Завод инфекции тест: Спрей и Рана опосредованной прививка с завода возбудителя Magnaporthe мурены
Summary
Здесь мы представляем протокол для проверки вирулентности завод с завода возбудитель Magnaporthe мурены. Этот доклад будет способствовать крупномасштабные скрининга pathotypes грибов изолятов и служат отличной отправной точкой для понимания устойчивых механизмов растений во время молекулярной разведения.
Abstract
Растения обладают мощной системы, чтобы защитить себя от потенциальных угроз, патогенных грибов. Для аграрно важных растений однако, текущие меры по борьбе с такой патогенов оказались слишком консервативна и, таким образом, недостаточно эффективными и они могут создавать потенциально экологические риски. Таким образом это крайне необходимо для выявления факторов хост сопротивления для оказания помощи в контроля заболеваний растений естественно через выявление устойчивых зародышевой плазмы, изоляции и характеристика генов сопротивления и молекулярных разведения устойчивых сортов. В этой связи существует необходимость установить метод точного, быстрого и крупномасштабных прививка размножаться и развиваться завод гены сопротивления. Рис взрыв грибкового патогена Magnaporthe мурены причины тяжелой болезни симптомы и принести убытки. Недавно м. мурены стала модель организма для изучения механизмов взаимодействия растений грибкового патогена. Следовательно мы сообщают о разработке метода испытания вирулентности завод, который является специфичным для м. мурены. Этот метод обеспечивает для прививки спрей с конидиальная подвеска и ранив прививка с мицелием кубов или капельки конидиальная подвески. Ключевым шагом ранив метод прививки для отсоединенной рис листья, чтобы раны на листьях растений, который предотвращает любые помехи, вызванные сопротивление пенетрации хост. Этот спрей/ранив протокол способствует быстрой, точной и крупномасштабных скрининга pathotypes м. мурены изолятов. Это комплексное и систематические завод инфекции метод послужит отличной отправной точкой для получения широкой перспективы вопросов в фитопатологии.
Introduction
Райс Доменная, вызванные м. мурены, является одним из самых серьезных заболеваний для риса сорта во всем мире1,2. Этот процесс, по которому м. мурены заражает растений-хозяев включает в себя производство конидий и поверхности крепления, прорастание конидий и Аппрессории образование, формирование проникновения колышек и инфекционных ГИФА дифференциации, и распространением болезни 3. все эти этапы являются общими в многих других растений патогенных грибов, и, действительно, блокаду любой одноступенчатые предотвращает инфекции растений-хозяев. Благодаря его экономическое значение и отслеживаемости генетических м. мурены стала модель организма для изучения механизмов взаимодействия растений грибкового патогена1,4. Таким образом изучая молекулярные основы эти этапы развития в . м. мурены поможет прояснить молекулярных механизмов грибковых патогенности и идентификации генов-мишеней кандидата для проверки и проектирования Роман Фунгициды5.
Последние доклады, касающиеся м. мурены инфекции были сосредоточены на молекулярных механизмов до проникновения этапов, особенно conidiation, Аппрессории формирования, проникновения колышки и инфекционные роста3, 6. Таким образом, очень важно разработать подробный протокол для тестирования м. мурены инфекции. Здесь мы представляем подробный метод для инфекции тест, который использует спрей опосредованной инфекции анализов с конидиальная подвеска и прививка РАН с мицелиальных вилки м. мурены. В настоящем докладе протокол посвящен культуре штаммов, подготовка conidiation решения для распыления и мицелиальных вилка опосредованной Прививка растений с . м. мурены. Эти шаги описаны подробно ниже, и схема показаны весь процесс метода и типичные поражения приведены на рисунках 1 и 2, соответственно.
Protocol
Representative Results
Discussion
Гены сопротивления болезни растений играют важную роль в предотвращении инфекций патогенных микроорганизмов, в том числе грибковых патогенов1,12. Райс Доменная использовалась как модель понять природу структур населения возбудителя и выявить гены сопр?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана Специальным научно исследовательский проект Пекинского университета сельского хозяйства (YQ201603) и научный проект Пекине образовательного комитета (KM201610020005).
Materials
| Agar | AOBOX Biotechnology（China） | 01-023 | |
| Filter paper | GE Healthcare brand(Sweden) | 10311387 | |
| 50-mL tube | CORNING(Amercia) | 430290 | |
| Centrifuge | Eppendorf(Amercia) | 5804R | |
| Tween-20 | Coolaber（China） | CT11551-100ml | |
| Culture dish | Thermofisher(Amercia) | 150326 | |
| 0.5-5 mL pipette | Eppendorf | 4920000105 | |
| 100-1000uL pipette | Eppendorf | 4920000083 | |
| Vacuum pump | Leybold | D25B | |
| Dissection needle | FST | 26000-35 | |
| Incubator | MEMMERT | PYX313 | |
| Inoculation ring | Greiner Bio One | 731175 |
Referencias
- Li, W. T., et al. A natural allele of a transcription factor in rice confers broad-spectrum blast resistance. Cell. 170 (1), 114-126 (2017).
- Chi, M. H., Park, S. Y., Kim, S., Lee, Y. H. A novel pathogenicity gene is required in the rice blast fungus to suppress the basal defenses of the host. PLoS Pathogens. 5 (4), 1000401 (2009).
- Jia, Y., Valent, B., Lee, F. N. Determination of host responses to Magnaporthe grisea.on detached rice leaves using a spot inoculation method. Plant Disease. 87 (2), 129-133 (2003).
- Ebbole, D. J. Magnaporthe as a model for understanding host-pathogen interactions. Annual Review of Phytopathology. 45, 437-456 (2007).
- Hamer, J. E., Talbot, N. J. Infection-related development in the rice blast fungus Magnaporthe grisea. Current Opinion in Microbiology. 1 (6), 693-697 (1998).
- Howard, R. J., Valent, B. Breaking and entering: host penetration by the fungal rice blast pathogen Magnaporthe grisea. Annual Review of Microbiology. 50, 491-512 (1996).
- Chen, X. L., et al. N-Glycosylation of Effector Proteins by an α-1,3- Mannosyltransferase Is Required for the Rice Blast Fungus to Evade Host Innate Immunity. The Plant Cell. 26 (3), 1360-1376 (2014).
- Zhang, Y., et al. M.ARG1, MoARG5,6 and MoARG7 involved in arginine biosynthesis are essential for growth, conidiogenesis, sexual reproduction, and pathogenicity in Magnaporthe oryzae. Microbiological Research. 180, 11-22 (2015).
- Du, Y. X., et al. A serine/threonine-protein phosphatase PP2A catalytic subunit is essential for asexual development and plant infection in Magnaporthe oryzae. Current Genetics. 59 (1-2), 33-41 (2013).
- Yang, J., et al. A novel protein com1 is required for normal conidium morphology and full virulence in Magnaporthe oryzae. Molecular Plant-Microbe Interactions. 23 (1), 112-123 (2010).
- Cao, Z. J., et al. An ash1-like protein MoKMT2H null mutant is delayed for conidium germination and pathogenesis in Magnaporthe oryzae. BioMed Research International. 2016, 1575430 (2016).
- Bryan, G. T., et al. A single amino acid difference distinguishes resistant and susceptible alleles of the rice blast resistance gene Pi-ta. The Plant Cell. 12 (11), 2033-2045 (2000).
- Zhou, J. M. Plant pathology: a life and death struggle in rice blast disease. Current Biology. 26 (18), 843-845 (2016).
- Guo, M., et al. MoGrr1, a novel F-box protein, is involved in conidiogenesis and cell wall integrity and is critical for the full virulence of Magnaporthe oryzae. Applied Microbiology and Biotechnology. 99 (19), 8075-8088 (2015).
- Talbot, N. J. On the trail of a cereal killer: Exploring the biology of Magnaporthe grisea. Annual Review of Microbiology. 57, 177-202 (2009).
- Wilson, R. A., Talbot, N. J. Under pressure: investigating the biology of plant infection by Magnaporthe oryzae. Nature Reviews Microbiology. 7, 185-195 (2009).
- Jia, Y. L., Lee, F. N., McClung, A. Determination of Resistance Spectra of the Pi-ta and Pi-k Genes to U.S. Races of Magnaporthe oryzae Causing Rice Blast in a Recombinant Inbred Line Population. Plant Disease. 93, 639-644 (2009).
- Peng, Y. L., Shishiyama, J. Temporal sequence of cytological events in rice leaves infected with Pyricularia oryzae. Canadian Journal of Botany. 66 (4), 730-735 (1988).
