurons detecting plant odours and male volatiles in Anomala cuprea beetles (Coleoptera: Scarabaeidae). Journal of Insect Physiology. 47 (9), 1065-1076 (2001).
- Zhang, R., et al. Molecular basis of alarm pheromone detection in aphids. Current Biology. 27 (1), 55-61 (2017).
- Cui, X., Wu, C., Zhang, L. Electrophysiological response patterns of 16 olfactory neurons from the trichoid sensilla to odorant from fecal volatiles in the locust, Locusta migratoria manilensis. Archives of Insect Biochemistry and Physiology. 77 (2), 45-57 (2011).
- Sharma, K. R., et al. Cuticular hydrocarbon pheromones for social behavior and their coding in the ant antenna. Cell Reports. 12 (8), 1261-1271 (2015).
- de Bruyne, M., Clyne, P. J., Carlson, J. R. Odor coding in a model olfactory organ: the Drosophila maxillary palp. Journal of Neuroscience. 19 (11), 4520-4532 (1999).
- Syed, Z., Leal, W. S. Maxillary palps are broad spectrum odorant detectors in Culex quinquefasciatus. Chemical Senses. 32 (8), 727-738 (2007).
- Lu, T., et al. Odor coding in the maxillary palp of the malaria vector mosquito Anopheles gambiae. Current Biology. 17 (18), 1533-1544 (2007).
- Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. Single sensillum recordings in the insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae. Journal of Visualized Experiments. 36, e1725 (2010).
- Grant, A. J., Wigton, B. E., Aghajanian, J. G., O’Connell, R. J. Electrophysiological responses of receptor neurons in mosquito maxillary palp sensilla to carbon dioxide. Journal of Comparative Physiology A. 177 (4), 389-396 (1995).
- Blaney, W. The ultrastructure of an olfactory sensillum on the maxillary palps of Locusta migratoria (L.). Cell and Tissue Research. 184 (3), 397-409 (1977).
- Hassanali, A., Njagi, P. G. N., Bashir, M. O. Chemical ecology of locusts and related acridids. Annual Review of Entomology. 50, 223-245 (2005).
- Chapman, R. F. Contact chemoreception in feeding by phytophagous insects. Annual Review of Entomology. 48, 455-484 (2003).
- Chapman, R. F., Sword, G. The importance of palpation in food selection by a polyphagous grasshopper (Orthoptera: Acrididae). Journal of Insect Behavior. 6, 79-91 (1993).
- Winstanley, C., Blaney, W. Chemosensory mechanisms of locusts in relation to feeding. Entomologia Experimentalis et Applicata. 24, 750-758 (1978).
- Blaney, W., Duckett, A. The significance of palpation by the maxillary palps of Locusta migratoria (L.): an electrophysiological and behavioural study. Journal of Experimental Biology. 63, 701-712 (1975).
- Blaney, W. Electrophysiological responses of the terminal sensilla on the maxillary palps of Locusta migratoria (L.) to some electrolytes and non-electrolytes. Journal of Experimental Biology. 60, 275-293 (1974).
- Jin, X., Zhang, S., Zhang, L. Expression of odorant-binding and chemosensory proteins and spatial map of chemosensilla on labial palps of Locusta migratoria (Orthoptera: Acrididae). Anthropod Structure & Development. 35 (1), 47-56 (2006).
- Zhang, L., Li, H., Zhang, L. Two olfactory pathways to detect aldehydes on locust mouthpart. International Journal of Biological Sciences. 13 (6), 759-771 (2017).
- Dweck, H. K. M., et al. Olfactory channels associated with the Drosophila maxillary palp mediate short- and long-range attraction. eLife. 5, e14925 (2016).
- Bohbot, J. D., Sparks, J. T., Dickens, J. C. The maxillary palp of Aedes aegypti, a model of multisensory Integration. Insect Biochemistry and Molecular Biology. 48, 29-39 (2014).
- Delventhal, R., Kiely, A., Carlson, J. R. Electrophysiological recording from Drosophila labellar taste sensilla. Journal of Visualized Experiments. 84, e51355 (2014).
- Ng, R., Lin, H. H., Wang, J. W., Su, C. Y. Electrophysiological recording from Drosophila trichoid sensilla in response to odorants of low volatility. Journal of Visualized Experiments. 125, e56147 (2017).
- Syed, Z., Leal, W. S. Electrophysiological measurements from a moth olfactory system. Journal of Visualized Experiments. 49, e2489 (2011).
- Saha, D., Leong, K., Katta, N., Raman, B. Multi-unit recording methods to characterize neural activity in the locust (Schistocerca Americana) olfactory circuits. Journal of Visualized Experiments. 71, e50139 (2013).
- Liu, F., Liu, N. Using single sensillum recording to detect olfactory neuron responses of bed bugs to semiochemicals. Journal of Visualized Experiments. 107, e53337 (2016).
