インフルエンザウイルスAおよびBの急速な分子の検出と分化

インフルエンザウイルス感染症は、罹患率および死亡率は毎年^1、2、3の有意な量を生じさせます。合併症のないインフルエンザは、発熱、筋肉痛、頭痛、および非生産的な咳^4、5として憲法と呼吸器症状によって特徴付けられます。高齢者、幼児、免疫不全患者、および基礎となる併存疾患を持つ患者は、肺炎、心筋炎、中枢神経系疾患、または死亡^6、7などの重篤な合併症のリスクが高いです。

インフルエンザ感染は、疾患の重症度と長さ^8を減らすことができ、症状の発症の48時間以内に抗ウイルス療法の迅速な投与の他の呼吸器ウイルスからユニークです。インフルエンザの迅速な同定もされています不必要な抗生物質^9、10の使用を低減することが示さ。また、インフルエンザ感染症の入院患者は、適切な感染制御予防策と孤立した部屋に配置する必要があります。しかし、非インフルエンザウイルスによって引き起こされる呼吸器疾患は、臨床的にインフルエンザと区別するのが困難な場合があります。この理由のため、インフルエンザのための迅速かつ正確な診断試験は、臨床患者管理のために非常に重要です。

いくつかのアッセイは、インフルエンザウイルスの検出および同定のために利用可能です。彼らは15〜30分^{11 12}内の結果を使用して提供することが簡単であるため、迅速なインフルエンザ抗原検出試験（RIDTs）が広くポイント・オブ・ケア検査として臨床で使用されています。しかし、その感度は、製造業者およびテストされている人口、およびインフルエンザの種類とsubtyに応じて広く（百分の10から80）を変化させますPE ^{13、14、15。}直接蛍光アッセイ（DFAS）はRIDTsよりも優れた感度を提供しますが、処理時間は大きい（〜3時間）であり、熟練した技術者^16、17までに完了する必要があります。ウイルス培養は、インフルエンザ診断のゴールドスタンダードとなっており、両方RIDTsとDFAS ¹⁸以上の感度が向上しています。しかし、インフルエンザウイルス培養は、患者管理^19を助けるには、その有用性を減少させる、完了するために2-14 Dからどこでも取ることができます。最後に、核酸増幅検査（NAAT）がインフルエンザ診断における新たなゴールドスタンダードとして培養技術を交換しました。 NAATは、数時間でインフルエンザを検出するための最大感度を有すると考えられます。しかし、NAATは、最も高価なアッセイであると^5を実行するため^の特殊な装置や技術を必要とします<sアップ^{>、20、21、22、23、24、25。}

ここで説明するインフルエンザAおよびBアッセイは、容易に入手可能である第一CLIA-放棄分子の迅速なインフルエンザ検査です。このアッセイは、分子ビーコンプローブを使用してターゲット検出したインフルエンザ特異的プライマーを用いた等温増幅を使用していますニッキングエンドヌクレアーゼ増幅反応（NEAR）を使用することによって動作します。このアッセイは、BからA型インフルエンザを区別設定し、一つのサンプルを処理するために2分を必要とし、完了するまでに15分の合計が必要です。

ここでは、インフルエンザA＆Bアッセイのためのプロトコルを提示します。また、我々はアーカイブされた鼻咽頭スワブにインフルエンザAの性能およびBアッセイを比較するサンプルデータセット（NPS）を提供するウイルス輸送培地（VTに格納された試験片他の呼吸器病原体パネルアッセイとM）。