والهدف العام لهذه الإجراءات هو إنشاء وصيانة وتحديث عدد سكانها اريستاليس تيناكس الأسير في إعداد بحوث.
مع ما يقدر 6000 أنواع في جميع أنحاء العالم، هوفيرفليس بأهمية إيكولوجيا الملقحات بديلة لنحل العسل المدجنة. ومع ذلك، وأيضا نموذج علمية مفيدة لدراسة ديناميات الحركة الرؤية والطيران في بيئة مختبرية تحت التحكم. كما وضع اليرقات في المياه الملوثة عضويا، ونماذج مفيدة للتحقيق في الاستثمار في حصانة الميكروبية. بينما تحدث تربية تجارية واسعة النطاق للزراعة أصلاً، هناك لا يوجد أية بروتوكولات موحدة للحفاظ على السكان في الأسر للدراسات العلمية. هذا أمر مهم كبرامج التربية في الأسر التجارية مع التركيز على وسائل الإنتاج أثناء التلقيح ذروة فترات قد تفشل في توفير عدد سكان متسقة ومستقرة وقوية طوال العام، كما هو مطلوب في كثير من الأحيان لأغراض بحثية أخرى. ولذلك، مطلوب أسلوب إنشاء وصيانة وتحديث عدد سكانها أسيرة لبحث. وهنا يصف لنا الاستفادة من دورة الإسبات اصطناعية، بالإضافة إلى متطلبات التغذية والإسكان، لصيانة طويلة الأجل من اريستاليس تيناكس. باستخدام هذه الأساليب، ونحن زيادة كبيرة بالصحة وطول العمر للسكان في الأسر من هاء-تيناكس مقارنة بالتقارير السابقة. وعلاوة على ذلك نحن نناقش أساليب تربية صغيرة الحجم، والخيارات المتاحة لتحسين الغلات والتلاعب بالتركيبة السكانية.
تبرز كنماذج مفيدة للتحقيق في مجموعة من المسائل العلمية، بما في ذلك الطيران السلوك1، الآليات العصبية الكامنة وراء اقتراح الرؤية2، التلقيح الكفاءة3،4، هوفيرفليس 5 , 6 و7من الحصانة الميكروبية. ومع ذلك، خلافا لبعض نماذج ديبتيران الأخرى، مثل المورفولوجية8، هناك لا بروتوكولات موحدة لمختبر تربية هوفيرفليس لاستخدامها في البحوث العلمية. وفي الواقع، حتى ولو الأدب الحالي وصف أساليب لتربية هوفيرفلي اريستاليس تيناكس، العديد من هذه توضع لزراعة جماعية هوفيرفليس لتلقيح المحاصيل، التدهور الحيوي من النفايات العضوية، أو الدراسات التشريحية 9 , 10 , 11-وهكذا، أنها لا تعالج الحاجة بروتوكول سهلة توفر إمدادات صحية هوفيرفليس قوية، متسقة مع الحفاظ على اللياقة البدنية الوراثية للسكان.
وعقب النحل والنحل، هوفيرفليس واحدة من أهم البرية، اختصاصي الملقحات المجموعات12،13. وهناك حوالي 6000 هوفيرفلي الأنواع في العالم14،15، مع أكثر من 300 من الأنواع في 75 جنسا في السويد16 وأكثر من 300 في أجناس 69 في الهند17،،من1819. على سبيل المثال، يتم العثور على البرتقال زراعياً هاما هوفيرفلي بالتيتوس ابيسيرفوس وتطير بدون طيار، اريستاليس تيناكس، الذي نركز هنا، عبر أوروبا وأمريكا وآسيا6،16، 17،،من1819،20،21،،من2223،24،25. هوفيرفليس ليست على قدم المساواة نشطة طوال العام، ولا طوال اليوم. في الواقع، ليس فقط في الموسم، والوقت من اليوم، وإنما أيضا التقلبات في كثافة الضوء، درجة الحرارة والرطوبة وسرعة الرياح، تؤثر على أنماط النشاط هوفيرفليس26،27. في الحقل، ويمكن الاطلاع على اريستاليس في أي وقت من السنة في مناخ البحر الأبيض المتوسط11، ولكن إعداد هوفيرفليس النشطة أقل بكثير في فصل الشتاء. على العكس من ذلك في المناخات المعتدلة الباردة، اريستاليس السبات خلال فصل الشتاء، ولم يتم العثور على التصرف بنشاط في الميدان من جميع أنحاء أكتوبر خلال إلى28آذار/مارس.
ويمكن جمع تحلق بحرية هوفيرفليس قبل المعاوضة في الميدان. وفي الواقع، في المناخات المعتدلة فهي موجودة في وفرة أكبر في منتصف صباح مساء، وعلى تهدئة الأيام المشمسة، وفي نهاية الصيف وخلال الخريف26،27. وبدلاً من ذلك، تنضج اليرقات تيناكس هاء ، الثانية أو الطور الثالث، يمكن تحديدها وتحصد من المتحللة المواد العضوية، مثل السماد أكوام أو تيارات الملوثة عضويا10،11. والواقع أن تقنيات المنشورة لمختبر تربية تيناكس هاء- تستند تربية اليرقات في المياه الملوثة عضويا، أما عن طريق بعض أشكال هذه المسألة الخضري أو البراز9،10،29، 30 , 31 , 32 , 33-ومع ذلك، محدود بموسم جمع اليرقات، وليست سوى أداة جمع قابلة للاستمرار من أواخر الربيع إلى بداية الخريف11. وعلاوة على ذلك، وفرة اليرقات تتأثر أنماط الطقس المحلي، كما يمكن أن تؤثر التغيرات في درجة الحرارة المحيطة حدوث أوفيبوسيشن والتنمية اليرقات معدلات9،28.
ولذلك، هناك حاجة إلى استراتيجيات المحافظة على مخزون صحي من هوفيرفليس بتربية اليرقات والبيض داخل المختبر لضمان أن تجري تجارب على مدار السنة، بغض النظر عن الموسم أو الأحوال الجوية المحلية. الأهم من ذلك، يولد الأسلوب الموصوفة هنا هوفيرفليس من الإناث تزاوج البرية فقط. وهذا مهم كدراسة بالفرنسية, et al. وجدت 10 التنوع الوراثي لمختبر تربيتها سكان هوفيرفليس، أصلاً المنشأة من 120 اليرقات الناضجة، فقدت سريعاً. ولذلك اقترحت أن الحفاظ على التنوع الوراثي في المستعمرات التي ستستخدم لأغراض التلقيح المحاصيل التجارية، هذه الحاجة إلى تجديد، أو تماما حتى أعادت، مع الأفراد الميدانية التي جمعت كل ربيع10.
عند العمل في الرؤية، أو الحواس الأخرى المستخدمة في فترة الخطوبة والتزاوج، نوصي وبالتالي المحافظة على التنوع الوراثي، أما بإعادة إنشاء المستعمرة أو بتجديد المستعمرة مع الحقول التي تم جمعها من الأفراد، بشكل منتظم. وهذا أمر مهم الانتقاء الجنسي يؤثر الانجراف الجينية للسكان. وفي الواقع، في هوفيرفليس البرية، الذكور بحاجة إلى تحديد واعتراض الأصحاب مناسبة، فضلا عن التنافس مع الآخرين الذكور للتزاوج الحقوق بالدفاع عن هذه الأراضي34. تضمن هذه العملية أن الذكور مع رؤية أفضل والاهتمام المكاني من المحتمل أن تكون الأكثر نجاحا في التزاوج، ومن ثم هذه الصفات تنتقل إلى الجيل التالي. ويتضح تأثير الناتجة من هذه العمليات الجارية، جزئيا، بوجود ديمورفيسمس الجنسي في مسار البصرية هوفيرفليس35،36. في الأسر الذكور لا تملك نفس العقبات للتزاوج الناجحة كما هو الحال في الميدان: أولاً، الإناث متوفرة بسهولة، وثانيا العلبة الصغيرة المحصورة، ويلغي تأثير سلوكيات الإقليمية، التي تعمل على ردع حصول التزاوج الآخر الذكور المنافسة. إزالة التجريبية للانتقاء الجنسي في melanogaster المورفولوجية، ثبت أن لها أثر كبير على السكان في الأسر مع انخفاض في حجم الجسم الكلي وحجم الخصيتين و إنتاج الحيوانات المنوية37، وتخفيض معدلات الذكور الخطوبة السلوكيات38. وهكذا، قد أسيرة تربية البرنامج، دون أي اعتبار للانتقاء الجنسي، أثر بالغ في الدراسات البصرية والسلوكية التي أجريت في وقت لاحق.
ونحن هنا وصف حل بسيطة وفعالة من حيث التكلفة التي توفر إمدادات متسقة من هوفيرفليس صحية. البروتوكول مرنة وسهلة لإعادة بدء تشغيل و/أو الراقي، تبعاً لمتطلبات البحث.
باستخدام تقنيات لدينا (الشكل 1) هوفيرفليس تم الاحتفاظ بها في المختبر لمدة أكثر من سنة واستخدمت بنجاح في التجارب السلوكية بعد 7 أشهر في الأسر39. في الواقع، حتى لو كان يبدو الحدس، الحفاظ هوفيرفليس في بيئة طبيعية أكثر، تحت الضوء ح 12:12 ح الظروف المظلمة، في درجة حرارة الغرفة، إلى حد كبير يقلل من عمرها إلى 2-3 أشهر. محاولات الحفاظ على هاء-تيناكس في دورتنا الإسبات اصطناعية لأكثر من سنة أطول بكثير من السابق باستخدام بروتوكولات مختلفة (77 يوما33, 4 أشهر9, 18 أسبوعا30). العوامل الرئيسية التي تؤثر على هذا زيادة العمر المتوقع من المرجح استخدام إسبات اصطناعية في 8-10 درجة مئوية. بكسر في وضع الإسبات، ودورية كل 3-4 أيام (الخطوة 2، الشكل 1)، نسمح هوفيرفليس آر والعريس ذاتيا، وبالتالي الحفاظ على الحالة التغذوية ورفاهية هوفيرفليس، كما يتضح من زيادة الملحوظة في الوزن ( الرقم 4) وأي تغيير في النشاط الحركي حتى بعد فترات طويلة في الأسر (الشكل 3، وانظر39). في الواقع، تقارير في أدب المحاولات غير الناجحة في وضع الإسبات مصطنعة لا كسر دورة وضع الإسبات، مما يؤدي إلى زيادة في معدلات الوفيات، ووجود العفن9.
بالإضافة إلى ذلك، هناك بعض الجدل في جميع أنحاء الأدب فيما يتعلق بتوفير حبوب اللقاح كمصدر لغذاء. عدة ورقات الدولة أن النحل حبوب اللقاح ليس كافياً، على وجه التحديد أوفيبوسيشن، وهو فقط توفير حبوب اللقاح الجافة أو الطازجة في الواقع مناسبة9،29. النتائج التي توصلنا إليها تشير إلى أن باستكمال النحل حبوب اللقاح مع العسل والماء، ونحن نرى طول العمر وأوفيبوسيشن، حتى بعد فترات طويلة من الأسر، مع زيادة في الوزن في كلا الجنسين (الشكل 4) وأوفيبوسيشن ما زالت تحدث في الإناث بعد أكثر من 5 أشهر في الأسر39. هذا زيادة العمر المتوقع يسمح لنا بدراسة سلوكيات هوفيرفليس في جميع مراحل الحياة.
في الحقل، يتم إخصاب قبل الإسبات الموسمية هوفيرفليس الإناث والبقاء في دياباوسي الإنجابية، حيث يتم تخزين الحيوانات المنوية وتظل بويضات المتخلفة، حتى الربيع28. نظراً لأن أنثى عادة قادرة على وضع البيض 3000 في غضون 60 يوما29، تربية هذه البويضات طريقة سريعة وفعالة لزيادة عدد سكاننا الأسير ولذلك. ومع ذلك، تقتصر فهمنا الحالي للعوامل التي تؤدي إلى تنمية البويضات بعد فترة من وضع الإسبات. درجة الحرارة والرطوبة وكثافة الضوء والحالة التغذوية جميعا قد اقترحت كلعب دوراً في مراقبة ديبوس الإنجابية28،40. التلاعب التجريبية لهذه العوامل قد تؤدي إلى مزيد من حكم من معدلات وتوقيت أوفيبوسيتيون.
وبالمثل، نحن قد بنجاح وضع اليرقات، وكذلك eclosion الخوادر، تأخر بسبب التخزين في الظلام في 8-10 درجة مئوية لمدة أسبوعين، على الرغم من أن السلامة قد تكون أطول بكثير. وفي الواقع، اشف30 أبلغت عن زيادة مدة الخوادر لتصل إلى 37 يوما عندما كان انخفضت درجة الحرارة الخوادر من 25 درجة مئوية إلى 10 درجات مئوية. توظيف هذه الاستراتيجيات وتأخير إنتاج البيض و/أو تطوير الخوادر سيسمح لتلاعب الخصائص الديمغرافية للسكان الأسير أكبر.
وبينما الاتساق الزمني للعرض من أهمية أكبر لمتطلباتنا من الغلة كبيرة، وهذا قد يكون أكثر أهمية لاستخدامات أخرى، مثل التلقيح في الدفيئات. ووجدنا أن عند استخدام الأسلوب لدينا مع براز الأرنب، لقد حصلنا على 163 ± 34 اكلوسيد هوفيرفليس من كل مخلب من البيض (N = 3). ونظرا لأن أنثى عادة يضع البيض يصل إلى 20040، أننا قد تكون قادرة على زيادة هذا العائد أما المنافسة الاكتظاظ والمواد الغذائية المتناقصة، أو عن طريق ضبط درجة الحرارة، كما قد تورطت هذه كالتي تؤثر إلى حد كبير في نمو اليرقات9 31، ،،من4041. ومع ذلك، هناك أي إشارة إلى أن الأساس لوسائل الإعلام يؤثر إلى حد كبير العائد32. وبالإضافة إلى ذلك، بدلاً من البراز من سائر الفقاريات29،30،،من3142، براز الأرنب نسبيا رائحة الحرة، السماح للمستعمرة أن تبقى تحت ظروف المختبر العادية دون الحاجة للتهوية الإضافية. تقليل كثافة اليرقات في وسائل الإعلام، أو إضافة الغذائية المكملات الغذائية مثل الخميرة، فضلا عن الحفاظ على درجة حرارة ثابتة بين 20-25 درجة مئوية، وهو ربما يكفي لتعظيم العائد31،32، تماما 40.
الجوانب العملية لجمع عدد كاف من حرية ترفع هوفيرفليس، أو المحافظة على عدد سكان الأسير متنوعة وراثيا، كلاهما غير عملي والوقت تقييداً لمشاريع بحوث صغيرة الحجم. ولذلك، تربية ذرية الإناث تفعيل البرية، والمكمل للإمدادات بحصاد7من اليرقات الناضجة، تسمح الخيارات الأكثر عملية للاستخدام على مدار العام من هاء-تيناكس في إعداد بحوث. كما تقتصر هذه الأساليب المواسم التي يمكن أن تحدث جمع، هناك حاجة لكلا ضمان طول عمر هوفيرفليس الكبار وتربية أي البيض زرعتها أسر جرابيد الإناث.
The authors have nothing to disclose.
حاليا يمول الأبحاث في مختبر لدينا مجلس البحوث الأسترالية (ARC و DP170100008 و DP180100144) ولنا سلاح الجو مكتب للبحوث العلمية (أفوسر، FA9550-15-1-0188) ستيفتيلسين Olle انجكفيست Byggmästare (2016/348). ونشكر في الماضي أعضاء المختبر التي أسهمت في تطوير مخزون هوفيرفلي، لانتبروك سيديرهولمس وج م & الأخضر ل T الابن للوصول بروث البقر وهوفيرفليس في مزارعهم، وتصاريح أديلايد والحدائق النباتية أوبسالا لجمع و الدعم المستمر.
Bee Pollen | Forest Super Foods | any brand of bee pollen is suitable | |
Honey | Bramwells | any brand of liquid honey is suitable | |
Rabbit Faeces | can be substituted with cow or pig manure made into a slurry | ||
BugDome | Australia Entomological Supplies | EM42222 | |
Plastic Bags | Woolworths Homebrand | ||
Mosquito netting | Clas Ohlson | 34-1113 | |
Cotton Balls | Woolworths Select | ||
Fridge | Hisense | fridge needs to maintain a stable 8-10°C | |
Buckets (2-3L) | |||
Large plastic tubs (30L) | |||
Wood shavings | Pollards Sawdust Supplies | MaxiFlake (75) | |
Bag clips | IKEA | Bevara 303.391.70 | |
Petri Dish (100mm x 20mm) | Corning | 430167 |