Summary

מנגנון רב שכבתי אולטרה נקי של איסוף פלנקטון ימית גודל Fractionated וחלקיקים מושעה

Published: April 19, 2018
doi:

Summary

פלנקטון וחלקיקים מושעה לשחק תפקיד מרכזי המעגלים הביוגיאוכימיים באוקיינוס. כאן, אנו מספקים שיטה אולטרה נקי, נמוך מתח עבור האוסף בגדלים שונים של חלקיקים פלנקטון בים עם יכולת לטפל בכמויות גדולות של מי ים.

Abstract

חלוקות של יסודות קורט רבים באוקיינוס משויכים מאוד הצמיחה, מוות, ואת re-mineralization של פלנקטון ימית ואלו של חלקיקים מושעה/שוקע. כאן, אנו מציגים כל פלסטיק (פוליפרופילן ופוליקרבונט), רב-שכבתית סינון מערכת איסוף חומר על תנאי (SPM) בים. זה מכשיר דגימה אולטרה נקי כבר שעוצבו ופותחו במיוחד ללימודי יסוד קורט. בחירה קפדנית של כל חומרים מתכתיים וסילוק של הליך זרימה דרך בשורה ממזער כל זיהום מתכת אפשרי במהלך הדגימה. מערכת זו בהצלחה שנבדק ונמצא צבט לקביעת במתכות (למשל, Fe, Al, Mn, תקליטור, Cu, Ni) על חלקיקים בגדלים במימי האוקיינוס החוף ופתוח. תוצאות של ים סין הדרומי בתחנה בדרום מזרח אסיה בזמן-סדרות (מושבים) מצביעים על כך וריאציות ההשתנות היומית, התפוצה המרחבית של פלנקטון באזור euphotic יכול להיות בקלות נפתרה מזוהה. ניתוח כימי של fractionated-גודל החלקיקים במים עיליים של מצרי טאיוואן עולה כי החלקיקים גדול (> 153 מיקרומטר) בעיקר ביולוגית נשאבו, ואילו החלקיקים קטנים (10-63 מיקרומטר) היו מורכבים בעיקר מחומר אורגניים. מלבד תקליטור, ריכוזי מתכות (Fe, Al, Mn, Cu, Ni) ירד עם הגדלת גודל.

Introduction

חלקיקים באוקיינוס לשחק תפקיד חשוב הביוגיאוכימיים ימית1. רוב המאפיינים של חלקיקים, כגון גודל, מינרלוגיה, קומפוזיציה, באפשרותך לשנות עמוקות מהגדרת גיאולוגית או hydrographical אחד עוד2. בנוסף, חלוקות של אלמנטים באוקיינוס קשורים גם עם מחזור החיים של פיטופלנקטון ימית: צמיחה, מוות, שוקע ו- re-mineralization3,4. חלקיקים ימיים span לפחות 4 סדרי גודל בגודלם, ועד כחיוניים חלקיקים אגרגטים גדולים (> 5 מ מ). רוב חלקיקי ביולוגית נגזרות, תהליכים כגון פירוק ויראלי, exudation, הפרשה, גלולה צואה ייצור, וכו ‘. חלקיקים אחרים נוצרות מן קרישה הפיזי של תאים, פסולת הסלולר או חומרים lithogenic1. מאפיינים כימיים וביולוגיים שונים של חלקיקים לשלוט מחזורים גיאוכימיים והן תהליכים ביולוגיים המתרחשים על ובתוך חלקיקים4,5,6. חלקיקים אלה הם בתי גידול חשוב, כמו גם מקורות המזון עבור אורגניזמים מסוימים, כגון זואופלנקטון או saprotrophs. בהתאם לכך, גורלו של חלקיקים לעיתים קרובות קשורה לגודל שלהם, אשר יכול להיות שונה על-ידי תהליכים ביולוגיים סביב חלקיקים.

דגימה חלקיקים ימיים בדרך כלל דורשת סינון, אך גישה זו מציגה של עמימות מסוימת בזיהוי המאפיינים של חלקיקים, כיוון חלקיקים ימיים לא הומוגנית הרכב וגודל. חלקיקים מושעה, מורכב בעיקר חלקיקים קטן ונמוך צפיפות הנמצאים כמעט באופן קבוע ההשעיה, מעורבבים עם כמויות משתנות של חלקיקים גדולים יותר, צפופה ההשעיה רק לתקופה קצרה של זמן, בהתאם לתנאי hydrodynamic 7. דיווחים ראשונים על ההרכב מתכת עקבות של פלנקטון דגימות נאספו tows פלנקטון או השעיית רשתות פלנקטון על כלי מחקר8. המחברים לעתים קרובות למצוא חלקיקי מתכת, שבבי בדגימות, צבע רומז בעיה חמורה של זיהום במהלך חלקיקים ימיים דגימה לניתוח כימי. אחרים מאמצים כוללים נטו גרירה על ידי גומי רפסודות או שימוש על פוליויניל כלוריד (PVC)-יד המנוף3. הקושי של אמינים הדגימה של חלקיקים מקשה התקדמות בהבנתנו ההרכב הכימי של חלקיקים ימיים, במיוחד עבור יסודות קורט. ככזה, הגיע מידע חיוני ביותר על הריכוז של יסודות קורט של פיטופלנקטון תרבות מחקרים9,10. הכרה זו הניעה מדענים ימיים כדי ליצור שיטות חדשות ללימוד חלקיקים בים במשך שלושים השנים האחרונות11.

Oceanographers השתמשו בטכניקות דיגום שונות, כולל סינון בחללית, בחיי עיר סינון, משקעים מלכודות11. העיבוד של כמויות גדולות של מי-ים לאסוף דגימות שאינו נגוע עשויה להיות מאתגרת, במיוחד עבור אוקיינוס הפתוח העמוקים שבו ריכוז החלקיקים נמוכים מאוד (0.001 – 0.1 mg/L). יש גם צורך לסנן כמויות גדולות של מי הים כדי להשיג על כמות נאותה של חלקיקים למדידת ריכוזי מתכות מעקב. יש חוקרים השתמשו בשיטת גודל-fractionation כדי להפריד חלקיקים מושעה חלקיקים שוקעים. עם זאת, גודל החלקיקים, נקבוביות, צפיפות, צורה יכולה כל חלקיק השפעה שוקע המהירויות. משקעים מלכודות אינם כלים מעשיים כדי לאסוף חלקיקי מושעה, שכן אלה מיועדים חלקיקים שוקעים. לכן, חשוב לפתח שיטות דיגום וטיפול יכול לאסוף כמויות מספיקות של חלקיקים מושעה עם זיהום מזערי. לפיכך, גודל-fractionation על-ידי סינון בחיי עיר הוא עדיין מבטיח כלי בארגז דגימה של האוקיינוסים, מאז זה עשוי לחשוף מידע קריטי בדינמיקה של חלקיקים ימיים. כאן, אנו מתארים בהצלחה בדיקות מעקב-מתכת-clean, סינון רב שכבתית הכבידה דגימה המנגנון ניתן לטפל בנפחים גדולים (L 120-240) של מי ים על הסיפון במעבר אחד מ טפלון (PTFE) מצופה דגימה בקבוקי מים מערך דגימה רב בקבוק. מכשיר דגימה זו משתמשת המחומצנים ניילון סינטטי רשתות ברצף, הרשתות מוקפים בתוך גורם מכיל פוליקרבונט לאסוף בעדינות fractionated גודל מושעה ולעדכן פיטופלנקטון12,13, 14,15 (איור 1). מטרת עבודה זו היא לספק כלי טוב יותר ללמוד את השיוכים מתכת-החלקיקים ואת הדינמיקה התגובה שלהם בסביבות ימיות, ולשפר את ההבנה שלנו על גורלם של מגוון רחב של האצה, חלקיקים, במתכות האלו סביבות.

Protocol

להלן כללי התנהגות כוללת עבודה עם כימיקלים מזיקים. אנא קרא בעיון את גיליונות נתונים לבטיחות (זמנים תוססים) ופעל להנחיות הבטיחות כימי מוסדיים. 1. רב-שכבתית הכבידה סינון סמפלר הכנה סמפלר ניקוי למלא את יחידת אבובים ולסינון 1% (w/v) של האנזים פרוטאז anionic פתרון דט?…

Representative Results

עם הפיתוח לאוקיאנוגרפיה המודרנית, זה עכשיו מקובל להשתמש “טכניקות נקי” כדי לקבל מעקב מדויק מתכת ריכוזי חלקיקים ימיים או הפלנקטון. מאז רוב חלקיקי המים הטבעיים ב- mg/L נמוך לטווח µg/L, הטיפול של כמויות גדולות של מי ים הוא צורך לחקור את ההשפעות גיאוכימיים והביולוגיה במתכות על חלק…

Discussion

קבלת מעקב אמין ריכוזים מתכת על פלנקטון וחלקיקים מושעה במים טבעיים, אשר נמצאים בדרך כלל בריכוזים נמוכים מאוד, דורש זהירות רבה במהלך איסוף הדגימה, עיבוד, בשוטף ובשיפוץ, ניתוח, במטרה הפחתת זיהום. לכן, ההליכים כדי לעצב ולהכין ציוד דגימה, דוגמת מכולות וחומרים המשמש לאיסוף, הם דוגמאות תהליך קריטי…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

המחברים תודה גברת Pi-Fen לין, מר ווי-לונג תראו את זה, גברת פיי-Hsuan לין, ד ר Jia-לו צ’ואן לסיוע שלהם בתקופת הדגימה שדה, ניתוח מעבדה עבור פיתוח מעשי, יישום של “CATNET”. הסיוע של טכנאי על סיפון ספינת המחקר האוקיינוס מחקר והצוות -I ו- Ocean מחקר-II במהלך משלחות דגימה תרומה חשובה. עבודה זו נתמכה חלקית על ידי משרד המדע טייוואן ומענקים הטכנולוגיה של 91-2611-M-002-007,-009 95-2611-M-002, 96-2611-M-002-004, 97-3114-M-002-006, 104-2611-M-002-019. כתב יד זה נכתב לזכרו של גברת וון-Huei לי עבור שלה עצום מסירות ותרומה מחקרים ימיים בטייוואן.

Materials

thermoplastic elastomer (C-Flex) Tubings Cole Palmer EW-06424-67 O.D. 0.635 cm, Opaque White 1/8"ID x 1/4"OD, 25 ft/pack
LDPE Bottle (Nalgene) ThermoFisher Scientific 2103-0004 125 mL, Nalgene Wide-Mouth LDPE Bottles with Closure
anionic protease enzyme detergent detergent (Tergazyme) Alconox 1104-1 1×4 lb box (1.8 kg)
Hydrochloric Acid Sigma-Aldrich 258148 Reagent grade
Nitric acid Sigma-Aldrich 695025 Reagent grade
alkaline detergnet (Micro) Cole Palmer EW-99999-14 Micro-90 Cleaning Solution
polycarbonate filter, 47 mm, 0.4 µm Sigma-Aldrich WHA111107 Whatman Nuclepore Track-Etched Membranes, diam. 47 mm, pore size 0.4 μm, polycarbonate
polycarbonate filter, 47 mm, 10 µm Sigma-Aldrich WHA111115 Whatman Nuclepore Track-Etched Membranes, diam. 47 mm, pore size 10 μm, polycarbonate
PFA vessel, 60 ml capacity Savillex 300-060-03 60 mL Digestion Vessel, Flat Interior, Flat Exterior, Buttress Threaded Top
Nitric acid, ultrapure Seastar Chemicals N/A BASELINE Nitric Acid
HF, ultrapure Seastar Chemicals N/A BASELINE Hydrofluoric Acid
Boric acid, ultrapure Seastar Chemicals N/A BASELINE Hydrobromic Acid
polyethylene (PE) gloves Safty Zone GDPL-MD-5 Clear Powder Free Polyethylene Gloves
Multiple layer filtering and collecting device Sino Instrumnets Co. Ltd not available Multiple layer filtering and collecting device, CATNET
10 um Nylon filters, Nitex Dynamic Aqua-Supply Ltd. NTX 10 Nitex – Standard Widths (40 – 44 inches)
60 um Nylon filters, Nitex Dynamic Aqua-Supply Ltd. NTX 60 Nitex – Standard Widths (40 – 44 inches)
150 um Nylon filters, Nitex Dynamic Aqua-Supply Ltd. NTX 150 Nitex – Standard Widths (40 – 44 inches)
torque wrench Halfords 200238 Halfords Professional Torque Wrench 8-60Nm
multi-bottle sampling array, Rosette General Oceanics Model 1018 Rosette Sampler
PTFE-coated sampling bottles, GO-Flo General Oceanics 108020T GO-Flo water sampler teflon coated
Marine sediment reference materials National Research Council Canada MESS-3
Estuarine sediment standard reference material National Institute of Standards and Technology 1646a
Plankton reference material The European Commission's science and knowledge service CRM414

Referencias

  1. Jeandel, C., et al. What did we learn about ocean particle dynamics in the GEOSECS-JGOFS era. Progr. Oceanogr. 133, 6-16 (2015).
  2. Lam, P., et al. Methods for analyzing the concentration and speciation of major and trace elements in marine particles. Progr. Oceanogr. 133, 32-42 (2015).
  3. Collier, R., Edmond, J. The trace element geochemistry of marine biogenic particulate matter. Progr. Oceanogr. 13, 113-199 (1984).
  4. Donat, J. R., Bruland, K. W., Steinnes, E., Salbu, B. Trace elements in the oceans. Trace Elements in Natural Waters. , 247-280 (1995).
  5. Wen, L. -. S., Santschi, P., Tang, D. Interaction between radioactively labeled colloids and natural particles: evidence for colloidal pumping. Geochim. Cosmochim. Ac. 61, 2867-2878 (1997).
  6. Wen, L. -. S., Warnken, K., Santschi, P. The role of organic carbon, iron, and aluminium oxyhydroxides as trace metal carriers: Comparison between the Trinity River and the Trinity River Estuary (Galveston Bay, Texas). Mar. Chem. 112, 20-37 (2008).
  7. Hurd, D., Spencer, D. Marine particles: analysis and characterization. American Geophysical Union. , (1991).
  8. Martin, J. H., Knauer, G. A. The elemental composition of plankton. Geochim. Cosmochim. Ac. 37, 1639-1653 (1973).
  9. Morel, F., Price, N. M. The biogeochemical cycles of trace metals in the oceans. Science. 300, 944-947 (2003).
  10. Ho, T. -. Y., et al. The elemental composition of some marine phytoplankton. J. Phycol. 39, 1145-1159 (2003).
  11. McDonnell, A., et al. The oceanographic toolbox for the collection of sinking and suspended marine particles. Prog. Oceanogr. 133, 17-31 (2015).
  12. Wen, L. -. S., Li, W. -. H., Zhuang, G. -. Z. . Multiple layer filtering and collecting device. , (2005).
  13. Ho, T. -. Y., Wen, L. -. S., You, C. -. F., Lee, D. -. C. The trace-metal composition of size fractionated plankton in the South China Sea: biotic versus abiotic sources. Limnol. Oceanogr. 52, 1776-1788 (2007).
  14. Hsu, R., Liu, J. In-situ estimations of the density and porosity of flocs of varying sizes in a submarine canyon. Mar. Geol. 276, 105-109 (2010).
  15. Liao, W. -. H., Yang, S. -. C., Ho, T. -. Y. Trace metal composition of size-fractionated plankton in the Western Philippine Sea: the impact of anthropogenic aerosol deposition. Limnol Oceanogr. , (2017).
  16. Grasshoff, K., Kremling, K., Ehrhardt, M. . Methods of seawater analysis. , (2007).

Play Video

Citar este artículo
Wen, L., Lee, C., Lee, W., Chuang, A. An Ultra-clean Multilayer Apparatus for Collecting Size Fractionated Marine Plankton and Suspended Particles. J. Vis. Exp. (134), e56811, doi:10.3791/56811 (2018).

View Video