Summary

Автоматическое обнаружение высокоорганизованной Theta колебаний в мышиной EEG

Published: March 10, 2017
doi:

Summary

Theta activity in the hippocampus is related to specific cognitive and behavioral stages. Here, we describe an analytical method to detect highly-organized theta oscillations within the hippocampus using a time-frequency (i.e., wavelet analysis)-based approach.

Abstract

Тета-активности генерируется в septohippocampal системе и могут быть записаны с использованием глубоких intrahippocampal электродов и имплантируемый электроэнцефалографии (EEG) радиотелеметрические или тросовой системы подходов. Фармакологически, гиппокамп тета неоднородна (см дуалистической теории) и могут быть дифференцированы в типа I и типа II тета. Эти отдельные подтипы ЭЭГ связаны с конкретными когнитивных и поведенческих состояний, таких как возбуждение, разведка, обучение и память, высших интегративных функций и т.д. В нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, структурные и функциональные изменения в septohippocampal системы может привести к нарушению тета-активности / колебания. Стандартный количественный анализ гиппокампа ЭЭГ включает в себя Fast-Фурье-преобразование (FFT) основе частотного анализа. Тем не менее, эта процедура не дает подробные сведения о тета-активности в целом и высоко организованных колебаний тета, в частности. Для того чтобы получить DETAILED информация о высокоорганизованных колебаний тета в гиппокампе, мы разработали новый аналитический подход. Такой подход позволяет времени и экономически эффективной количественной оценки длительности высокоорганизованных колебаний тета и их частотных характеристик.

Introduction

Тета активность в мозге связаны с различными когнитивными и функциональных состояний, в том числе возбуждение, внимание, добровольное движение, исследовательское поведение, поведение внимания, обучения и памяти, интеграция соматосенсорной и быстрым движением глаз (REM) сна 1, 2. В принципе, тета-активность в качестве ритмического лица могут быть получены в различных регионах головного мозга и имеет высокую степень организации и синхронизированы, как тета колебаний. Ниже мы остановимся на анализе и количественной оценки тета – активности / колебаний, которые генерируются в системе septohippocampal 3, 4. В перегородке, ГАМК, глутаматэргическую и холинергические нейроны проекта в гиппокампе и внести свой вклад в инициации и поддержании тета колебательного поведения. Существует постоянная дискуссия о том инициируются гиппокамп тета – колебаний в перегородке, т.е. </em> Септального кардиостимулятор-гиппокампа модель последователем, (extrahippocampal теория) или внутренне в гиппокампе (intrahippocampal теория) 5, 6, 7.

Независимо от их происхождения, гиппокампа колебания тета были в фокусе интереса в течение многих лет, особенно в моделях трансгенных мышей. Эти модели позволяют имплантации глубоких ЭЭГ электродов и для записи гиппокампа колебаний тета при определенных когнитивных и поведенческих задач 8. Гиппокампа тета колебания неоднороден по своей природе. На основе так называемой дуалистической теории тета – колебаний, можно различать атропин-чувствительный тип II тета и атропин нечувствительным типа I тета 9, 10, 11. Последнее может обычно быть индуцирован мускариновых М 1 / М <sагонисты> 3 рецептора UB, например, ареколин, пилокарпин и уретан. Тем не менее, уретан является многопрофильным целевой препарат, который, помимо мускариновых активации, а также оказывает комплексное воздействие на других субъектов ионных каналов. Для типа II тета, мускариновый путь включает в себя активацию M 1 / M 3 и последующий G Q / 11 (Gα) -опосредованного активация фосфолипазы С β 1/4 (PLCβ 1/4), инозитолтрифосфат (ИНСп 3) , diacylglycerole (ДАГ), Са 2+, и протеинкиназы С (ПКС). Роль PLCβ 1 и PLCβ 4 в thetagenesis была подтверждена в нокаут-исследованиях с использованием PLCβ1 – / – и PLCβ4 – / – мышей , проявляющие полную потерю или значительное ослабление тета – колебаний 12, 13, 14. Дополнительный М 1, М 3 и М 5 вниз по течению цели (Channels / токи) мускариновых сигнального каскада включают в себя различные проводимостей, такие как M-типа K + канала (К М) через зависящие от напряжения K + канала (K v 7); медленно после гиперполяризации K + канала (Кз АХП); утечка K + канал (утечки K), вероятно , через ебаня связанных с кислотно-чувствительных K + канал (TASK1 / 3); Катион тока (I CAT), вероятно , через канал утечки Na + (NALCN); и я ч с помощью гиперполяризации и циклических нуклеотидов закрытого типа каналов (HCN). Кроме того, были представлены рецепторы M 2 / M 4 ацетилхолина (АХР) вмешиваться внутрь выпрямителя K + канала 3.1 (К ир 3.1) и внутреннего выпрямителя K + канала 3.2 (K ир 3.2) 15.

В настоящее время коммерчески доступным аналитическое программное обеспечение позволяет быстро частотного анализа на основе быстрого преобразования Фурье, например, анализ мощности (P, мВ 2)или спектральная плотность мощности (PSD, 2 мВ / Гц). Мощность или спектральная плотность мощности (PSD) анализ диапазона частот тета дает лишь общий обзор своей деятельности. Тем не менее, для того, чтобы получить подробное представление о когнитивных и поведения, связанных с тета-активности, анализ высокоорганизованных колебаний тета является обязательным. Оценка высокоорганизованных колебаний тета имеет центральное значение в области нейродегенеративных и психоневрологических заболеваний. Большинство исследований экспериментальные заболевания проводят в трансгенных мышах с использованием высоко-сложные нейрохирургические подходы к записи эпидуральную поверхности и глубоких внутримозговых EEGs. Эти методы включают в себя как страховочного троса системы 16 и радиотелеметрическая установок 17, 18. Тета колебания могут быть записаны как спонтанных, так и поведения, связанных с тета-колебаний при условиях длительной записи. Кроме того, тета колебания могут быть выздоровеетrded следующие фармакологической индукции, но и после облучения животных в поведенческих или когнитивных задач или на сенсорные стимулы, такие, как хвост щипать.

Ранние подходы к характеризуют тета колебания были описаны Csicsvari и др. 19. Авторы разработали полуавтоматический инструмент для краткосрочного анализа тета (15 – 50 мин), что не подходит для длительного времени записи ЭЭГ. Наш метод, описанный здесь, позволяет проводить анализ долгосрочных ЭЭГ записи> 48 ч 20. Csicsvari и др. 10 также называется отношением тета-дельта, но никакого порога для определения высокоорганизованных колебаний тета не предусмотрено. Определения диапазона дельта и тета совпадают с нашими определениями диапазона частот. Как не упоминается, мы исходим из того, что метод FFT на основе используется Csicsvari и др. чтобы рассчитать мощность тета-дельта-диапазонов частот. Этаопять явно отличается от нашего метода, так как мы рассчитать на основе вейвлет-амплитуд на большом числе частотных шкал (частота шагов A (F) = 0,05 Гц), что приводит к гораздо более высокой точностью. Продолжительность индивидуально-анализируемой EEG эпохи подобна нашему определению.

Klausberger и др. 21 также используют соотношения тета-дельта для анализа долгосрочных записей ЭЭГ. Тем не менее, существуют три основных отличия по сравнению с нашим подходом: I) длительность эпохи EEG гораздо больше, то есть, по крайней мере , 6 лет; II) отношение тета-дельта установлен в положение 4, что значительно выше, чем нашего порога, и связан с различными определениями диапазона частот; и III) определение мощности может быть основано на подходе FFT, который испытывает недостаток в высокой точности, особенно для очень коротких временных окон (2 с, то есть, 5 циклов для колебаний с частотой 2,5 Гц). В таких случаях процедура вейвлет на основе более рекомендуется.Исследование, проведенное Капланом и др. 22 исключительно рассчитывается мощность тета, игнорируя при этом отношение мощности тета-дельта. Таким образом, Каплан приближения 22 не может различать когнитивных тета богатых процессов , сопровождающихся высокой или низкой дельты.

В следующем протоколе, мы представим наш аналитический подход сейсмического импульса на основе надежного анализа высокоорганизованных колебаний тета в гиппокампа записи ЭЭГ у мышей. Так как эта процедура работает автоматически, он может быть применен к большим наборам данных и долгосрочных измерений ЭЭГ.

Protocol

Все эксперименты на животных проводили в соответствии с руководящими принципами местного и организационного совета по уходу за животными (Боннский университет, BfArM, LANUV, Германия). Кроме того, все эксперименты на животных проводили в соответствии с законодательством вышестоящего, на…

Representative Results

Тета-активность может быть записана в широком диапазоне центральной нервной системы (ЦНС) областей. Здесь мы представляем анализ тета колебаний от мышиного гиппокампа. Такие колебания могут происходить во время различных поведенческих и когнитивных состояний. Насто…

Discussion

Тета активность центральной значимости в системной нейрофизиологии. Это можно наблюдать в различных областях мозга, особенно в гиппокампе, где оно связано с конкретными поведенческими и когнитивными состояниями. Кроме того, гиппокамп тета могут быть дифференцированы в фармакологиче…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors would like to thank Dr. Christina Ginkel (German Center for Neurodegenerative Diseases, DZNE) and Dr. Robert Stark (DZNE) for their assistance with animal breeding and animal healthcare. This work was financially supported by the Federal Institute for Drugs and Medical Devices (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM), Bonn, Germany.

Materials

Carprofen (Rimadyl VET – Injektionslösung) Pfizer PZN 0110208208 20ml
binocular surgical magnification microscope Zeiss Stemi 2000 0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000
Dexpanthenole (Bepanthen Wund- und Heilsalbe) Bayer PZN: 1578818
drapes (sterile) Hartmann PZN 0366787
70% ethanol Carl Roth 9065.5
0.3% / 3% hydrogene peroxide solution Sigma 95321 30% stock solution
gloves (sterile) Unigloves 1570
dental glas ionomer cement KentDental /NORDENTA 957 321
heat-based surgical instrument sterilizer F.S.T. 18000-50
high-speed dental drill Adeor SI-1708
Inhalation narcotic system (isoflurane) Harvard Apparatus GmbH 34-1352, 10-1340, 34-0422, 34-1041, 34-0401, 34-1067, 72-3044, 34-0426, 34-0387, 34-0415, 69-0230
Isoflurane Baxter 250 ml PZN 6497131
Ketamine Pfizer PZN 07506004
Lactated Ringer's solution (sterile) Braun L7502
Nissl staining solution Armin Baack BAA31712159
pads (sterile) ReWa Krankenhausbedarf 2003/01
Steel and tungsten electrodes parylene coated FHC Inc., USA UEWLGESEANND
stereotaxic frame Neurostar 51730M ordered at Stoelting
(Stereo Drive-New Motorized Stereotaxic)
tapes (sterile) BSN medical GmbH & Co. KG 626225
TA10ETA-F20 DSI 270-0042-001X Radiofrequency transmitter 3.9 g, 1.9 cc, input voltage range ± 2.5 mV, channel bandwidth (B) 1-200 Hz, nominal sampling rate (f) 1000 Hz (f = 5B) temperature operating range 34-41 °C warranted battery life 4 months
TL11M2-F20EET DSI 270-0124-001X Radiofrequency transmitter 3.9 g, 1.9 cc, input voltage range ± 1.25 mV, channel bandwidth (B) 1-50 Hz, nominal sampling rate (f) 250 Hz (f = 5B) temperature operating range 34-41 °C warranted battery life 1.5 months
Vibroslicer 5000 MZ Electron Microscopy Sciences 5000-005
Xylazine (Rompun) Bayer PZN: 1320422
Matlab Mathworks Inc. programming, computing and visualization software
SPSS IBM statistical analysis software

Referencias

  1. Vanderwolf, C. H. Hippocampal electrical activity and voluntary movement in the rat. Electroencephalogr Clin Neurophysiol. 26, 407-418 (1969).
  2. Kahana, M. J., Seelig, D., Madsen, J. R. Theta returns. Curr Opin Neurobiol. 11, 739-744 (2001).
  3. Varga, V., et al. The presence of pacemaker HCN channels identifies theta rhythmic GABAergic neurons in the medial septum. J Physiol. 586, 3893-3915 (2008).
  4. Takano, Y., Hanada, Y. The driving system for hippocampal theta in the brainstem: an examination by single neuron recording in urethane-anesthetized rats. Neurosci Lett. 455, 65-69 (2009).
  5. Goutagny, R., Manseau, F., Jackson, J., Danik, M., Williams, S. In vitro activation of the medial septum-diagonal band complex generates atropine-sensitive and atropine-resistant hippocampal theta rhythm: an investigation using a complete septohippocampal preparation. Hippocampus. 18, 531-535 (2008).
  6. Manseau, F., Goutagny, R., Danik, M., Williams, S. The hippocamposeptal pathway generates rhythmic firing of GABAergic neurons in the medial septum and diagonal bands: an investigation using a complete septohippocampal preparation in vitro. J Neurosci. 28, 4096-4107 (2008).
  7. Hangya, B., Borhegyi, Z., Szilagyi, N., Freund, T. F., Varga, V. GABAergic neurons of the medial septum lead the hippocampal network during theta activity. J Neurosci. 29, 8094-8102 (2009).
  8. Siwek, M. E., et al. Altered theta oscillations and aberrant cortical excitatory activity in the 5XFAD model of Alzheimer’s disease. Neural Plast. 2015, 781731 (2015).
  9. Buzsaki, G. Theta oscillations in the hippocampus. Neuron. 33, 325-340 (2002).
  10. Buzsaki, G., et al. Hippocampal network patterns of activity in the mouse. Neurociencias. 116, 201-211 (2003).
  11. Buzsaki, G., Moser, E. I. Memory navigation and theta rhythm in the hippocampal-entorhinal system. Nat Neurosci. 16, 130-138 (2013).
  12. Shin, J. Theta rhythm heterogeneity in humans. Clin Neurophysiol. 121, 456-457 (2010).
  13. Shin, J., et al. Phospholipase C beta 4 in the medial septum controls cholinergic theta oscillations and anxiety behaviors. J Neurosci. 29, 15375-15385 (2009).
  14. Shin, J., Kim, D., Bianchi, R., Wong, R. K., Shin, H. S. Genetic dissection of theta rhythm heterogeneity in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 102, 18165-18170 (2005).
  15. Brown, D. A., Adams, P. R. Muscarinic suppression of a novel voltage-sensitive K+ current in a vertebrate neurone. Nature. 283, 673-676 (1980).
  16. Senkov, O., Mironov, A., Dityatev, A. A novel versatile hybrid infusion-multielectrode recording (HIME) system for acute drug delivery and multisite acquisition of neuronal activity in freely moving mice. Front Neurosci. 9, 425 (2015).
  17. Lundt, A., et al. EEG Radiotelemetry in Small Laboratory Rodents: A Powerful State-of-the Art Approach in Neuropsychiatric, Neurodegenerative, and Epilepsy Research. Neural Plast. 2016, 8213878 (2016).
  18. Papazoglou, A., et al. Non-restraining EEG radiotelemetry: epidural and deep intracerebral stereotaxic EEG electrode placement. J Vis Exp. (112), (2016).
  19. Csicsvari, J., Hirase, H., Czurko, A., Buzsaki, G. Reliability and state dependence of pyramidal cell-interneuron synapses in the hippocampus: an ensemble approach in the behaving rat. Neuron. 21, 179-189 (1998).
  20. Muller, R., et al. Atropine-sensitive hippocampal theta oscillations are mediated by Cav2.3 R-type Ca2+ channels. Neurociencias. 205, 125-139 (2012).
  21. Klausberger, T., et al. Brain-state- and cell-type-specific firing of hippocampal interneurons in vivo. Nature. 421, 844-848 (2003).
  22. Caplan, J. B., Madsen, J. R., Raghavachari, S., Kahana, M. J. Distinct patterns of brain oscillations underlie two basic parameters of human maze learning. J Neurophysiol. 86, 368-380 (2001).
  23. Montgomery, S. M., Buzsaki, G. Gamma oscillations dynamically couple hippocampal CA3 and CA1 regions during memory task performance. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 14495-14500 (2007).
  24. Kronland-Martinet, R., Morlet, J., Grossman, A. Analysis of sound patterns through wavelet transform. Int J Pattern Recognit Artif Intell. 1, 29 (1987).
  25. Buzsaki, G., Wang, X. J. Mechanisms of gamma oscillations. Annu Rev Neurosci. 35, 203-225 (2012).
  26. Goutagny, R., Jackson, J., Williams, S. Self-generated theta oscillations in the hippocampus. Nat Neurosci. 12, 1491-1493 (2009).
  27. Bland, B. H. The physiology and pharmacology of hippocampal formation theta rhythms. Prog Neurobiol. 26, 1-54 (1986).
  28. Leung, L. S. Generation of theta and gamma rhythms in the hippocampus. Neurosci Biobehav Rev. 22, 275-290 (1998).
  29. Shin, J., Talnov, A. A single trial analysis of hippocampal theta frequency during nonsteady wheel running in rats. Brain Res. 897, 217-221 (2001).
  30. Shin, J. A unifying theory on the relationship between spike trains, EEG, and ERP based on the noise shaping/predictive neural coding hypothesis. Biosystems. 67, 245-257 (2002).
  31. Kramis, R., Vanderwolf, C. H., Bland, B. H. Two types of hippocampal rhythmical slow activity in both the rabbit and the rat: relations to behavior and effects of atropine, diethyl ether, urethane, and pentobarbital. Exp Neurol. 49, 58-85 (1975).
  32. Lu, B. L., Shin, J., Ichikawa, M. Massively parallel classification of single-trial EEG signals using a min-max modular neural network. IEEE Trans Biomed Eng. 51, 551-558 (2004).
  33. Robinson, T. E., Kramis, R. C., Vanderwolf, C. H. Two types of cerebral activation during active sleep: relations to behavior. Brain Res. 124, 544-549 (1977).
check_url/es/55089?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Müller, R., Papazoglou, A., Soos, J., Lundt, A., Wormuth, C., Henseler, C., Ehninger, D., Broich, K., Weiergräber, M. Automatic Detection of Highly Organized Theta Oscillations in the Murine EEG. J. Vis. Exp. (121), e55089, doi:10.3791/55089 (2017).

View Video