A Cost-effective and Reliable Method to Predict Mechanical Stress in Single-use and Standard Pumps

Ina Dittler; Wolfgang Dornfeld; Reto Sch&#246;b; Jared Cocke; J&#252;rgen Rojahn; Matthias Kraume; Dieter Eibl

doi:10.3791/53052

JoVE Journal > Engineering

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Ingeniería

Une méthode rentable et fiable pour prévoir stress mécanique en usage unique et de pompes standard

Published: August 05, 2015

doi:

10.3791/53052

Ina Dittler¹, Wolfgang Dornfeld², Reto Schöb², Jared Cocke³, Jürgen Rojahn³, Matthias Kraume⁴, Dieter Eibl¹

¹Institute of Biotechnology, School of Life Sciences and Facility Management,Zurich University of Applied Sciences, ²Levitronix Ltd., ³SOPAT Ltd., ⁴Institute of Chemical and Process Engineering,Technische Universität Berlin

Summary

Shear stress investigations on an oil-water emulsion system result in drop breakup over the experimental time. To count drop sizes in pumping processes, the suitability of inline endoscopy was successfully demonstrated in this protocol.

Abstract

Les pompes sont principalement utilisés lors du transfert de bouillons de culture stériles dans les processus de production biopharmaceutiques et biotechnologiques. Cependant, au cours du processus de pompage se produisent des forces de cisaillement qui peut conduire à une perte de produit qualitative et / ou quantitative. Pour calculer le stress mécanique avec dépens expérimentale limitée, un système d'émulsion huile-eau a été utilisé, dont la pertinence a été démontrée pour les détections de taille de goutte dans des bioréacteurs ^1. Comme l'éclatement de la chute du système d'émulsion huile-eau est fonction de la contrainte mécanique, déposer tailles doivent être comptabilisés au cours de la durée de l'essai de cisaillement enquêtes de stress. Dans des études antérieures, l'endoscopie en ligne a été montré pour être une technique de mesure précise et fiable de détection de taille de gouttes dans des dispersions liquide / liquide. L'objectif de ce protocole est de montrer la pertinence de la technique d'endoscopie ligne pour déposer les mesures de taille dans le processus de pompage. Afin d'exprimer la taille des gouttes, le diamètre moyen Sauterd ₃₂ a été utilisé comme représentant le diamètre de gouttes dans l'émulsion huile dans l'eau. Les résultats ont montré une faible variation dans les diamètres moyens Sauter, qui ont été quantifiées par des écarts-types en dessous de 15%, indiquant la fiabilité de la technique de mesure.

Introduction

Les pompes sont utilisés pour transférer des cultures de cellules dans les industries pharmaceutiques et biotechnologiques. Pendant le processus de pompage, le stress mécanique peut entraîner des dommages cellulaires irréversibles, ce qui pourrait nuire à la quantité et la qualité du produit ^1-4. Le niveau de stress mécanique dépend des réglages de type de la pompe et de la pompe, comme l'a démontré dans des études précédentes ^5-6. Communément, péristaltiques, seringues et du diaphragme pompes sont utilisées pour les applications basées (SU) technologie à usage unique. Ces pompes conduisent à des forces de cisaillement locales élevées provoquées par la compression de la tubulure de la pompe et l'écoulement pulsatoire ^7.

Afin de remédier à ces inconvénients, les pompes centrifuges à lévitation magnétique (pompes centrifuges) de lévitation magnétique constituer une alternative prometteuse. Le moteur est entraîné magnétiquement, afin d'éviter des fentes étroites entre la roue et le carter de pompe (figure 1). Une précédente étude a enquêté sur le centrifuge de lévitation magnétiquepompes et a montré le stress mécanique inférieure ovaire de hamster chinois (CHO) par rapport aux pompes à membrane péristaltique et 4 pistons à ^5. En outre, les analyses d'hémolyse révélé aucun traumatisme du sang et la formation de thrombus significative sur une gamme de conditions de fonctionnement à l'aide de ces pompes ^8-11. Les résultats démontrent que l'utilisation de ces pompes spécialement conçues applique moins de stress mécanique sur les systèmes biologiques en comparaison avec les pompes péristaltiques et du diaphragme. Pour étudier le stress mécanique avec dépens expérimentale limitée, un système de modèle d'émulsion huile-eau est recommandé en raison de son coût (environ 99,8%) et le temps réduit (environ 99,5%) par rapport à l'application des systèmes de culture de cellules biologiques.

Comme l'éclatement de la chute du système d'émulsion huile-eau est fonction de la contrainte mécanique, déposer tailles doivent être comptabilisés au cours de la durée de l'essai de cisaillement enquêtes de stress. De nombreuses techniques pour le dimensionnement gouttes sont disponibles, wUEL peuvent être divisés en son, laser et des techniques basées photo ^12. En particulier, l'utilisation de la sonde inline endoscopie photo-optique montre tailles de gouttes presque identiques pour les détections manuelles et automatiques (écart type en dessous de 10%) et permet une détection de 250 gouttes par minute ^13. En raison de sa précision et de fiabilité, la technique de l'endoscope a été démontré être une technique de mesure standard efficace pour les distributions de taille des gouttes dans des dispersions liquide / liquide en comparaison avec d'autres sondes couramment utilisés (par exemple, la fibre optique avant-arrière-rapport (FBR) capteur , la méthode de faisceau focalisé de réflectance (FBRM) et la technique de mesure optique de réflexion à deux dimensions (2D-ORM)) ^12,14. Par ailleurs, la pertinence de l'endoscopie en ligne pour mesurer des tailles de gouttes dans un récipient agité a été démontré à plusieurs reprises dans des enquêtes précédentes ^15-18.

Basé sur une étude préalable ^6, ce protocole décritl'utilisation de la ligne endoscopie pour déterminer tailles de gouttes (Sauter diamètre moyen) d'un système d'émulsion huile-eau dans les pompes. Le diamètre moyen Sauter a été utilisée comme un critère de comparaison afin d'estimer la contrainte mécanique des multi-usage (MU) pompes Maglev centrifuges, une pompe péristaltique et à usage unique (SU) à 4 pistons pompe à membrane.

Figure 1. lévitation magnétique-système de pompe centrifuge. (A) Le principe d'un moteur sans palier et (B) l'PuraLev 200MU sont présentées à titre d'exemple. S'il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Protocol

Les enquêtes ont été effectuées en utilisant une configuration de pompe courante (Figu re 2), qui permet des expériences mécaniques à des débits de stress jusqu'à 60 L min -1 et la pression chute jusqu'à 2 bar à effectuer. Comme le montre la Fig u re 2, le dispositif expérimental est constitué de la cuve de stockage, le circuit de pompe, et l'équipement pour la technique d'endoscopie en ligne. La roue de la cuve de stockage a été utilisé pour mélanger le tensio-actif. Des éléments périphériques ont été intégrés dans la boucle fermée pour contrôler le débit V et chute de pression p à différents réglages de la pompe. Les enquêtes ont été modifiées en utilisant la vanne volant. 1. Configuration expérimentale Assurez-vous que le bioréacteur (D = 0,15 m, H / D = 2,2) est équipé d'une roue à aubes pour la dissolution de la surfactant et assurez-vous que le tube d'entrée plonge dans le liquide pour éviter une entrée de gaz. Équipez la boucle de pompe avec un port de la seringue, la pompe d'une enquête, d'un débitmètre à pince, un capteur de pression à usage unique et d'une vanne volant. Après connexion de la boucle de pompe à la cuve de stockage, connecter la tête de pompe au moteur et préparer la sonde d'endoscope. Montez le plan de réflexion variable, un miroir de rhodium dans ce cas, à la pointe de la sonde et régler la distance entre le miroir et la lentille à 150 um. Régler la vis à 100 um à concentrer la netteté de l'objectif. Branchez la sonde à l'stroboscope via un câble de fibre optique et la caméra de l'endoscope à l'ordinateur via un câble Ethernet. Ensuite, connecter l'appareil photo et le stroboscope ensemble via un câble déclencheur-box. Démarrez l'ordinateur et ouvrez le logiciel fourni par le fabricant, qui comprend une acquisition d'image et un logiciel de reconnaissance, ainsi que les logiciels résultat de l'analyseur. Sélectionnez le logiciel d'acquisition d'image dans le menu principal. Cliquez sur le bouton "Détecter périphérique" dans le coin supérieur gauche de l'écran pour détecter la caméra. Sous la rubrique «Paramètres de répertoire" sélectionnez l'emplacement sur l'ordinateur pour enregistrer les images et activer la commande «Créer déclencheur sous-dossiers". Entrez les paramètres de processus dans la section "Mode de déclenchement: Ready". Frame rate: 7.5 Hz Images par déclencheur: 50 Nombre de déclencheurs: 60 intervalle de déclenchement: 60 sec Après achèvement de tous les travaux préparatoires, versez 5 L d'eau déminéralisée dans la cuve de stockage et des commutateurs sur la pompe pour remplir la pompe et la boucle de pompe. Eteindre la pompe et ajouter 0,9 ml de tensioactif (c tensioactif = 0,18 ml L -1, tensioactif ρ, 20 ° C = 1070 kg m -3, concentration micellaire critique (cmc): ω cmc0; ≈ 0,018 ml L -1, ω tensioactif ≈ 10 · ω cmc) avec une pipette de 10 ml sous agitation. Après 10 min, le tensio-actif est complètement dissous. Eteignez la roue et tourner sur la pompe. Positionner la sonde d'endoscope de sorte que la lentille se trouve directement au-dessous du tube d'entrée. Réglez le débit de 3,4 L min -1 et la chute de pression de 0,03, 0,3 ou 0,61 bar en faisant varier la vitesse de la roue et la valve volant. Peser 6,3 g d'huile directement dans la seringue (β = 1,26 g d'huile L -1, huile ρ, 20 ° C = 989,5 kg m -3). Démarrez le logiciel d'acquisition d'image et ajouter l'huile via le port de la seringue. La pompe fonctionnant distribue les gouttes d'émulsion. Après 1 h, la fin de l'enquête de la contrainte de cisaillement et de nettoyer l'endoscope en ligne ainsi que le bioréacteuravec la boucle de pompe intégré. Par la suite, préparer le montage expérimental pour le prochain processus de pompage. 2. Mesure et analyse d'images Ouvrir le logiciel de reconnaissance automatique de l'image dans le menu principal. Sous la rubrique «Annuaire lot de Root" sélectionnez l'emplacement sur l'ordinateur pour sauvegarder les fichiers (tous * .csv). Sélectionnez la colonne "Chemin de la série d'image" et cliquez sur le bouton "Ajouter série d'images sous-dossiers" dans le coin inférieur gauche de l'écran pour charger la série d'images. Charger les paramètres de procédé qui sont fournis par le fabricant. Sélectionnez la colonne "Paramètres de recherche (* .pss ou auftrag _ *. Mat)" et cliquez sur le bouton "Set Paramètres de recherche" dans le milieu-bas de l'écran pour charger les paramètres du procédé afin de préciser la reconnaissance de chute. Sélectionnez la colonne "motif de recherche (* .psp ou F _ *. Mat) et cliquez sur le bouton" Set Recherche Pattern "dans le coin inférieur droit de l'écran pour charger les paramètres du procédé afin de préciser l'analyse de chute. Lancez la reconnaissance de l'image en cliquant sur le bouton "Démarrer Batch". Après l'achèvement de reconnaissance d'image, expriment les tailles de gouttes détectées par le moyen de Sauter diamètre (d 32), ou tout autre représentant la valeur moyenne ou de la distribution de choix en utilisant le logiciel de l'analyseur résultat. Ouvrez le logiciel résultat de l'analyseur dans le menu principal. Activez la commande "tous * .csv dans 1 dossier" et cliquez sur le bouton "Dossier (s) de charge» dans le coin supérieur gauche de l'écran pour charger le tout fichier * .csv précédemment enregistré. Sélectionnez la valeur correspondante (par exemple, Sauter diamètre moyen) dans la liste déroulante dans la moyenne supérieure de l'écran pour visualiser les résultats. Pour le calcul du diamètre entrer l'échelle de 0,6591 um pixel -1 sur la droite, qui est fourni par le fabricant. Figure 2. Montage expérimental circuit pompe pour l'installation de la pompe courante par endoscopie en ligne comme la technique de mesure:. (1) cuve de stockage, (2) le port de la seringue, (3) la pompe, (4) capteur de pression, (5) capteur de débit, ( 6) stroboscope, (7) ordinateur avec le logiciel fourni par le fabricant, et (8) la sonde d'endoscope. S'il vous plaît, cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Representative Results

Évaluation optique Fig u re 3 montre les images de reconnaissance de la particule après un temps de pompage de 1 heure. Les quatre images supérieures montrent les gouttes avant la reconnaissance et les quatre images du bas montrent les gouttes marquées par le logiciel de reconnaissance. Les gouttes détectés sont mis en évidence avec un bord vert. La comparaison des images supérieures et inférieures montre que les bords de gouttes ont été détectées avec précision par le logiciel de reconnaissance d'image. Les images sur la gauche montrent la distribution de chute pour le centrifuge de lévitation magnétique Pompes PuraLev 200MU et PuraLev 600MU, et ceux de droite montrent le diaphragme 4-piston et la pompe péristaltique. Une évaluation optique a permis une classification initiale de la contrainte mécanique dans le système modèle d'émulsion. Cette étude a révélé que les grandes tailles de gouttes et goutte compte inférieurs ont été générés par les pompes centrifuges MagLev par rapport à la diaphr 4 pistonspompe péristaltique et AGA. Par conséquent, les pompes centrifuges de Maglev, en particulier le PuraLev 200MU, ont montré la rupture de chute réduite, indiquant contraintes mécaniques inférieures. Figure 3. Images de l'endoscopie en ligne. Emulsion gouttes avant (A, B, C, D) et après (E, F, G, H) la reconnaissance de particules après 1 h de pompage en utilisant (A, E) l'PuraLev 200MU, ( B, F) l'PuraLev 600MU, (C, G), la pompe à diaphragme à 4 pistons, et (D, H), la pompe péristaltique dans des conditions de fonctionnement identiques (3,4 L min -1 et 0,03 bar). S'il vous plaît cliquer ici pour voir une plus grande version de ce chiffre. Sauter moiun diamètre D'autres enquêtes ont révélé des écarts-types en dessous d 32 ± 0,4 um et garantis des résultats reproductibles lors de l'utilisation en ligne endoscopie 19. Par conséquent, plusieurs enquêtes ont été pas requis pour cette approche, ce qui réduit en outre la charge expérimentale. Afin d'exprimer la taille des gouttes, l'Sauter diamètre moyen d 32 (voir Eq. 1) a été utilisé comme le diamètre représentant de gouttes dans l'émulsion huile-eau pour cette approche. En général, le diamètre moyen Sauter a diminué au fil du temps pour tous les types de pompes et réglages de la pompe jusqu'à atteindre l'état d'équilibre 12. Enquêtes dans cette étude ont confirmé la progression du diamètre moyen de Sauter (Fig u re 4A à D), les courbes de la PuraLev 200MU (Fig u re &# 160; 4A) et la pompe péristaltique (Fig u re 4D) étant exemplaire abordés dans ce protocole. Contrairement à la PuraLev 200MU, le moyen de Sauter diamètres étaient jusqu'à 40% plus faible pour la pompe péristaltique dans les mêmes conditions de fonctionnement (débit = 3,4 L min -1; chute de pression = 0,03 bar). En conséquence, des contraintes mécaniques plus élevées conduit à une rupture de chute et une augmentation des tailles de goutte plus petites par conséquent. En outre, le diamètre moyen de Sauter a diminué avec l'augmentation de chute de pression dans le PuraLev 200MU (Fig u re 4A), ce qui indique la dépendance de la taille des gouttes sur la chute de pression. En revanche, la pompe péristaltique a montré un diamètre moyen de Sauter de 32,60min d = 10 um à la fin de l'expérience pour tous les paramètres du procédé (figu re 4D). Par conséquent, le diamètre moyen de Sauter a été trouvé pour être indépendant de la chute de pression. Cependant, les résultats reflètent la compréhension physique de la rupture de chute: le stress mécanique plus élevée, plus petites Sauter diamètres moyens ont été déterminés (voir aussi Fig u re 5). Pour chaque point de mesure, au moins 300 gouttes ont été déterminées afin de garantir une certitude statistique. L'écart-type maximal a diminué pour la PuraLev 200MU de 32,4min d ± 42 um et pour le PuraLev 600MU de 32,6min d ± 21 um à environ 32 d ± 0,5 um à la fin du processus de pompage. L'écart-type a entraîné une diminution de l'augmentation de la distribution de taille de goutte homogène jusqu'à ce que l'état d'équilibre a été atteint. En comparaison to les pompes centrifuges MagLev, les pompes à membrane péristaltiques et 4 pistons révélé écarts types en dessous d 32 ± 10 um. (1) Figure 4. profils typiques de Sauter signifient diamètres D 32 dans le temps et la détermination des Sauter diamètres moyens mesurés D 32, m. Comparaison des diamètres moyens de Sauter D 32 (A) pour la PuraLev 200MU, (B) pour la PuraLev 600MU, (C) de la pompe à membrane à piston 4, et (D) de la pompe péristaltique. Les diamètres moyens Sauter D 32 ont été déterminées à un taux de 3,4 L min -1 de débit et de pression des gouttes allant de 0,03 à 0,61 bar.Le mesurée Sauter diamètre moyen d 32, m a été calculée pour les 10 dernières minutes (limite). L'écart type des diamètres moyens Sauter résultant D 32 (N ≥ 300) est affichée. S'il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure. Sauter moyen de mesure de diamètre en tant que système de comparaison Comme décrit ci-dessus, l'Sauter diamètre moyen a diminué au fil du temps jusqu'à ce que les tailles de gouttes ont atteint l'état d'équilibre. Dans les dernières 10 min du temps expérimental, la valeur moyenne de l'Sauter diamètre moyen a été calculé pour déterminer le diamètre de Sauter mesurée, qui a été utilisée comme un critère de comparaison moyenne (voir la limite de la figure u re 4A-D). Les Sauter diamètres moyens mesurés D 32, m sont présentés pour un taux de 3,4 L de flux &# 160; min entre -1 et une chute de pression 0,03 au 0,61 bar Fig u re 5. Sauter plus grands diamètres moyens mesurés ont été déterminées pour les deux pompes centrifuges (MagLev 200MU et 600MU) et la pompe à membrane à piston à quatre chutes de pression plus faibles et des vitesses de roue. La pompe péristaltique a révélé mesuré moyen de Sauter des diamètres d 32, m = 10 um pour tous les paramètres de processus. Comme mentionné précédemment, les forces de cisaillement sont indépendants de la chute de pression de la pompe péristaltique. Les diamètres moyens plus grand Sauter mesurées de d 32, m = 36 um pour la PuraLev 200MU et d 32, m = 34 um pour la PuraLev 600MU ont été obtenus à une chute de pression de 0,03 bar. En comparaison avec leurs homologues, le Maglev pompe centrifuge série obtient jusqu'à 59% plus grande mesurée Sauter signifie diamètres. Ce résultats ont indiqué un taux de rupture de chute et donc le stress mécanique inférieure résultant de l'utilisation des pompes centrifuges. L'écart type de la moyenne mesurée Sauter diamètres pendant l'état d'équilibre a été en dessous de 15%, confirmant ainsi des valeurs fiables et précises pour les tailles de gouttes. Figure 5. Comparaison des Sauter diamètres moyens mesurés D 32, m. Mesuré Sauter diamètres moyens pour les pompes Maglev centrifuges et leurs homologues à 3,4 L min -1 et de pression gouttes de 0,03, 0,30 et 0,61 bar. Les écarts-types issus des Sauter diamètres moyens mesurés D 32, m pendant l'état d'équilibre sont présentés. Abréviations Please cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure. 2D-ORM la mesure de la réflectance optique à deux dimensions CCD dispositif à couplage de charge CHO Ovaire de hamster chinois cmc concentration micellaire critique FBR avant-arrière-rapport FBRM méthode de réflexion de faisceau focalisé MU multi-usage SU usage unique Nomenclature [M 3 s -1] débit c [M 3 m -3] concentration 32 d [M] Sauter diamètre moyen 32 d, m [M] Sauter mesuré le diamètre moyen d s [M] Diamètre de la surface d v [M] diamètre moyen en volume F [Hz] fréquence n [S -1] vitesse de roue N [-] nombre de gouttes p Pennsylvanie la chute de pression t seconde temps β [kg m -3] concentration massique ρ [kg m -3] densité 69; [M 3 m -3] fraction de masse Tableau 1. Tableau des abréviations et la nomenclature.

Discussion

L'objectif de ce protocole est de montrer la pertinence de la technique d'endoscopie ligne pour déposer les mesures de taille dans le processus de pompage. À cette fin, déposer tailles d'un système d'émulsion huile-eau ont été déterminées et une Sauter diamètre moyen mesuré a été calculé pour caractériser le stress mécanique de la centrifuge de lévitation magnétique pompes ainsi que leurs homologues, une pompe péristaltique et une pompe à diaphragme à 4 pistons. Les résultats ont montré une faible variation de la valeur mesurée Sauter signifie diamètres, qui ont été quantifiés par les écarts types de dessous de 15%, indiquant que des tailles de goutte ont été mesurées avec précision et fiabilité. En conséquence, le diamètre moyen de Sauter mesuré peut être utilisé avec succès en tant que critère de comparaison pour évaluer les contraintes mécaniques de la pompe étudiées. Les pompes centrifuges de lévitation magnétique a révélé Sauter grands diamètres moyens mesurés, indiquant contraintes mécaniques inférieures sur des gouttes d'émulsion par rapport aux pompes à membrane péristaltiques et à 4 pistons. Au Studs à ce jour, en ligne endoscopie a été montré pour être une technique simple et robuste pour la chute fiabilité de la mesure de la taille ^{1,6,12-14,20-21,} qui a également été confirmé par cette étude. En comparaison avec les techniques de mesure alternatifs, tels que le capteur de FBR de fibre optique, et la FBRM la technique 2D-ORM, la technique de l'endoscope peut être utilisé comme la méthode de référence pour obtenir des données précises dans des applications ^12,14 liquide / liquide.

La manipulation facile de l'endoscopie en ligne et la simple production de système d'émulsion huile-eau non-biologique permet une procédure simple pour les détections de taille de goutte, selon le texte de protocole (voir ci-dessus). Néanmoins, il convient de mentionner que la position de la sonde d'endoscope dépend de l'écoulement de fluide dans le récipient de stockage. D'autres études (données non présentées) ont révélé que la lentille de la sonde doit être placée directement au-dessous du tube d'entrée pour des débits inférieurs à 5 L min ^-1afin d'éviter une détection multiple d'une goutte ^19. Pour des images nettes à des débits de plus de 5 L min ^-1, il est recommandé de placer la sonde au moins 10 cm de distance du tube d'entrée. Indépendant des paramètres du procédé, le titulaire de l'endoscopie en ligne doit être stable afin d'éviter un décalage de la sonde, ce qui peut entraîner des images floues.

En outre, il convient en particulier de noter que la taille des gouttes détecté est proche de la limite inférieure de détection du système de photo-optique appliqué, où le diamètre minimal de gouttes détectable est de 6,5 um. Comme le logiciel fourni par le fabricant a été amélioré, les techniques d'endoscopie en ligne peuvent détecter de manière fiable une taille de goutte minimale de 1 um. En outre, le traitement de l'image sera développé pour permettre le suivi en ligne des applications industrielles.

Bien que la présente étude a porté sur des débits relativement faibles de jusqu'à 3,4 L 60; min ^-1, les études futures devraient envisager un plus large éventail de conditions de fonctionnement. Premières enquêtes ont été menées à des débits allant jusqu'à 20 L min ^-1 (données non présentées). Cependant, une dilution 1: 2 (c _tensioactif = 0,09 ml L ^-1, c _huile = 0,64 ml L ^-1) du système d'émulsion huile-eau est recommandé à des débits de plus de 10 L min ^{-1 19,} comme l'augmentation rupture de chute causée par le stress mécanique plus élevée autrement nuirait déposer détection et de réduire le nombre de gouttes détectées. Des essais ont été réalisés avec une dilution de 1: 2 et comparés avec les résultats d'un système d'émulsion huile dans l'eau non dilué. Pour les deux approches, le moyen de Sauter diamètres ont été mesurés de manière fiable (écart type en dessous de 5%). Par conséquent, la fraction de volume réduit (1: 2 de dilution) n'a pas influencé la mesure Sauter signifie diamètres, et donc une rupture goutte à goutte a été négligeable.

nt "> Ces puissantes approches expérimentales fournissent une bonne base pour l'amélioration de la technique d'endoscopie, ainsi que le logiciel d'acquisition d'images, la reconnaissance et le résultat analyseur connexes. En outre, la pertinence de la technique d'endoscopie de classer les types de pompes et séries en fonction de leur mécanique le stress a été démontré avec succès. Les résultats obtenus sont essentiels pour la pompe développement de la conception et l'optimisation des pompes pour réduire les dommages cellulaires.

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à remercier la Commission pour la technologie et l'innovation (CTI, Suisse) pour leur soutien financier (n ° 13236,1 PFFLI-LS).

Materials

CCD camera	Allied Vision Technologies GmbH	GX2750	Equipment for inline endoscopy
C-Flex Biopharmaceutical Tubing	Saint-Gobain Performance Plastics	374-375-4	Tube Select a tubing length of about 45 cm before the pump.
C-Flex Biopharmaceutical Tubing	Saint-Gobain Performance Plastics	374-375-3	Tube Select a tubing length of about 45 cm after the pump and clamp on the flow sensor to this tubing.
CLAVE Connector	Victus	011-C2000	Sampling port
Controller LPC-200.1-02	Levitronix GmbH	100-30030	PuraLev 200MU controller
Controller LPC-600.1-02	Levitronix GmbH	100-30033	PuraLev 600MU controller
LeviFlow Clamp-On Sensor LFSC-12	Levitronix GmbH	100-30329	Flow sensor for flow rates below 5 L min^-1
LeviFlow Converter LFC-1C-CS	Levitronix GmbH	100-30328	Flow sensor output device
Masterflex I/P Easy Load	Fisher Scientific AG	EW-77963-10	Peristaltic pump
Mitos free flow valve	Parker Hannifin Europe Sàrl	FFLQR16S6S6AM	Valve
Mobil Eal Arctic	Exxon Mobil Corporation	Mobil EAL Arctic 22	Oil Prepare the emulsion directly before the experiment.
Motor	Elektromotorenwerk Brienz AG	7WAC72N4THTF	Motor for agitator shaft
Motor BSM-1.4	Levitronix GmbH	100-10005	PuraLev 200MU motor
Motor LPM-600.4	Levitronix GmbH	100-10038	PuraLev 600MU motor
Norm-Ject 10 mL Luer Lock	Restek Corporation	22775	Syringe
Pump Head LPP-200.5	Levitronix GmbH	100-90525	PuraLev 200MU pump head
Pump Head LPP-600.18	Levitronix GmbH	100-90548	PuraLev 600MU pump head
Quattroflow 1200-SU	Almatechnik AG	QF 1200	4-piston diaphragm pump
SciPres Sensor	SciLog	080-695PSX	Pressure sensor
SciPres Sensor Monitor	SciLog	080-690	Pressure sensor output device
SOPAT-VF Inline Endoscopic Probe	SOPAT GmbH		Inline endoscopy
Stroboscope	Drello GmbH & Co KG	Drelloscop 255-01	Equipment for inline endoscopy
Triton X-100	Sigma-Aldrich	X100	Surfactant Handle with gloves and goggles. (acute toxicity, eye irritation)

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Dittler, I., Dornfeld, W., Schöb, R., Cocke, J., Rojahn, J., Kraume, M., Eibl, D. A Cost-effective and Reliable Method to Predict Mechanical Stress in Single-use and Standard Pumps. J. Vis. Exp. (102), e53052, doi:10.3791/53052 (2015).