نحن تصف طريقة موثوقة لimmunolocalization داخل البشرة معدلة لكلا الفرعين البارافين المجمد والتي نستخدمها بشكل روتيني جدا في المختبر لدينا.
Abstract
في البشرة ، المناعية هو وسيلة فعالة لإضفاء الطابع المحلي على بروتينات محددة لمقصورة على التعبير النسبية ، وتحديدا في القاعدية ، suprabasal ، والطبقة المتقرنة طبقات. توطين بالضبط داخل البشرة من بروتين معين يضفي القرائن تجاه دورها الوظيفي داخل البشرة. في هذا الفصل ، ونحن تصف طريقة موثوقة لimmunolocalization داخل البشرة تعديل لكلا الفرعين البارافين المجمد والتي نستخدمها بشكل روتيني جدا في المختبر لدينا. أقسام البارافين توفير أفضل بكثير عموما التشكل ، وبالتالي نتائج متفوقة والصور الفوتوغرافية ، ولكن ليس كل الأجسام المضادة ستعمل مع التثبيت والمعاملة القاسية التي ينطوي عليها معالجتها. لذلك ، يتم أيضا تضمين البروتوكول لsectioning المجمدة. في غضون sectioning البارافين ، توصف بروتوكولات تثبيت اثنين (بوين وبارافورمالدهيد) ، وسيتم اختيار تثبيتي علاقة مباشرة للمواصفات والأجسام المضادة قد تتطلب تحديد طريقة أخرى.
Protocol
بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في البروتوكولات سبرينغر .
Troy, T., Arabzadeh, A., Enikanolaiye, A., Lariviere, N., Turksen, K. Immunohistochemistry on Paraffin Sections of Mouse Epidermis Using Fluorescent Antibodies. J. Vis. Exp. (11), e552, doi:10.3791/552 (2008).