Procédures d’ovaire Transplantation orthotopique pour étudier l’Influence de la durée de vie et de santé de la sénescence ovarienne chez les souris femelles

L’influence de reproduction sur la santé et de la durée de vie est souvent à tort pensé aussi restreint qu’à la période entourant la compétence reproduction. Tandis que le mode de vie et les phénotypes associés à la phase sexuellement compétente de la durée de vie sont facilement différenciés des phases préalables- et reproduction, statut reproductif influence santé pendant toutes les phases de la durée de vie. La période de reproduction compétence est souvent dénommée la durée de vie reproductive, se différencie de la durée de vie chronologique. Cette terminologie se prête à une séparation artificielle des deux désignations de durée de vie alors qu’en réalité, les deux sont étroitement liés entre eux avec des événements ayant une incidence sur celui, plus souvent qu’autrement, touchant aussi bien l’autre.

Preuves ces dix dernières années indiquent que le statut reproductif de l’individu est associée à un risque accru de développer des conditions de santé chroniques¹. Une étude documentée une association entre les durées de vie plus courtes et échec de la reproduction pour une cohorte d’hommes². L’association est encore plus frappante chez les femmes. Maladies cardiovasculaires sont rare chez les femmes préménopausées³, mais l’insuffisance ovarienne augmente les maladies cardiovasculaires nettement à la ménopause⁴ et chez les jeunes femmes avec une insuffisance ovarienne prématurée⁵. L’insuline résistance⁶ et la perte osseuse augmentent à la ménopause⁷ et presque deux-tiers des américains avec la maladie d’Alzheimer sont des femmes,⁸. Des changements bien définis dans les ovaires de signalisation marquent la transition d’un état de préménopause, résistant aux maladies, à un état après la ménopause, accablés de maladie. Cette transition stable, offre une occasion d’identifier les mécanismes qui permettent d’accélérer les risques de maladie au cours du vieillissement.

Récemment, la transplantation de tissu ovarien cryopréservé a été utilisée pour restaurer la fertilité des femmes qui subissent des procédures médicales qui peuvent mettre en danger les cellules germinales, tels que la chimiothérapie. Transplantation de tissu ovarien peut également être utilisée pour produire une descendance viable chez les animaux non-ovarien infertilité basés, y compris des souris transgéniques⁹. Transplantation d’ovaire est une méthode efficace pour séparer l’influence de la fonction de reproduction ou reproduction vieillissement du vieillissement chronologique en soi.

Le rôle de soutien bien établi pour les hormones ovariennes dans de nombreux aspects de la santé féminine implique la perte de production d’hormones du cyclisme activement les cellules germinales, comme la principale cause des risques accrus de maladie à la ménopause. Alors que la valeur des hormones ovariennes dans santé féminine est incontestable, remplaçant ces hormones en péri – et les femmes ménopausées a été peu fiable dans la restauration des avantages dont bénéficie les jeunes femmes avec jeunes ovaires. Ces bienfaits sont fiable restaurés par transplantation hétérochronique de jeunes ovaires de souris femelles reproduction^{10,11,12,13,14}.

Statut reproductif des souris donneur et du receveur doit être déterminée avant et après la transplantation ou procédures de l’ovariectomie. Souris de reproduction présomptives qui affichent des signes de gonades d’entrée avant l’intervention chirurgicale à l’âge de 12 mois sont exclus de ces expériences. Gonadique est déterminée par la cytologie vaginale. Données sur la cytologie vaginale sont prélevées avant l’intervention afin d’assurer un état de reproduction chez les souris destinataires et activement-recyclage des ovaires chez les souris de donateurs au moins 10 jours consécutifs. Un cycle oestral est défini comme la période de la journée nucléées cellules épithéliales apparaissent d’abord (c.-à-d., pro-oestrus) à la veille de la prochaine comparution de cellules épithéliales nucléées dans le frottis vaginal, s’il y a une période de leucocytaire présence (c.-à-d., dioestrus) entre les deux. Oestrus est déterminée par la présence de cellules épithéliales grands, squameuses, avec ou sans noyaux. Souris qui n’affichent aucune activité cyclique pour une période de 10 jours avant ou après la chirurgie sont déterminés à n’avoir aucune entrée gonadique pour ladite période. Souris qui affichent au moins un cycle oestral complet dans un délai de 10 jours avant ou après la chirurgie sont déterminés d’avoir entrée gonadique pour ladite période. Des souris femelles doivent être logés en présence de souris mâles ou exposés à la litière souillée de la cage du mâle pour assurer une exposition uniforme aux stimulations inductrices de cycle.

Ces procédures de transplantation sont mieux réalisées avec deux chirurgiens travaillant simultanément sur les donateurs et les bénéficiaires souris. Toutefois, les procédures sont facilement réalisées par un chirurgien, avec les ovaires de donateurs plus souvent récupérés avant de commencer la procédure de l’ovariectomie sur la souris destinataire. Ce protocole décrit la procédure pour le seul chirurgien. Exposition de l’appareil reproducteur et la fermeture du site se faites normalement sans microscope, tandis que l’enlèvement et le remplacement des ovaires se fait sous un microscope. Comme avec l’apprentissage de toute intervention chirurgicale, les sites d’incision peuvent être plus grands et chirurgies peuvent prendre plus de temps tout en premier apprentissage de la procédure et sera généralement diminuer avec l’expérience.