Récolte sélective de Marginating-pulmonaires Leucocytes

Leucocytes adhérant aux capillaires des poumons ( par exemple, marginating-pulmonaire (MP) leucocytes) ¹ ont été montrées pour présenter la composition leucocytaire distincte et une activité unique par rapport aux leucocytes d'autres compartiments immunitaires (par exemple, la circulation, de la rate, la moelle osseuse) ^{2- 4.} Par exemple, exposition MP-leucocytes plus tueuses naturelles (cellules NK) cytotoxicité contre les cellules tumorales différentes, par rapport à circulants et spléniques cellules NK, ainsi que l'ARN messager différencié (ARNm) niveaux et augmentation de la sécrétion de cytokines pro- et anti-inflammatoires. La composition des cellules est également différenciée des leucocytes circulants comme MP-leucocytes ont un rapport plus élevé de l'immunité innée / adaptative par rapport aux leucocytes circulants (50% contre 30%, respectivement). L'objectif de la méthode présentée ici est de permettre la récolte sélective de MP-leucocytes, afin d'étudier ce compartiment immunitaire important et unique (population cellulaire), et elucIDATE l'impact des diverses manipulations (par exemple, l' activation immunitaire) sur ces cellules spécifiques.

Pour comprendre l'importance de cette population unique, il est important de noter que le système immunitaire peut contrôler les cellules tumorales circulantes, des micrométastases et des maladies résiduelles par des fonctions in vivo de l' immunité à médiation cellulaire (CMI). Cette capacité est évidente malgré l'échec précédent du système immunitaire pour contrôler la tumeur primaire, et amplement étayée par des preuves in vivo chez des patients cancéreux et des modèles animaux ^5. Surtout, ces résultats sont souvent incompatibles avec in vitro et ex vivo études qui rapportent que la plupart des cellules tumorales autologues sont résistantes à la cytotoxicité par la circulation des leucocytes dans des échantillons de sang chez les humains et les animaux (mesuré par les essais de cytotoxicité) ^6,7. Cet écart peut être attribué à l'existence in vivo des populations leucocytaires distincts, tels que mentionnés ci lesusmentionné population leucocytaire MP, et plus particulièrement son sous – population de cellules NK activées ^3. En effet, les cellules tumorales syngéniques (de MADB106), qui se sont révélés être résistants à la circulation et les leucocytes spléniques, se sont révélés être lysées par les cellules NK-MP ^3,8. Ainsi, les cellules prétendument «NK» résistantes MADB106 qui produisent des métastases aux poumons de fischer344 (F344), les rats sont contrôlés par des cellules NK-MP, mais pas par circulation ou des cellules NK spléniques qui sont couramment étudiées compte tenu de leur facilité d'accès.

MP-leucocytes purifiés actifs et ne sont pas accessibles par les méthodes classiques de récolte de leucocytes dans les poumons, qui sont basés sur un broyage du tissu pulmonaire ou la dégradation biologique ^9. Notre approche présente deux avantages majeurs par rapport aux approches de traitement des tissus. Tout d'abord, la méthode de perfusion récolte sélective MP-leucocytes, en les séparant des autres cellules qui proviennent du parenchyme pulmonaire interstitielle et compar broncho-alvéolairetments. En second lieu, la meilleure technique de perfusion préserve l'intégrité et le milieu physiologique de la MP-leucocytes, à la différence du broyage et le traitement biologique des approches qui endommagent les cellules, modifier leur morphologie et induisent la production et la libération de divers facteurs qui modulent l'activité immunitaire et plus particulièrement répriment NK ¹⁰ cytotoxicité.

Les poumons sont un organe cible majeure pour les métastases du cancer et pour diverses maladies infectieuses. Toutes les cellules cancéreuses circulantes et des cellules infectées passent à travers les capillaires pulmonaires où ils ont besoin de se déformer et d'interagir avec des cellules endothéliales capillaires et les leucocytes résidents. Dans ces conditions, les cellules circulantes peuvent être facilement ciblés par MP-leucocytes résidents. Il semble donc intéressant de disposer biologiquement leucocytes activés dans ce compartiment immunitaire, et il est important d'étudier cette MP-population unique dans différents milieux biologiques, expérimentaux et cliniques. Il est digne de noter que syl' activation stemic immunitaire par divers-réponse modificateurs biologiques (par exemple l' acide polyinosinique-polycytidylique (poly I: C) ou de type C CpG ODN (CpG-C ODN)) ont été montrés pour activer MP-leucocytes plus de leucocytes circulants ^{3, 8,11.}