Summary

एक उपन्यास पद्धति का उपयोग करते हुए मुक्त नवजात चूहों को उड़ाने में ईईजी रिकॉर्डिंग

Published: May 29, 2017
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Summary

यहां, हम नवजात शिशु पिल्ले को स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ने में इलेक्ट्रोएन्सेफालोग्राफी (ईईजी) को रिकॉर्ड करने के लिए डिजाइन की गई एक नई तकनीक का परिचय देते हैं और इसकी प्रक्रियाओं, विशेषताओं और अनुप्रयोगों का वर्णन करते हैं। यह विधि 1 सप्ताह से अधिक के लिए ईईजी को रिकॉर्ड करने की अनुमति देता है।

Abstract

मस्तिष्क में विद्युत गतिविधि का पता लगाने के लिए ईईजी एक उपयोगी तरीका है। इसके अलावा, यह विभिन्न न्यूरोलॉजिकल परिस्थितियों के लिए एक व्यापक रूप से प्रयोग किया जाने वाला निदान उपकरण है, जैसे मिर्गी और neurodegenerative विकार। हालांकि, नवनीतियों में ईईजी रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए तकनीकी रूप से मुश्किल है क्योंकि इसमें विशेष संचालन और महान देखभाल की आवश्यकता होती है। यहां, हम नवजात चूहे पिल्ले (पी 8-पी 15) में ईईजी रिकॉर्ड करने के लिए एक उपन्यास विधि पेश करते हैं। हमने कंप्यूटर पिन लोकी का उपयोग करके एक साधारण और विश्वसनीय इलेक्ट्रोड बनाया है; यह आसानी से सामान्य और मिर्गीय मस्तिष्क में उच्च गुणवत्ता वाले ईईजी संकेतों को रिकॉर्ड करने के लिए चूहे के पिल्ला की खोपड़ी में लगाया जा सकता है। पिल्ले को मिरगी के दौरे को प्रेरित करने के लिए न्यूरोटॉक्सिन कैनीक एसिड (केए) के इंट्राप्टेरटोनियल (आईपी) इंजेक्शन दिया गया था। नवनीतियों के लिए अन्य ईईजी प्रक्रियाओं की तुलना में इस प्रक्रिया में किया गया शल्य प्रत्यारोपण कम महंगा है। यह विधि 1 से अधिक सप्ताह के लिए उच्च गुणवत्ता वाले और स्थिर ईईजी संकेतों को रिकॉर्ड करने की अनुमति देता है। इसके अलावा, इस प्रक्रिया को वयस्क आरए पर भी लागू किया जा सकता हैमिर्गी या अन्य तंत्रिका संबंधी विकारों का अध्ययन करने के लिए टीएस और चूहों।

Introduction

यह अच्छी तरह से स्थापित है कि सामान्य मस्तिष्क समारोह प्राप्त करने के लिए न्यूरॉन्स के बीच निरंतर संचार आवश्यक है। इंटर्न्योरोनल कम्युनिकेशन मुख्य रूप से सिंकैप्स पर होता है, जहां एक न्यूरॉन से जानकारी दूसरे न्यूरॉन को दी जाती है। यह अन्तर्ग्रथनी संचरण दो प्रकार की समर्पित संरचनात्मक व्यवस्थाओं द्वारा मध्यस्थता है: विद्युत या रासायनिक synapses 1 इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी एक ऐसा क्षेत्र है जो इंटर्न्योरोनियल संचार के दौरान विद्युत उत्पादन को हासिल करता है जो समग्र शरीर के कार्यों और व्यवहार 2 को नियंत्रित करता है। ईईजी कई इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल तकनीकों के बीच सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है।

ईईजी एक तकनीक है जो आंतरिक या बाहरी उत्तेजनाओं द्वारा उत्पादित बिजली के संकेतों में परिवर्तन का पता लगाता है। इसके अलावा, यह नैदानिक ​​निदान के लिए एक अनिवार्य परीक्षण है और विभिन्न न्यूरोलॉजिकल स्थितियों जैसे कि मिर्गी, पार्किंसंस और अल्जाइमर के रोगों का परिणाम भविष्यवाणीई, साथ ही साथ औषधीय और विषैले एजेंटों के प्रभाव 3 । आम तौर पर, एक मिर्गीक रोगी मस्तिष्क के भीतर hyperexcitability और बिगड़ा फंक्शनल कनेक्टिविटी दिखाता है; इन्हें इंटरक्टल एपिलेप्टीफॉर्म डिस्चार्ज (आईईडी) के रूप में संक्षेप किया जाता है और ईईजी द्वारा तेज़, क्षणिक स्पाइक्स के रूप में दर्ज किया जा सकता है; तेज लहरें; स्पाइक-वेव परिसरों; या पॉलीस्पॉक्स 4 मिरगी मस्तिष्क की मुख्य विशेषता मिरगी बरामदगी की सहज घटना होती है, जो दौरे के लिए जिम्मेदार मस्तिष्क क्षेत्र का पता लगाने के लिए खोपड़ी या मस्तिष्क पैरेन्काइमा से या तो दर्ज की जा सकती है। इसके अलावा, अल्जाइमर रोग (एडी) जैसे neurodegenerative विकारों में ईईजी का भी बहुत महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। अनुसंधान से पता चलता है कि एडी रोगियों में ईईजी रिकॉर्डिंग और बिगड़ा हुई आसन्न नेटवर्क सामान्य हैं। हालांकि, neurodegenerative रोगों में नेटवर्क दोलनों के रोगविज्ञान के बारे में हमारा ज्ञानहै आश्चर्यजनक रूप से अधूरा और आगे की खोज की जानी चाहिए 6

इस प्रोटोकॉल में हमने एक साधारण इलेक्ट्रोड तैयार किया है जिसके साथ ईईजी को सामान्य और रोग दोनों में विद्युत संचार को समझने के लिए रिकॉर्ड किया जा सकता है। इस विधि में सर्जिकल इम्प्लीमेंटेशन अन्य उपलब्ध प्रक्रियाओं की तुलना में सस्ता है 7 । इसके अलावा, इस पद्धति का उपयोग लंबे समय तक सीमा के लिए उच्च गुणवत्ता और स्थिर ईईजी संकेतों को रिकॉर्ड करने के लिए किया जा सकता है ( यानी, प्रत्येक सप्ताह 2-4 घंटे प्रति दिन)। इसके अलावा, हम हल्के इलेक्ट्रोड (लगभग 26 मिलीग्राम वजन वाले) का इस्तेमाल करते थे जो जानवरों को अधिक स्वाभाविक रूप से व्यवहार करने में सक्षम करते हैं 8 । यह विधि नवजात शिशु के पिल्ले में ईईजी के अध्ययन के लिए व्यापक रूप से लागू होती है, जिसे एम्पलीफायर और डिजिटाइज़र की आवश्यकता होती है, आमतौर पर इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी लैब में इस्तेमाल होता है और किसी भी अतिरिक्त डिवाइस की आवश्यकता नहीं होती है।

Protocol

पशु चिकित्सा, शल्य प्रक्रिया, और रिकॉर्डिंग प्रक्रियाएं दक्षिण चीन सामान्य विश्वविद्यालय पशु देखभाल और उपयोग समिति के दिशानिर्देशों के अनुसार थीं। 1. इलेक्ट्रोड तैयारी (चित्रा 1 ए-सी) <p class="jo…

Representative Results

यदि उपरोक्त शल्यचिकित्सा प्रक्रिया ठीक से आयोजित की जाती है, तो एक चैनल चूहे नवजात पिल्ला ईईजी रिकॉर्डिंग सफलतापूर्वक किया जाएगा। केए इंजेक्शन के 10 मिनट बाद, अनियमित आंदोलनों और खरोंच, …

Discussion

यहां, हम वायर्ड विधि ( चित्रा 3 ) द्वारा नवजात शिशु के पिल्ले को स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ने में ईईजी प्राप्त करने के लिए सर्जिकल और रिकॉर्डिंग प्रक्रिया की रिपोर्ट करते हैं। यह सुझाव दिया गया है कि प…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

यह काम चीन के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (31171355) और गुआंगडोंग के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (एस2011010003403, 2014 ए 3030343440) द्वारा समर्थित था।

Materials

Computer pin
Pincer DELI Group Co., Ltd.
502 super glue DELI Group Co., Ltd. 7144
Drying oven Boxun GZX-9140MBE
Isofluorane RWD Life Science 902-0000-522
Stereotaxic apparatus RWD Life Science 900-0068-507
Anesthesia apparatus RWD Life Science 902-0000-510
Homeothermic Heating Device Harvard Apparatus K 024509
Amplifier Model 3000  A-M Systems 61558
Micro1401 Analog Digital converter Cambridge Electronic Design Ltd. 4383 Data acquisition unit
Spike2 Cambridge Electronic Design Ltd.

Referencias

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Huo, Q., Tabassum, S., Misrani, A. A., Long, C. Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method. J. Vis. Exp. (123), e55489, doi:10.3791/55489 (2017).

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