Um protocolo para medição de reatividade de Cue em um modelo do rato do transtorno de uso de cocaína

Transtorno de uso de cocaína (CUD) segue uma trajetória de auto-administração repetitiva durante o qual anteriormente estímulos neutros ganham incentivo valor¹. Reatividade de sinalização é a sensibilidade para as sugestões anteriormente ligados com a experiência de drogas, e que desempenha um papel proeminente no desejo humano^2,3,4,5. O risco de progressão para CUD, bem como recaída durante a abstinência, é pensado para ser mais elevado para os indivíduos que expressam a alta sensibilidade a drogas associadas pistas^6,7. Ambos os contextos ambientais (por exemplo, pessoas, prédios, gêneros musicais) e discretos associada a drogas estímulos (por exemplo, parafernália) tornar-se associado com a recompensa de cocaína; a exposição a estes tacos pode provocar alterações na fisiologia periférica (por exemplo, frequência cardíaca, temperatura da pele e resistência da pele), plasticidade cerebral e cérebro conectividade funcional^{2,8,9 ,10}. Em outras palavras, re-exposição à cocaína associada sugestões ativa o sistema límbico ritmicidade circuitos para evocar condicionadas respostas fisiológicas e subjetivas que impulsionam repetido abordagem (droga-procurando) comportamento^{11,12 ,13,14,15}.

Reatividade de sinalização medida com cérebro funcional, análise de imagem é preditiva de vulnerabilidade de recaída em indivíduos com RUMINA¹⁶. Medições de reatividade de sinalização em modelos de roedores servem como uma medida de substituto para o risco de recaída e pode ser explorado para estudos translacionais. Assim, uma farmacoterapia que diminui a reatividade de sinalização em roedores pode ser transportadas para a frente como um tratamento de prevenção de recaída em testes clínicos em humanos. Modelos pré-clínicos com o necessário mérito translacional e validade preditiva são especialmente importantes, uma vez que existem atualmente não farmacoterapias aprovado pela FDA para CUD¹⁷.

O procedimento de auto-administração roedor é o padrão-ouro, modelo de translação com validade preditiva para humano drogas¹⁸ e criticamente importante para a compreensão molecular e fisiológicas processos CUD subjacente. Resposta – entregaindependente dos resultados de cocaína em distintos efeitos comportamentais, neuroquímicos e moleculares em relação à resposta – exposiçãodependentes de cocaína; ex., entrega de cocaína resposta –independente evoca significativamente maior mortalidade¹⁹. Além disso, as consequências neuroquímicas da abstinência de resposta –dependentes cocaína auto-administração são distintas daqueles desencadeada pela abstinência de resposta –independente cocaína entrega^{20, 21}. assim, modelos CUD baseados na resposta – entregadependentes de cocaína são modelos de translação superiores ao avaliar a reatividade de sinalização e associado a mecanismos de ação.

O protocolo descrito abaixo, cocaína é entregue por via intravenosa através de um cateter permanente intra na jugular. No entanto, foram desenvolvidos métodos alternativos para auto-administrar drogas via oral e inalação de rotas. Importante, roedores controlam a entrega da droga, humanos análogos, através de respostas operante. Portanto, há alta concordância entre drogas auto administradas por roedores e humanos²². O procedimento de auto-administração de drogas pré-clínicos abaixo emprega alavanca pressionando, reforçado pela entrega da droga, para motivar as taxas de resposta mais elevadas do que o controle do veículo. Comportamento de busca de drogas é treinado por emparelhamento pistas originalmente “neutras” (por exemplo, uma luz de estímulo ou Tom e o ambiente contextual em cocaína auto-administração ocorre) com infusão de cocaína; Estes tacos tornar-se condicionado reinforcers (para revisão: Cunningham & Anastasio, 2014,²³). Posterior re-exposição à cocaína associada pistas desencadeia comportamento droga-procurando em roedores (i.e., tenta entregar cocaína através de pressionando a alavanca anteriormente-ativo), bem como a ânsia e a recaída no CUD assuntos^{24, 25 , 26 , 27}.

Normalmente, os estudos pré-clínicos de roedores de comportamento droga-procurando seguir a auto-administração de cocaína utilizam reintegração de formação e/ou drogas de extinção conduzida dentro do ambiente associada a drogas^{28,29, 30 , 31 , 32}. pressiona a alavanca de ativos anteriormente, na ausência de entrega de drogas e/ou sugestão, normalmente constituem a medida de reintegração após extinção^33,34,35. Pelo contrário, comportamento de busca de drogas deixa reatividade é avaliada seguinte abstinência forçada sem prévia extinção formação^{28,36,37,38,39} .

Desfechos e variáveis experimentais foram cuidadosamente escolhidas e validadas para dissecar os diferentes aspectos da neurobiologia do comportamento de busca de drogas e recaída-como, e é bem estabelecido que o neuroadaptations diferentes entre modelos com e sem extinção formação ^40,41,42,43. Além disso, numa perspectiva de translação, formação de roedores extinção não é espelhada em ambientes clínicos para CUD desde as sugestões relacionadas com a droga incluem Estados de humor, lugares e pessoas,⁴⁴; a exclusiva combinação destes tacos são provavelmente não está disponível em um ambiente clínico^45,46,47. Assim, o modelo de roedor aqui descrito atua como um melhor paralelo à condição humana do que muitos dos modelos atualmente disponíveis.

A seguir descreve um treinamento de auto-administração de cocaína validado, abstinência forçada e reatividade de sinalização teste protocolo para ratos. Brevemente, ratos são implantados com cateteres intra jugular, treinados para auto-administrar cocaína ou solução salina via imprensa alavanca ‘ativo’, e a recepção do estímulo cocaína ou soro fisiológico é emparelhada com discretos sinais de luz e som que servem como reinforcers condicionados. Após 14 dias de auto-administração de cocaína, ratos são submetidos a 30 dias de abstinência forçada e um teste de reactividade subsequentes 60-min deixa no qual alavanca é medida urgente. O teste de reatividade de sinalização é uma medida de substituto para a vulnerabilidade de recaída de cocaína em humanos.