Summary

慢性的な経頭蓋電気刺激およびラットの皮質内の記録

Published: May 11, 2018
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Summary

この詳細なプロトコルは、自由行動ラットの経頭蓋電気刺激の短期および長期効果を調査するために、側頭骨に経頭蓋刺激電極配置をについて説明します。

Abstract

経頭蓋電気刺激 (TES) は、ランダムまたは閉ループ イベント発生方法でびまん性脳活動に影響を与える強力な比較的簡単なアプローチです。多くの研究が可能な利点および健康および病理学的頭脳の TES の副作用を中心に、まだ刺激の作用機序に関する多くの基本的な未解決の問題があります。したがって、明確がある急性をテストする堅牢で再現可能な方法および齧歯動物の TES の慢性効果のため必要があります。TES は、神経ネットワークの体内を調べる正規行動、イメージング、電気生理学的手法と組み合わせることができます。脳の活動を操作するための汎用性の高い、柔軟なツールを提供しながら、経頭蓋刺激電極の注入は実験的なデザインで余分な制約を課しません。ここでを作製し、インプラントの経頭蓋刺激電極ヶ月拘束された一時的な脳の活動に影響を与える詳細なステップバイ ステップのプロトコルを提供します。

Introduction

経頭蓋電気刺激 (TES) は一時的に拘束された方法で脳の活動に影響を与える貴重な方法論的アプローチです。サイズ、刺激電極の配置に応じて TES が大脳のボリュームに影響を与えるし、びまん性神経集団を同調1,2,3。経頭蓋直流電流刺激が大鬱病性障害の45と多くの研究は人間6経頭蓋刺激の認知的効果を示す焦点の治療のため既に医学的に承認されました。,7します。 さらに、有望な結果をてんかん発作8,9を制御する TES の可能性について報告しました。

集中的な研究にもかかわらずまだこの方法1011,12を適用する長期的な結果、潜在的な副作用は、アクションの詳細なメカニズムについて多くの未解決の問題があります。したがって、動物モデルでの TES の効果を調査するため、再現性のある堅牢なプロトコルを持っている非常に重要です。ためのプロトコルを提供我々 目を覚まし動物 (例えばうつ病、てんかん、統合失調症) の多くの疾患が広く調査のみ、これらの医療条件の本質は、通常長期の治療を必要と、慢性的なラット頭蓋電極の注入。ここで紹介した方法は行動研究のため使用することができます。 または (すなわちワイヤー、シリコン プローブの、juxtacellular 電極) 記録電極の注入したり、電気生理学的実験のため慢性頭蓋ウィンドウに結合することができます。イメージング研究、それぞれ。実験的なデザインによって刺激のタイミングはランダムまたはイベントによってトリガーされる特定の行動キューまたは特定の頭脳の状態 (発作、シータ)8,の電気生理学的特徴をすることができます。11,13

それは、皮膚に装着した電極の形態を使用して、現在使用されている人間のアプローチと対照をなしてを示すラットから側頭骨の表面に皮下注入右をほとんど採用方法を言及することが重要彼らの足を使用して簡単にアクセス可能である彼らの皮膚上に配置何かに耐えます。

注入の慢性的な性質のため交換、削減、および改良の原則に則り、このメソッドは、使用できるようにヶ月間、さまざまな実験条件で各動物を募ることができますので、動物の数を減らすのに役立ちます少ない動物の様々 な仮説をテストします。

本研究では、経頭蓋刺激電極 (図 1 aB) 製造の詳細なステップバイ ステップのプロトコルを提供し、6 ヶ月歳の頭骨上これらの電極の慢性的な注入を実証男性のロング ・ ラット。

Protocol

ここで説明するすべての方法は、コミュニティの欧州理事会の指令に従って (86/609 ECC) アルバート ・ セント ・ イシュトバーン Györgyi 医療薬学の大学センターで動物研究の倫理委員会によって承認されているとセゲド (XIV/218/2016)。 1. 刺激電極の作製 1 つの刺激電極、ミニチュアのフックアップ ワイヤの六つの 10 cm 長い部分をカット削除の一端にクラッドともう?…

Representative Results

慢性刺激電極 (図 1 b) の注入は、電極 (図 1D) の追加注入と組み合わせることができます。このような設定は、オン ・ デマンド記録と特定の脳の活動を妨害する刺激システムを形成する適しています。閉ループてんかん検出と介入システム、ロング ・ ラット自発性発作 (図 2 a)<sup class="xre…

Discussion

このプロトコルの最も重要なステップは、骨表面に電極パッケージの接着です。不適切なシーリングの場合、骨と電極のギャップが形成され、二次瘢痕組織は刺激性を軽減このギャップに育てることができます。パッケージにこだわりの手順中に骨表面が完全に乾燥する必要があり、電極の不安定性が発生している場合にする必要があります削除して最良の結果を得るために新しいパッケー?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品が支持された EU-FP7-ERC-2013-開始 ‘勢い’ ハンガリー科学アカデミー (LP2013-62)、GINOP-2.3.2-15-2016-00018 助成プログラム助成金 (No.337075) による。ありがとう Máté Kozák 刺激を文書化し、有意義な議論のプロトコル設計時に電極と Mihály Vöröslakos を記録します。

Materials

Cyanoacrylate liquid Henkel Loctite 401
Cyanoacrylate gel Henkel Loctite 454
Wire for stimulation electrodes Phoenix Wire Inc. 36744MHW – PTFE Microminiature Hook-Up Wire
Board spacer E-tec Interconnect SP1-020-S378/01-55
Connector E-tec Interconnect P2510I-02
Tape packaging for stimulation electrodes Nexperia 74HC1G00GW Tape packaging of any integrated circuit with SOT-353 case can be used
Grip Cement Industrial Grade Caulk Dentsply 675571 (powder) 675572 (solvent)
Electroconductive gel Rextra ECG Gel
Recording electrode wire California Fine Wire Co. .002 (50 micron) Tungsten 99.95% (CFW Material #: 100-211), HMl-Natural, cut to 3.0 inch pieces, Round, Cut length piece wire
Ultrafine scissors Hammacher Instrumente Stainless HSB 544-09
Stainless steel tube Vita Needle Company 29 RW, 304SS Tubing, T.I.G. Welded and Plug
High speed rotary saw Dremel Model # 395
Rotary saw holder Dremel Model # 220
Rotary saw cut-off wheel Dremel Model # 409
Ocular sticks Lohmann-Rauscher Pro-ophta Ocular Sticks
Wet disinfectant Egis Betadine
Dry disinfectant Wagner Pharma Reseptyl-urea
Drilling machine NSK-Nakanishi United Kingdom Vmax35RV Pack
Anchoring screws Antrin Miniature Specialties, Inc. 000-120×1/16 SL BIND MS SS

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Citar este artículo
Kozák, G., Földi, T., Berényi, A. Chronic Transcranial Electrical Stimulation and Intracortical Recording in Rats. J. Vis. Exp. (135), e56669, doi:10.3791/56669 (2018).

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