תכנות מחדש מותנה של תאי אפיתל ושט האדם Pediatric לשימוש בהנדסת רקמות וחקירת מחלות

הנדסת רקמות בושט דלקת ושט אאוזינופילית (EOE) הייתה במוקד המחקר במעבדות רבות בעשור האחרון. מומים מולדים, כגון atresia ושט, נראים כ 1 ב -4,000 לידה חייה, שתוצאתה הפיתוח השלם של הוושט המוביל את חוסר היכולת לאכול ^1. שכיחות ושכיחות EOE היו במגמת עלייה מאז זיהוי של הישות המחלה בשנת 1993. תחולת EOE נע בין 0.7 כדי 10 / 100,000 לנפש שנים והשכיחות נע מ -0.2 כדי 43 / 100,000 ^2. גישה כירורגית אטרקטיבית חדשה בטיפול atresia ושט פער ארוך מורכבת ביצירת מבני רקמות להשתלת ניצול התא של החולה עצמו. תאים אלה בשיתוף עם פיגומים סינטטיים יפיקו מבנה עצמי שאינו דורש דיכוי מערכת חיסוני. חלק מהקבוצות כבר החלו לחקור את לנודואר של תאים דמויי גזע עבור הנדסת רקמות ושט ³ וכן שימוש בתאי אפיתל ושט יליד לאכלס מחדש את הרירית ^{4 – 7.} מחלות שנמצאים הוושט של מטופלים ילדים הם לעתים קרובות קשה לאבחן או ללמוד ללא התערבות. יתר על כן, מודלים של בעלי חיים תוך ניצול או במבחנה הנציחו מודלי שורת תאים למחל ילדים כמו EOE לא להקיף את בהיווצרות המחלה המדויקת או הבדלים מסוימים חולה ^8. לכן, היכולת ללמוד תהליך מחלתו של מטופל במבחנה כדי לזהות אנטיגנים מפעילים מחלה ספציפי, להעריך מנגנונים ולחקור טיפולים תרופתיים יהיה רומן ולספק לרופאים עם מידע שיכול לסייע בטיפול בחולה.

היו הרבה סוגי תאים עצמיים או חולה ספציפי כי הוצעו לשימוש tissuהנדסת דואר ולומד בהיווצרות מחלה אנושית. עם זאת, חלק של סוגי תאים אלו מוגבלים ביכולת שלהם לייצר מספיק תאים של פנוטיפ ספציפי זרע פיגום גדול או לבצע העברת נתונים גבוהות במבחנה. השימוש בתאי גזע פלוריפוטנטיים או מולטיפוטנטיים כבר נושא לדיון מחקר רב, עם זאת, מגבלות וליקויים עבור באמצעות תאים אלה כבר היטיב לתאר ^9. השימוש בתאי גזע עובריים אנושיים הוא התווכח מאוד ומציג שאלות אתיות רבות. והחשוב מכל, תאים אלה יוצרים teratomas, דומי גידול, אם הם אינם מובחנים מן פלוריפוטנטיים מדינתם לפני מתן אותם שורת חיים ^10. יתר על כן, השימוש בתאי גזע עובריים לא יהיה חולה ספציפי ויכול לעורר תגובה אלוגנאית וצורך דיכוי מערכת חיסוני ^10. תאי גזע מושרים (iPSCs) הם תאים פלוריפוטנטיים שיכולהלהיות שמקורם בתאים עצמו חולה. תאים סומטיים, כגון תאי עור, יכולים להיגרם למדינה פלוריפוטנטיים תוך שימוש במגוון של טכניקות אינטגרטיבית בלתי משתלבות. תאים אלה לשמש מקורות תא ספציפי לחולה עבור הנדסת רקמות או חקירת מחלה. השילוב של חומר גנטי לא רצוי לתוך התאים אלה הוא דאגה רבה תארה וגם אם רצפים הם הוסרו לחלוטין iPSCs להופיע לשמר אפיגנטיים "זיכרון" לקראת סוג התא שממנו הם נגזרו ^11. תאים אלה גם יהוו teratomas in vivo אם לא הבדיל לפני ההשתלה ^11. פרוטוקולי בידול רבים נחקרו התמקדות שושלות אפיתל ^{12, 13, 14,} לעומת זאת, חשוב מאוד לציין כי סוגי התא וכתוצאה מכך בסוף הבידול אינם עשויים מקשה אחת ו- Only להחזיק חלק מן סוג התא של עניין. התוצאה היא תשואה נמוכה והצורך לטהר את סוג התא הרצוי. למרות iPSCs הוא מקור תא חולה ספציפי פוטנציאל, התהליך כדי לקבל סוג תא של עניין עבור הנדסה או רקמות או חקירת מחלה הוא מאוד לא יעיל.

תאי אפיתל אדם בודדו בהצלחת ממגוון הוא לרקמות חולות ולא חולה בגוף האדם כולל: ריאות ^15, שד ^16, מעי דק ^17, מעי גס ^18, שלפוחית שתן ¹⁹ ו ^-20 ושט. חשוב לציין כי תאים ראשוניים אדם יש מספר סופי של הקטעים שבהם הפנוטיפ נשמר ^{21, 22.} למרבה הצער, זה אומר כי מספר התאים הדרושים לחקירת מחלה או זריעת פיגום מהונדסלהשתלה לא יכול להיות מושגת. לכן, טכניקות חדשות נדרשות להרחיב תאי מטופל, תוך שמירה על פנוטיפ אפיתל. תכנות מחדש מותנה של תאי אפיתל תקינים ותאי סרטן ניצול מזין תאים ו מעכב ROCK תוארה בשנת 2012 על ידי Liu et al. ^{2 3.} טכניקה זו נוצלה כדי להרחיב לתאי האפיתל סרטניים המתקבלים ביופסיות של סרטן הערמונית וסרטן השד באמצעות תאי מזין מוקרנים, מעכב ROCK ובינוני תכנות מחדש על תנאי. המטרה היתה לייצר תאים מספיק עבור מבחני חוץ גופית כגון הקרנת סמים. טכניקה זו מסוגלת הרחבת תאי אפיתל ללא הגבלת זמן על ידי "תכנות מחדש" של תאים אלה גבעול או המדינה- כמו אבי, שהוא שגשוג מאוד. הוכח כי התאים האלה הם בלתי tumorigenic ואינם בעלי יכולת לגבש teratomas ^{23, 24.} יתר על כן, לאפגמים בכרומוזומים או מניפולציות גנטיות נכחו לאחר passaging תאים אלה בתרבות באמצעות טכניקה זו ^{23, 24.} והחשוב מכל, תאים אלה הם רק מסוגלים להתמיין לסוג תא יליד העניין. לכן, טכניקה זו מציעה מאגר גדול של תאי אפיתל מטופל ספציפי לחקירת מחלה או הנדסת רקמות ללא צורך הנצחה.

קבלת רקמות אפיתל מאיבר מסוים על מנת ללמוד תהליכי מחלה עשויה להיות מצומצמת ולא תמיד אפשרית בשל סיכון מטופל. עבור אותם חולים הסובלים ממחלת ושט או פגמים, תחזור ביופסיה אנדוסקופית היא גישה פולשנית להשגת רקמת אפיתל שניתן ניתקת לתכנות מחדש על התנאי לספק מקור תא מוגדר ספציפי הרירי של אותו הוושט חולה. אז זה מאפשר ללימודי חוץ גופיתשל תאי אפיתל להעריך תהליכי מחלה ומסך עבור הרפוי פוטנציאלי. תהליך המחלה אחד שיכול להפיק תועלת רבה מן גישה זו היא דלקת ושט אאוזינופילית, אשר תוארה מחלות אלרגיות של הוושט ^8. בדיקות אלרגיה כמו גם גישות טיפוליות ניתן היה להעריך במבחנה תוך שימוש בתאי האפיתל של החולה עצמו ונתונים אלה לאחר מכן ניתן עברו על הרופא המטפל לפתח תוכניות טיפול אישיות. הטכניקה של תכנות מחדש מותנה בשיתוף עם קבלת ביופסיות אנדוסקופיות מחולי ילדים מציעה את היכולת להרחיב את תאי אפיתל ושט נורמלים ללא הגבלה זמן מכל חולה. מקור תא זה יכול אפוא להיות חבריו בפיגום טבעי או סינטטי לספק אפשרות כירורגית מטופל ספציפי עבור פגמים, מחלה או טראומה. לאחר מספר תאים בלתי מוגדר יעזור להנדס בונת ושט המשתלטת על reseeded לחלוטיןלומן עם תאי אפיתל הוושט כדי לעזור להקל על התחדשות של תאים מסוגים הנותרים.